2. Materials and methods2.1. Chemic

2. Materials and methods

2.1. Chemicals and standards
Anthocyanin standards (cyanidin 3-glucoside chloride and
pelargonidin 3-glucoside chloride) were purchased from Fluka
(Neu-Ulm, Germany). HPLC-grade acetonitrile, acetone, chlorophorm,
hydrochloric acid, and acetic acid were obtained from
Merck (Darmstad, Germany).

2.2. Samples
Strawberry fruits (Fragaria x ananassa Duch., cvs. Elsanta, Maya,
Marmolada and Queen Elisa) grown conventionally (Belovar/
Croatia, latitude 455305400N; longitude 161005300E) and organically
(Horvati/Croatia, latitude 4543017.9700N; longitude 1548041.1500E)
at cultivation sites were hand-harvested at full maturity
(7.25 ± 0.25 Brix and 5.50 ± 0.15 Brix; for conventional and organic,
respectively). All cultivars from both cultivations (conventional
and organic) were grown in a pseudogley soil with pH = 6.40–
6.45. Row planting distance was 0.3 m and space between rows
was 1.2 m. Distance between two growing fields was 500 m. Used
fertilizer for conventional cultivation consisted of N:P:K = 5:20:30
with trace elements and micronutrients applied at 40t/ha of N. Fertilization
for organic cultivation was conducted in accordance with
national regulations where no synthetic herbicides or insecticides
were used. Fruit samples were selected based on uniform size, color
and absence of mechanical damage. After harvesting, approximately
15 kg of each cultivar was packed in wooden boxes and immediately
transported to research facility. Sepals were removed upon
arrival, and fruits were manually washed, dried, then homogenized
in purees with blender (Mixy, Zepter International, Switzerland),
and used for experiments (assessment of anthocyanins content, colorimetric
measurements, and jams preparation).
Low-sugar jams were prepared under vacuum (Vacuum Cooking
Equipment; Pecon, Croatia) with formulation of: 10% fruit dry
matter content in jam, 35% sugar and 0.6% pectin with soluble
solids content (SSC) being 45 Brix. Fruit purees were blended with
sugar (commercial sucrose), placed in a vacuum cooker, then stirred
and boiled. Cooking temperature was T < 80 C and vacuum
pressure was p < 0.8 bar. The mixture was allowed to boil for
t = 20 min after SSC was measured with hand-type refractometer
(LEICA 7531L). Close to the end of cooking, pectin solutions (Grinsted
TM Pectin LA 410, Danisco Ingredients, Denmark) were added
to the cooking mass in the amounts required to reach 45 Brix.
When cooking was finalized, jams were filled into hot glass jars,
immediately capped and pasteurized at T = 80 C for t = 10 min.
Finally, jams were cooled at room temperature and stored until
analysis in dark space at T = 4 C.

