Analysis of the effectiveness of gu

Analysis of the effectiveness of guppy (Poecilia reticulata Peters) immunization based on measurements of antibody (Ab) titers suffers from a shortage of reagents that can detect guppy antibodies (Abs). To overcome this problem, we immunized mice with different preparations of guppy immunoglobulins (Igs) and used the mouse antisera to develop a quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The most efficient immunogen for mouse immunization was guppy Igs adsorbed on protein A/G beads. Antisera from mice boosted with this immunoglobulin (Ig) preparation were highly specific and contained high Ab titers. They immunoreacted in a Western blot with Ig heavy and light chains from guppy serum, and Ig heavy chain from guppy whole-body homogenate. The mouse anti-guppy Ig was applied in an ELISA aimed at comparing the efficiency of different routes of guppy immunization against Tetrahymena: (i) anal intubation with sonicated Tetrahymena (40,000 Tetrahymena/fish in a total volume of 10 μL) mixed with domperidon, deoxycholic acid and free amino acids (valine, leucine, isoleucine, phenylalanine and tryptophan), or (ii) intraperitoneal (i.p.) injection of sonicated Tetrahymena in complete Freund's adjuvant (15,000 Tetrahymena/fish in total a volume of 20 μL). Negative control fish were anally intubated with the intubation mixture without Tetrahymena, or untreated. ELISA measurement of anti-Tetrahymena Ab titer revealed a significantly higher level of Abs in i.p.-immunized guppies, compared to the anally intubated and control fish. In addition, the efficiency of immunization was tested by monitoring guppy mortality following (i) i.p. challenge with Tetrahymena (900 Tetrahymena/fish) or (ii) cold stress followed by immersion in water containing 10,000 Tetrahymena/mL. Fish mortality on day 14 post-Tetrahymena infection by i.p. injection exceeded 50% in the control and anally intubated fish, compared to 31% in i.p.-immunized fish. Immunization did not protect from pathogen challenge by immersion. The results suggest a direct correlation between the anti-Tetrahymena Ab response and fish resistance to i.p.-injected Tetrahymena, but not to infection by immersion preceded by cold stress.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์ประสิทธิภาพของปลาหางนกยูง (ปลา reticulata Peters) ตามขนาดของ titers แอนติบอดี (Ab) รับวัคซีน suffers จากขาด reagents ที่สามารถตรวจพบแอนตี้ปลาหางนกยูง (Abs) เพื่อเอาชนะปัญหานี้ เรา immunized หนูกับเตรียมแตกต่างกันของปลาหางนกยูง immunoglobulins (Igs) และใช้ antisera เมาส์พัฒนาวิเคราะห์เชิงปริมาณเอนไซม์ลิงค์ immunosorbent (ELISA) ปลาหางนกยูง Igs adsorbed บนเม็ดโปรตีน A/G immunogen มีประสิทธิภาพสูงสุดสำหรับเมาส์รับวัคซีนได้ เฉพาะ และมีความสูง titers Ab สูง antisera จากหนูเพิ่มขึ้นกับเตรียม immunoglobulin (Ig) นี้ได้ พวกเขา immunoreacted ในตะวันตกทำลาย Ig หนักและไฟจากซีรั่มของปลาหางนกยูง และโซ่ Ig โซ่หนักจากปลาหางนกยูงทั้งตัว homogenate เมาส์ใช้ Ig ป้องกันปลาหางนกยูงในการ ELISA เพื่อเปรียบเทียบประสิทธิภาพของกระบวนการผลิตต่าง ๆ การรับวัคซีนปลาหางนกยูงกับ Tetrahymena: ท่อช่วยหายใจ (i) ทางทวารหนักกับ sonicated Tetrahymena 40000 Tetrahymena/ปลา ในปริมาณรวมของ 10 μL) ผสมกับ domperidon, deoxycholic กรด และกรดอะมิโนอิสระ (วาลีน leucine, isoleucine, phenylalanine และทริปโตเฟน), หรือ (ii) intraperitoneal (i.p.) ฉีด Tetrahymena sonicated ในสมบูรณ์ Freund ของประเมิน 15000 Tetrahymena/ปลา รวมปริมาตรของ 20 μL) ควบคุมลบปลา anally intubated ด้วยส่วนผสมของท่อช่วยหายใจโดย Tetrahymena หรือไม่ถูกรักษา ระดับสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของ Abs ใน i.p. immunized guppies เมื่อเทียบกับ anally intubated เปิดเผย ELISA วัดป้องกัน Tetrahymena Ab titer และควบคุมปลา นอกจากนี้ ทดสอบประสิทธิภาพการรับวัคซีน โดยการตรวจสอบการตายของปลาหางนกยูงดังต่อไปนี้ (i) i.p. ท้าทายกับ Tetrahymena 900 Tetrahymena/ปลา) หรือ (ii) เย็นความเครียดตามมา ด้วยการแช่ในน้ำที่ประกอบด้วยมล 10000 Tetrahymena ปลาตายในวันที่ 14 ลง Tetrahymena เชื้อ i.p. ฉีดเกิน 50% ในการควบคุมและปลา anally intubated เปรียบเทียบกับ 31% ในปลา i.p. immunized ไม่รับวัคซีนไม่ป้องกันจากการศึกษาความท้าทาย โดยแช่ ผลการแนะนำความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างการป้องกัน Tetrahymena Ab ตอบและปลาต้านทานฉีด i.p. Tetrahymena แต่ไม่ติดเชื้อโดยการแช่เย็นความเครียดก่อนหน้า

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์ประสิทธิภาพของปลาหางนกยูง (Poecilia reticulata Peters) การสร้างภูมิคุ้มกันขึ้นอยู่กับขนาดของแอนติบอดี (Ab) titers ทนทุกข์ทรมานจากปัญหาการขาดแคลนของสารเคมีที่สามารถตรวจจับปลาหางนกยูงแอนติบอดี (ABS) ที่จะเอาชนะปัญหานี้เราวัคซีนหนูที่มีการเตรียมการที่แตกต่างกันของ immunoglobulins ปลาหางนกยูง (Igs) และใช้ฉีดเมาส์เพื่อพัฒนาเอนไซม์ที่เชื่อมโยงเชิงปริมาณทดสอบอิมมูโน (ELISA) แอนติเจนที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับการสร้างเสริมภูมิคุ้มกันโรคเมาส์ถูกปลาหางนกยูง Igs ดูดซับบนโปรตีนลูกปัด / G antisera จากหนูเพิ่มขึ้นด้วยอิมมูโนนี้ (Ig) การเตรียมมีความจำเพาะสูงและมี Ab สูง titers พวกเขา immunoreacted ในดวงตะวันกับ Ig โซ่หนักและเบาจากซีรั่มปลาหางนกยูงและ Ig โซ่หนักจากปลาหางนกยูง homogenate ทั้งร่างกาย เมาส์ต่อต้านปลาหางนกยูง Ig ถูกนำมาใช้ในวิธี ELISA มุ่งเป้าไปที่การเปรียบเทียบประสิทธิภาพของเส้นทางที่แตกต่างของการสร้างภูมิคุ้มกันปลาหางนกยูงกับเตตร้าไฮ: (i) การใส่ท่อช่วยหายใจทางทวารหนั​​กกับ sonicated เตตร้าไฮ (40,000 เตตร้าไฮ / ปลาในปริมาณรวมของ 10 ไมโครลิตร) ผสมกับ domperidon, กรด deoxycholic และกรดอะมิโนอิสระ (valine, Leucine, ไอโซลิวซีนเฟนนิลและโพรไบโอ) หรือ (ii) ช่องท้อง (IP) การฉีด sonicated เตตร้าไฮในแบบเสริม Freund สมบูรณ์ (15,000 เตตร้าไฮ / ปลารวมปริมาณ 20 ไมโครลิตร) ปลาควบคุมเชิงลบได้รับการใส่ท่อช่วยหายใจ anally ที่มีส่วนผสมใส่ท่อช่วยหายใจโดยไม่ต้องเตตร้าไฮหรือได้รับการรักษา