2.7. Detection of cellulose level a

2.7. Detection of cellulose level and features
Celluloses sample was dissolved in 67% H2SO4 (v/v) for 1 h at
25 C, and the hexoses were detected by the anthrone/H2SO4
method as cellulose level.
Degree of polymerization (DP) of cellulose was described by
Zhang et al. (2013) using the viscosity method subjective to the
equation: DP0.905 = 0.75 [g] (Puri, 1984; Kumar and Kothari,
1999). All experiments were performed at 25 ± 0.5 C using an
Ubbelohde viscosity meter and cupriethylenediamine hydroxide
(Cuen) as the solvent. The intrinsic viscosity was calculated by
interpolation using the USP table (USP, 2002) that lists the
predetermined values of the product of intrinsic viscosity and
concentration, ([g] C), for cellulose samples exhibiting relative
viscosity (gre) values between 1.1 and 9.9. grel was calculated using
the relationship: grel = t/t0, where t and t0 are the efflux times for
the cellulose solution and Cuen (blank) solvent, respectively. Each
sample was measured in triplicate.
Crystallinity index (CrI) of lignocellulose was detected by X-ray
diffraction (XRD) method using Rigaku-D/MAX instrument (Uitima
III, Japan) as described by Zhang et al. (2013) with minor modification.
The mixed-well powders of dry bagasse were laid on the glass
sample holder (35  50  5 mm) and were analyzed under plateau
conditions. Ni-filtered Cu Ka radiation (k = 0.154056 nm) generated
at voltage of 40 kV and current of 18 mA, and scanned at
speed of 0.0197/s from 10 to 45. The crystallinity index (CrI)
was estimated using the intensity of the 200 peak (I200, h = 22.5)
and the intensity at the minimum between the 200 and 110 peaks
(Iam, h = 18.5) as the follow: CrI = 100  (I200Iam)/I200. I200
represents both crystalline and amorphous materials while Iam
represents amorphous material. The standard error of the CrI
method was detected at ±0.05–0.15 using five representative
samples in triplicate.
2.8. Observation of biomass residue surface
Bagasse samples were pretreated with 1% NaOH or 1% H2SO4,
and hydrolyzed with the mixed-cellulases. The remaining residues
were washed with distilled water until pH 7.0. The surface morphology
of the sample was sputter-coated with gold and observed
by scanning electron microscope (SEM JSM-6390/LV, Hitachi,
Tokyo, Japan) as described by Xu et al. (2012).
2.9. Analysis of biomass enzymatic digestibility
Chemical pretreatment methods were described by Huang et al.
(2012) with minor modifications. H2SO4 pretreatment: the bagasse
sample was washed 5 times with 10 mL distilled water, and added
with 6 mL H2SO4 at three concentrations (0.25%, 1%, 4%, v/v),
respectively. The sample tube was sealed and heated at 121 C
for 20 min in autoclave (15 psi) after mixing well, and then shaken
at 150 rpm for 2 h at 50 C. After centrifugation at 3000g for 5 min,
the pellet was washed three times with 10 mL distilled water and
stored for enzyme hydrolysis. NaOH pretreatment: The bagasse
sample was washed 5 times with 10 mL distilled water, and added
with 6 mL NaOH at three concentrations (0.5%, 1%, 4%, w/v). The
sample tube was shaken at 150 rpm for 2 h at 50 C. After centrifugation
at 3000g for 5 min, the pellet was washed three times with
10 mL distilled water and stored for enzyme hydrolysis. All experiments
were conducted in biological triplicates.