2.3. Analysis of anthocyanins

2.3.1. Extraction procedure
Anthocyanins were extracted according to modified method
from literature (Chaovanalikit & Wrolstad, 2004b). Either, strawberry
puree or jam (m = 20 g) were mixed in capped Erlenmeyer
flask with V = 20 cm3 of acetone then sonicated for t = 10 min at
T = 20 C, with frequency of 35 kHz by using ultrasonic device
(Transsonic T460, Elma, Germany). All samples were continuously
protected from interference with light, and then filtered on
Büchner funnel using Watmann No. 1 paper. Filter cake was re-extracted
twice with V = 10 cm3 of acetone/water (70:30 v/v). Filtrates
were combined and mixed with V = 80 cm3 of chloroform,
then centrifuged at 5000 rpm for t = 10 min (Hettich Centrifuge,
Rotofix 32, Germany). The upper aqueous phase was collected
and evaporated in rotavapor R-215 (Büchi, Switzerland) at
T = 40 C. The fraction was made up to V = 25 cm3 with acidified
water (0.01% aqueous HCl, by volume).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. เคมีและมาตรฐานมาตรฐานมีโฟเลทสูง (cyanidin 3 glucoside คลอไรด์ และpelargonidin 3-glucoside คลอไรด์) ซื้อจาก Fluka(Neu Ulm เยอรมนี) HPLC เกรด acetonitrile อะซิโตน chlorophormกรดไฮโดรคลอริก และกรดอะซิติกได้รับมาจากเมอร์ค (Darmstad เยอรมนี)2.2. ตัวอย่างสตรอเบอร์รี่ผลไม้ (Fragaria x ananassa Duch. cvs Elsanta มายาMarmolada และควีน Elisa) โตดี (Belovar /โครเอเชีย ละติจูด 45 5305400N ลองจิจูดที่ 16 1005300E) และ organically(Horvati/โครเอเชีย ละติจูด 45 43017.9700N ลองจิจูด 15 48041.1500E)ที่เพาะปลูก ถูกมือเก็บเกี่ยวที่เต็ม(7.25 ± 0.25 Brix และ 5.50 ± 0.15 Brix อินทรีย์ และทั่วไปตามลำดับ) พันธุ์ทั้งหมดจากทั้งสอง cultivations (ปกติและอินทรีย์) ที่ปลูกในดิน pseudogley กับ pH = 6.40 –6.45 การปลูกห่างจากแถวถูก 0.3 เมตรและระยะห่างระหว่างแถวระยะ 1.2 เมตรระหว่างฟิลด์ 2 เพิ่มขึ้นเป็น 500 เมตรใช้ปุ๋ยสำหรับปลูกพืชทั่วไปประกอบด้วย N:P:K = 5:20:30ติดตามองค์และองค์ประกอบตามโรคใช้ที่ 40t/ฮา ของตอนเหนือในปัจจุบันสำหรับการปลูกพืชอินทรีย์ที่ดำเนินการสอดคล้องกฎระเบียบแห่งชาติไม่มีสารเคมีสังเคราะห์กำจัดวัชพืชหรือยาฆ่าแมลงใช้ ตัวอย่างผลไม้ก็เลือกตามรูปขนาด สีและขาดความเสียหายทางกล หลังจากการเก็บเกี่ยว ประมาณ15 กก.