การวัดวิธี ELISA ของ titer ต่อต้านเตตร้าไฮ Ab เปิดเผยระดับที่สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของ Abs ในปลาหางนกยูง ip-วัคซีนเมื่อเทียบกับปลา anally ใส่ท่อช่วยหายใจและการควบคุม นอกจากนี้ยังมีประสิทธิภาพในการสร้างภูมิคุ้มกันโรคได้รับการทดสอบโดยการตรวจสอบการตายของปลาหางนกยูงดังต่อไปนี้ (ก) ความท้าทาย ip กับเตตร้าไฮ (900 Tetrahymena / ปลา) หรือ (ii) ความเครียดเย็นตามด้วยการแช่ในน้ำที่มี 10,000 เตตร้าไฮ / มิลลิลิตร การตายของปลาในวันที่ 14 หลังการติดเชื้อเตตร้าไฮโดยการฉีด ip เกิน 50% ในการควบคุมและปลา anally ใส่ท่อช่วยหายใจเมื่อเทียบกับ 31% ในปลา ip-วัคซีน การฉีดวัคซีนไม่ได้ป้องกันความท้าทายจากการติดเชื้อโดยการแช่ ผลการวิจัยแนะนำความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างต่อต้านเตตร้าไฮ Ab การตอบสนองและความต้านทานปลา IP-ฉีดเตตร้าไฮ แต่ไม่ได้มีการติดเชื้อโดยการแช่นำโดยความเครียดเย็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ประสิทธิภาพของปลาหางนกยูง ( poecilia reticulata Peters ) ภูมิคุ้มกันขึ้นอยู่กับการวัดแอนติบอดีไตเตอร์ ( AB ) ทนทุกข์ทรมานจากการขาดแคลนสารเคมีที่สามารถตรวจจับปลาหางนกยูงแอนติบอดี ( ABS ) เพื่อเอาชนะปัญหานี้เราฉีดกระตุ้นหนูกับการเตรียมแตกต่างกันของปลาหางนกยูงมมูโนโกลบูลิน ( igs ) และใช้เมาส์เพื่อพัฒนาเชิงปริมาณแอนติ enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA ) รวมทั้งมีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับการเมาส์เป็นปลาหางนกยูง igs ดูดซับโปรตีน / กรัม ลูกปัด แอนติจากหนูเพิ่มขึ้นกับอิมมูโนโกลบูลิน ( IG ) เตรียมเป็นเฉพาะเจาะจงอย่างมากและที่มีอยู่สูง AB โดย .พวกเขา immunoreacted ใน blot ตะวันตกกับ IG หนักและโซ่ไฟจากปลาหางนกยูง เซรั่ม และ อิก ห่วงโซ่หนักจากร่างกายแยกปลาหางนกยูง . เมาส์ใช้ในการต่อต้านปลาหางนกยูง IG ELISA เพื่อเปรียบเทียบประสิทธิภาพของเส้นทางที่แตกต่างกันของปลาหางนกยูงภูมิคุ้มกันต่อเตตราไฮมีนา : ( i ) การ sonicated ทวารหนักด้วยเตตราไฮมีนา ( 40000 เตตราไฮมีนา / ปลาในปริมาณรวม 10 μลิตร ) ผสมกับ domperidon , กรด deoxycholic ฟรี ( วาลีนและกรดอะมิโนลิวซีนไอโซลิวซีน , ฟีนิลอะลานีน , , และทริป ) หรือ ( ii ) การฉีดเข้าช่องท้อง ( IP ) sonicated เตตราไฮมีนาในสมบูรณ์ Freund เป็นผู้ช่วย ( 15 , 000 เตตราไฮมีนา / ปลารวมปริมาณ 20 μลิตร )ปลาควบคุมลบ anally ใส่ท่อช่วยหายใจใส่ท่อช่วยหายใจผสมโดยไม่เตตราไฮมีนา หรือ ดิบ วิธีป้องกัน : การวัดของเตตราไฮมีนา AB พบสูงกว่าระดับของ ABS ใน IP - 5 ปลาหางนกยูงนะ เทียบกับ anally ใส่ท่อช่วยหายใจและปลาควบคุม นอกจากนี้ ประสิทธิภาพของการทดสอบโดยการตรวจสอบต่อไปนี้ ( 1 ) ปลาหางนกยูงตาย จำกัดความท้าทายกับเตตราไฮมีนา ( 900 เตตราไฮมีนา / ปลา ) หรือ ( 2 ) ความเย็น ตามด้วยการแช่ในน้ำที่มี 10 , 000 เตตราไฮมีนา / มิลลิลิตร การตายของปลาในวันที่ 14 หลังฉีดเชื้อด้วยเตตราไฮมีนาจำกัดเกิน 50% ในการควบคุม และใส่ท่อช่วยหายใจ anally ปลา , เมื่อเทียบกับ 31 % ในกลุ่มไอพี - ปลา ภูมิคุ้มกันไม่ ป้องกันเชื้อโรค ความท้าทาย โดยแช่ .โดยชี้ให้เห็นว่า ความสัมพันธ์ระหว่าง ป้องกันการดื้อยาเตตราไฮมีนา AB ปลาจำกัด - ฉีดเตตราไฮมีนา แต่ไม่ใช่การติดเชื้อ นอกจากนี้ความเครียดโดยการแช่เย็น