The bagasse samples from above pretreatments were washed 5
times with 6 mL distilled water, and once with 10 mL mixedcellulases
reaction buffer (0.2 M acetic acid-sodium acetate, pH
4.8). The washed residues were added with 0.16% (w/v) mixedcellulases
(containing b-glucanase P2.98  104 U, cellulase
P298 U, and xylanase P4.8  104 U from Imperial Jade

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7 การตรวจหาระดับเซลลูโลสและคุณลักษณะ
Celluloses อย่างถูกละลายใน 67% กำมะถัน (v/v) สำหรับ h 1 ที่
25 C และ hexoses ตรวจพบ โดย anthrone/กำมะถัน
วิธีเป็นระดับเซลลูโลส
ระดับ polymerization (DP) ของเซลลูโลสถูกอธิบายโดย
เตียว et al. (2013) โดยใช้วิธีความหนืดตามอัตวิสัยไป
สมการ: DP0.905 = 0.75 [g] (ภูริ 1984 Kumar และโพธิวรคุณ,
1999) ดำเนินการทดลองทั้งหมดที่ 25 ± 0.5 C ใช้เป็น
Ubbelohde ความหนืดวัดและ cupriethylenediamine hydroxide
(Cuen) เป็นตัวทำละลาย ความหนืด intrinsic ถูกคำนวณโดย
ใช้ตาราง USP (USP, 2002) ที่สอดแทรกการ
กำหนดการค่าของผลคูณของความหนืด intrinsic และ
เข้มข้น, ([g] C), ตัวอย่างเซลลูโลสอย่างมีระดับสัมพันธ์
ค่าความหนืด (gre) ระหว่าง 1.1 และ 9.9 grel ถูกคำนวณโดยใช้
ความสัมพันธ์: grel = t/t0, t และ t0 เวลา efflux
โซลูชันเซลลูโลสและ Cuen (ว่าง) ตัวทำละลาย ตามลำดับ แต่ละ
อย่างถูกวัดใน triplicate
(สถาบันวิจัยจุฬา) ดัชนี Crystallinity ของ lignocellulose พบรังสี X
วิธีการเลี้ยวเบน (XRD) โดยใช้เครื่องมือ Rigaku-D/สูง สุด (Uitima
III ญี่ปุ่น) ตามที่อธิบายไว้โดย Zhang et al. (2013) มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
ผงดีผสมของชานอ้อยแห้งถูกวางไว้บนแก้ว
ยึดตัวอย่าง (35 50 มม. 5) และได้วิเคราะห์ภายใต้ที่ราบสูง
เงื่อนไข กรอง Ni Cu Ka รังสี (k = 0.154056 nm) สร้าง
ที่แรงดันไฟฟ้า 40 kV และปัจจุบัน 18 mA และสแกนที่
ความเร็วของ 0.0197 /s 10 ถึง 45 ดัชนี crystallinity (สถาบันวิจัยจุฬา)
ถูกประเมินโดยใช้ความเข้มของจุดสูงสุดที่ 200 (I200, h = 22.5)
และความเข้มน้อยระหว่าง 200 และ 110 แห่ง
(Iam, h = 18.5) ดังนี้: สถาบันวิจัยจุฬา = 100 (I200 Iam) / I200 I200
แทนวัสดุผลึก และไปขณะ Iam
แทนวัสดุไป ข้อผิดพลาดมาตรฐานของสถาบันวิจัยจุฬา
วิธีตรวจพบที่± 0.05-0.15 ใช้แทน 5
ตัวอย่างใน triplicate
2.8 สังเกตของชีวมวลสารตกค้างผิว
ตัวอย่างชานอ้อยถูก pretreated 1% NaOH หรือ 1% กำมะถัน,
และ hydrolyzed ด้วยการผสม-cellulases ตกเหลือ
ถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่นจนถึง pH 7.0 สัณฐานวิทยาผิว
ของตัวอย่างถูก sputter เคลือบ ด้วยทอง และสังเกต
โดยการสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (SEM JSM-6390/LV ฮิตาชิ,
โตเกียว ญี่ปุ่น) ตามที่อธิบายไว้โดย Xu et al. (2012) .
2.9 วิเคราะห์ digestibility เอนไซม์ในระบบชีวมวล
pretreatment วิธีเคมีได้อธิบายไว้ โดยหวง et al.
(2012) มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย Pretreatment กำมะถัน: ชานอ้อย
ตัวอย่างล้าง 5 ครั้งน้ำ 10 mL กลั่น และเพิ่ม
กับ mL 6 กำมะถันที่ความเข้มข้น 3 (0.25%, 1%, 4%, v/v),
ตามลำดับ หลอดตัวอย่างถูกปิดผนึก และความร้อนที่ 121 C
สำหรับ 20 นาทีในด้วย (15 psi) หลังจากการผสมกัน และเขย่าแล้ว
ที่ 150 rpm สำหรับ h 2 ที่ค. 50 หลังจาก centrifugation ที่ 3000g สำหรับ 5 นาที,
เม็ดถูกล้างสามครั้งน้ำ 10 mL กลั่น และ
เก็บสำหรับไฮโตรไลซ์เอนไซม์ NaOH pretreatment: ชานอ้อย
ตัวอย่างล้าง 5 ครั้งน้ำ 10 mL กลั่น และเพิ่ม
กับ 6 mL NaOH ที่ความเข้มข้น 3 (0.5%, 1%, 4%, w/v) ใน
หลอดอย่างถูกเขย่าที่ 150 rpm สำหรับ h 2 ที่ค. 50 หลังจาก centrifugation
ที่ 3000g สำหรับ 5 นาที เม็ดถูกล้างสามครั้งด้วย
10 mL กลั่นน้ำ และเก็บไว้สำหรับไฮโตรไลซ์เอนไซม์ ทดลองทั้งหมด
ได้ดำเนินการในทางชีวภาพ triplicates.