ของ cultivar ละถูกบรรจุ ในกล่องไม้ และทันทีส่งไปวิจัย Sepals ออกตามมาถึง และผลไม้ขึ้นเองล้าง แห้ง แล้ว homogenized เป็นกลุ่มในจากกับ blender (Mixy, Zepter นานาชาติ สวิสเซอร์แลนด์),และใช้สำหรับการทดลอง (ประเมินเนื้อหา anthocyanins เหมือนวัด และเตรียมความพร้อมแยม)มีเตรียมแยมน้ำตาลต่ำภายใต้สุญญากาศ (Vacuum ทำอาหารอุปกรณ์ Pecon โครเอเชีย) มีกำหนด: 10% ผลไม้แห้งเรื่องเนื้อหาในแยม น้ำตาล 35% และเพกทิน 0.6% โดยละลายน้ำของแข็งเนื้อหา (SSC) 45 Brix จากผลไม้ที่ผสมกับน้ำตาลทราย (ซูโครสพาณิชย์), วางในเตาสูญญากาศ กวนแล้วและต้ม อาหารอุณหภูมิเป็น T < 80 C และสุญญากาศความดัน p < 0.8 บาร์ได้ ส่วนผสมได้รับอนุญาตให้ต้มสำหรับt = 20 นาทีหลังจาก SSC ถูกวัด ด้วย refractometer ชนิดมือ(ไล 7531L) ปิดท้ายอาหาร โซลูชั่นเพกทิน (Grinstedเพิ่มเพกทิน TM LA 410 เครื่อง Danisco เดนมาร์ก)การทำอาหารโดยรวมในยอดเงินต้องถึง 45 Brixเมื่อทำอาหารเป็นขั้นสุดท้าย แยมถูกเติมลงในขวดแก้วร้อนทันทีปรบมือ และ pasteurized ที่ T = 80 C สำหรับ t = 10 นาทีสุดท้าย ระบายความร้อนด้วยอุณหภูมิห้อง และเก็บไว้จนแยมวิเคราะห์ในพื้นที่มืดที่ T = 4 c2.3 การวิเคราะห์ของ anthocyanins2.3.1 การสกัดขั้นตอนAnthocyanins ถูกแยกตามวิธีการแก้ไขจากวรรณกรรม (Chaovanalikit & Wrolstad, 2004b) ใด สตรอเบอร์รี่puree หรือแยม (m = 20 g) ถูกผสมใน capped Erlenmeyerหนาวกับ V = 20 cm3 ของอะซีโตนจากนั้น sonicated สำหรับ t = 10 นาทีที่T = 20 C กับความถี่ของ 35 kHz โดยใช้อุปกรณ์อัลตราโซนิก(Transsonic T460, Elma เยอรมนี) ตัวอย่างทั้งหมดได้อย่างต่อเนื่องป้องกันจากแสงรบกวน และกรองแล้วใช้กระดาษ Watmann เลข 1 กรวย Büchner เค้กตัวกรองถูกแยกอีกครั้งสองกับ V = 10 cm3 น้ำอะซิโตน (v 70:30 v) Filtratesรวม และผสมกับ V = 80 cm3 ของคลอโรฟอร์มcentrifuged แล้ว ที่ 5000 rpm สำหรับ t = 10 นาที (เครื่องหมุนเหวี่ยง HettichRotofix 32 เยอรมนี) บนเฟสสเอาท์รวบรวมและหายไปใน rotavapor R-215 (บือ สวิตเซอร์แลนด์) ที่T = 40 เซลเซียส เศษส่วนทำได้ V = 25 cm3 ด้วย acidifiedน้ำ (0.01% HCl อควี โดยเสียง)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 สารเคมีและมาตรฐานมาตรฐาน Anthocyanin (cyanidin คลอไรด์ 3 glucoside และ pelargonidin 3 glucoside คลอไรด์) ที่ซื้อมาจาก Fluka (Neu-Ulm, เยอรมนี) HPLC เกรด acetonitrile, อะซีโตน chlorophorm, กรดไฮโดรคลอริกและกรดอะซิติกที่ได้รับจากเมอร์ค (Darmstad, เยอรมนี). 2.2 ตัวอย่างผลไม้สตรอเบอร์รี่ (Fragaria ananassa Duch x, CVS Elsanta มายา.. Marmolada สมเด็จพระราชินีเอลิซาและ) ปลูกตามอัตภาพ (Belovar / โครเอเชีย, ละติจูด 45 5305400N;? ลองจิจูด 16 1005300E) และอินทรีย์(Horvati / โครเอเชีย, ละติจูด 45 43017.9700N ? ลองจิจูด 15 48041.1500E) ที่เว็บไซต์การเพาะปลูกถูกมือเก็บเกี่ยวที่ครบกําหนดเต็มรูปแบบ(7.25 ± 0.25 และ 5.50 Brix ± 0.15 Brix;? สำหรับธรรมดาและอินทรีย์ตามลำดับ) พันธุ์ที่เพาะปลูกทั้งหมดจากทั้งสอง (ธรรมดาและอินทรีย์) ได้รับการปลูกในดินที่มีค่า pH pseudogley = 6.40- 6.45 ระยะปลูกเป็นแถว 0.3 เมตรและพื้นที่ระหว่างแถวเป็น1.2 เมตร ระยะห่างระหว่างสองช่องที่เพิ่มขึ้นเป็น 500 เมตร ที่ใช้ปุ๋ยสำหรับการเพาะปลูกแบบดั้งเดิมประกอบด้วย N: P: K = 05:20:30 กับธาตุและแร่ธาตุอาหารที่นำมาใช้ 40t / ไร่ของการปฏิสนธิเอ็นสำหรับการเพาะปลูกเกษตรอินทรีย์ได้ดำเนินการให้เป็นไปตามข้อกำหนดภายในประเทศที่ไม่มีสารเคมีกำจัดวัชพืชยาฆ่าแมลงสังเคราะห์หรือถูกนำมาใช้. ตัวอย่างผลไม้ได้รับการคัดเลือกขึ้นอยู่กับขนาดเครื่องแบบสีและไม่มีความเสียหายทางกล หลังการเก็บเกี่ยวประมาณ15 กิโลกรัมพันธุ์แต่ละคนถูกบรรจุในกล่องไม้และทันทีที่เคลื่อนย้ายไปยังสถานที่วิจัย กลีบเลี้ยงที่ถูกถอดออกเมื่อเดินทางมาถึงและผลไม้ถูกล้างด้วยตนเองแห้งปั่นแล้วในpurees กับเครื่องปั่น (Mixy, Zepter นานาชาติวิตเซอร์แลนด์) และใช้สำหรับการทดลอง (การประเมินเนื้อหา anthocyanins, สีวัดและติดขัดเตรียม.) ต่ำน้ำตาล ติดขัดได้จัดทำขึ้นภายใต้สุญญากาศ (Vacuum ทำอาหารอุปกรณ์; Pecon, โครเอเชีย) มีกำหนด 10% ผลไม้แห้งเนื้อหาเรื่องแยมน้ำตาล35% และเพคติน 0.6% ที่ละลายน้ำที่มีปริมาณของแข็ง(SSC) เป็น 45 บริกซ์? purees ผลไม้ได้รับการผสมกับน้ำตาลทราย(ซูโครสในเชิงพาณิชย์) ที่วางไว้ในเตาสูญญากาศแล้วขยับต้ม อุณหภูมิการทำอาหารเป็น T <80 องศาเซลเซียสและสูญญากาศความดันเป็นp <0.8 บาร์ ส่วนผสมที่ได้รับอนุญาตให้ต้มt = 20 นาทีหลังจากที่เอสเอสวัดด้วยเครื่องวัดมือชนิด(LEICA 7531L) ใกล้ถึงจุดสิ้นสุดของการปรุงอาหาร, การแก้ปัญหาเพคติน (Grinsted TM เพคติน LA 410, ส่วนผสม Danisco, เดนมาร์ก) มีการเพิ่มมวลการปรุงอาหารในปริมาณที่จำเป็นในการเข้าถึง45? Brix. เมื่อปรุงอาหารสรุปแยมเต็มไปลงในขวดแก้วร้อนต่อยอดได้ทันทีและพาสเจอร์ไรส์ที่ T = 80 องศาเซลเซียสสำหรับ t = 10 นาที. สุดท้ายติดขัดได้รับการระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องและเก็บไว้จนการวิเคราะห์ในพื้นที่มืดที่ T = 4 องศาเซลเซียส. 2.3 การวิเคราะห์ anthocyanins 2.3.1 ขั้นตอนการสกัดAnthocyanins สกัดตามวิธีการปรับเปลี่ยนจากวรรณกรรม(Chaovanalikit และ Wrolstad, 2004b) ทั้งสตรอเบอร์รี่น้ำซุปข้นหรือแยม (m = 20 กรัม) ผสมในการต่อยอด Erlenmeyer ขวดกับ V = 20 cm3 ของอะซิโตน sonicated แล้วสำหรับ t = 10 นาทีที่T = 20 องศาเซลเซียสด้วยความถี่ 35 เฮิร์ทซ์โดยใช้อุปกรณ์อัลตราโซนิก(Transsonic T460 ทิคเกอร์, เยอรมนี) ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการอย่างต่อเนื่องได้รับการคุ้มครองจากการแทรกแซงด้วยแสงและกรองแล้วในช่องทางBüchnerใช้Watmann ฉบับที่ 1 กระดาษ เค้กกรองเป็นอีกครั้งที่แยกเป็นสองเท่าด้วย V = 10 cm3 ของอะซิโตน / น้ำ (70:30 v / v) filtrates มารวมกันและผสมกับ V = 80 cm3 ของคลอโรฟอร์มปั่นแล้วที่5000 รอบต่อนาทีสำหรับ t = 10 นาที (Hettich เครื่องปั่นเหวี่ยงRotofix 32, เยอรมนี) ในช่วงน้ำบนถูกเก็บรวบรวมและระเหยใน Rotavapor R-215 (Büchiวิตเซอร์แลนด์) ที่ T = 40 องศาเซลเซียส ส่วนที่ถูกสร้างขึ้นเพื่อ V = 25 cm3 กับกรดน้ำ(0.01% น้ำ HCl โดยปริมาตร)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ

2.1 . เคมีและแอนโธไซยานินมาตรฐาน
( คลอไรด์ 3-glucoside ไซยานิดินและ
pelargonidin 3-glucoside คลอไรด์ ) ซื้อจาก fluka
( Neu Ulm , เยอรมัน ) HPLC เกรดไนอะซีโทน chlorophorm
, กรดเกลือ , กรดน้ำส้มได้จาก
เมอร์ค ( darmstad , เยอรมนี ) .

. . ตัวอย่างผลไม้สตรอเบอรี่ ( fragaria
x ananassa ช์ , CVS elsanta ,มายา ,
marmolada และราชินี ELISA ) ที่ปลูกตามอัตภาพ ( belovar /
โครเอเชีย ละติจูด ลองจิจูด 45  5305400n ; 16  1005300e ) และอินทรีย์
( horvati / โครเอเชีย ละติจูด ลองจิจูด 45  43017.9700n ; 15  48041.1500e )
ที่เว็บไซต์การเพาะปลูกถูกมือเก็บเกี่ยวเต็มวัย
( 7.25 ± 0.25  Brix และ 5.50 ± 0.15  บริกซ์ เพราะปกติและอินทรีย์
ตามลำดับ )พันธุ์ทั้งหมดจากทั้งเพาะ ( ปกติ
และอินทรีย์ ) ปลูกในดินที่มีค่า pH = 6.40 pseudogley –
6.45 . การปลูกแบบแถวระยะทาง 0.3 เมตร และพื้นที่ระหว่างแถว
เป็น 1.2 เมตร ระยะห่างระหว่างสองสาขา คือ เติบโตประมาณ 500 เมตร ใช้ปุ๋ย เพาะปกติ
) N : P : K = 5:20:30
กับธาตุและสารอาหารรอง ( 40T / ฮาปุ๋ย
.สำหรับการเพาะปลูกอินทรีย์ได้ดำเนินการตามกฎระเบียบของประเทศที่ไม่มีสารสังเคราะห์

หรือยาฆ่าแมลงมาใช้ ตัวอย่างผลไม้ถูกเลือกขึ้นอยู่กับขนาดเดียวสี
และไม่มีความเสียหายทางกล หลังจากเก็บเกี่ยว ประมาณ 15 กิโลกรัม ของแต่ละพันธุ์
ถูกบรรจุอยู่ในกล่องไม้ และทันที
ส่งไปวิจัยสิ่งอำนวยความสะดวก กลีบเลี้ยงออกเมื่อ
มาถึงผลไม้ด้วยตนเองล้าง อบแห้ง แล้วบดด้วยเครื่องปั่น
ใน purees ( mixy zepter , นานาชาติ , สวิตเซอร์แลนด์ ) ,
และใช้ในการทดลอง ( การประเมินของแอนโทไซยานินปริมาณ 7.4
การวัด และแยมเตรียม ) .
แยมน้ำตาลต่ำถูกเตรียมภายใต้สุญญากาศ ( vacuum ทำอาหาร
อุปกรณ์ pecon , โครเอเชีย ) ด้วยสูตร : 10 ผลไม้แห้ง
เรื่องเนื้อหาในแยม , น้ำตาล , 35 , 06 % เพคตินกับของแข็งละลาย
( SSC ) เป็น 45  Brix purees ผลไม้ผสมกับน้ำตาลทราย ( ซูโครส
พาณิชย์ ) อยู่ในสูญญากาศหม้อแล้วกวน
แล้วต้ม อุณหภูมิการทำอาหาร t < 80  C และความดันสุญญากาศ
คือ P < 0.8 บาร์ ส่วนผสมจะถูกอนุญาตให้เดือดสำหรับ
t = 20 นาทีหลังจาก SSC วัดด้วยประเภทมือ
รีแฟรกโตมิเตอร์ ( Leica 7531l ) ใกล้ถึงจุดสิ้นสุดของการปรุงอาหารเพคติน ( pectin grinsted
TM โซลูชั่น danisco LA 410 , ส่วนผสม , เดนมาร์ก ) เพิ่ม
ทําอาหารมวลในปริมาณที่ต้องการถึง 45  บริกซ์ .
เมื่อปรุงอาหารเสร็จสมบูรณ์ ติดอยู่ที่เติมลงในขวดแก้วร้อน
ทันทีปกคลุมและพาสเจอร์ไรซ์ที่อุณหภูมิ T = 80  C t = 10 นาที
ในที่สุด แยมเป็นเย็นที่อุณหภูมิห้องและเก็บไว้จนกว่า
การวิเคราะห์ในพื้นที่มืด ที่ T = 4  C .

2.3