ตัวอย่างชานอ้อยก pretreatments ถูกล้าง 5
เวลา 6 มลกลั่นน้ำ และครั้งเดียวกับ 10 mL mixedcellulases
บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา (0.2 M โซเดียมกรดอะซิติก acetate, pH
4.8) ตกหินเพิ่มกับ mixedcellulases 0.16% (w/v)
(ประกอบด้วย 104 b คัด P2.98 U, cellulase
P298 U และไซลาเนส P4.8 104 U จากหยกอิมพีเรียล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 การตรวจหาระดับเซลลูโลสและมี
ตัวอย่าง Celluloses ถูกละลายใน 67% H2SO4 (v / v) เวลา 1 ชั่วโมงที่
25 องศาเซลเซียสและ hexoses ถูกตรวจพบโดย anthrone / H2SO4
วิธีการเป็นเซลลูโลสระดับ
ปริญญาตรีของพอลิเมอ (DP) ของเซลลูโลส ถูกอธิบายโดย
Zhang et al, (2013) โดยใช้วิธีการที่มีความหนืดอัตนัย
สม: DP0.905 = 0.75 [g] (Puri 1984; มาร์และ Kothari,
1999) การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการใน 25 ± 0.5 องศาเซลเซียสโดยใช้
Ubbelohde เมตรความหนืดและ cupriethylenediamine ไฮดรอกไซ
(Cuen) เป็นตัวทำละลาย ความหนืดที่แท้จริงที่คำนวณได้จาก
การแก้ไขโดยใช้ตาราง USP (USP, 2002) ที่แสดง
ค่าที่กำหนดไว้ของสินค้าที่มีความหนืดที่แท้จริงและ
ความเข้มข้น ([g] C) สำหรับตัวอย่างเซลลูโลสแสดงความ
หนืด (GRE) ค่าระหว่าง 1.1 และ 9.9 Grel ที่คำนวณโดยใช้
ความสัมพันธ์: Grel = t / t0 ที่เสื้อและ t0 เป็นเวลาไหลสำหรับ
การแก้ปัญหาเซลลูโลสและ Cuen (ว่าง) ตัวทำละลายตามลำดับ แต่ละ
ตัวอย่างถูกวัดในเพิ่มขึ้นสามเท่า
ดัชนีผลึก (CRI) ของลิกโนเซลลูโลสที่ถูกตรวจพบโดยรังสีเอ็กซ์
เลี้ยวเบน (XRD) วิธีการใช้ Rigaku:-D / ตราสาร MAX (Uitima
III, ญี่ปุ่น) ตามที่อธิบายไว้โดย Zhang et al, (2013) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
ผงผสมกันดีของชานอ้อยแห้งถูกวางบนกระจก
ใส่สารตัวอย่าง (35? 50? 5 มม) และถูกนำมาวิเคราะห์ภายใต้ที่ราบสูง
เงื่อนไข Ni-กรองรังสีลูกบาศ์กกา (K = 0.154056 นาโนเมตร) สร้างขึ้น
ที่แรงดันไฟฟ้าของ 40 กิโลโวลต์และกระแส 18 mA และสแกนที่
ความเร็วของ 0.0197? / วินาทีจาก 10? ถึง 45 ?. ดัชนีผลึก (CRI)
เป็นที่คาดกันโดยใช้ความเข้มของจุดสูงสุด 200 (I200, H = 22.5?)
และความรุนแรงที่น้อยที่สุดระหว่าง 200 และ 110 ยอด
(เอี่ยม, H = 18.5?) ดังนี้: CRI = 100 ? (I200? เอี่ยม) / I200 I200
เป็นทั้งผลึกและวัสดุอสัณฐานในขณะที่เอี่ยม
เป็นวัสดุอสัณฐาน ข้อผิดพลาดมาตรฐานของ CRI
วิธีการได้รับการตรวจพบใน± 0.05-0.15 ใช้ห้าตัวแทน
กลุ่มตัวอย่างในเพิ่มขึ้นสามเท่า
2.8 การสังเกตของพื้นผิวที่เหลือชีวมวล
ตัวอย่างกากอ้อยถูกปรับสภาพกับ 1% NaOH หรือ 1% H2SO4,
และไฮโดรไลซ์ที่มีเซลลูผสม ที่เหลือตกค้าง
ถูกล้างด้วยน้ำกลั่นจน pH 7.0 ลักษณะพื้นผิว
ของตัวอย่างที่ถูกพ่นเคลือบด้วยทองและสังเกต
จากกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด (SEM JSM-6390 / LV, ฮิตาชิ,
โตเกียว, ญี่ปุ่น) ตามที่อธิบาย Xu และคณะ (2012)
2.9 การวิเคราะห์เอนไซม์ย่อยชีวมวล
วิธีการปรับสภาพทางเคมีที่ถูกอธิบายโดย Huang et al,
(2012) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย H2SO4 ปรับสภาพ: ชานอ้อย
ตัวอย่างถูกล้างครั้งที่ 5 กับ 10 มิลลิลิตรน้ำกลั่นและเพิ่ม
6 มิลลิลิตร H2SO4 ที่สามความเข้มข้น (0.25%, 1%, 4% v / v)
ตามลําดับ หลอดตัวอย่างถูกปิดผนึกและให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส
เป็นเวลา 20 นาทีในการนึ่ง (15 psi) หลังจากผสมกันแล้วเขย่า
ที่ 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่ 50 องศาเซลเซียส หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 3000g เป็นเวลา 5 นาที,
เม็ดถูกล้างสามครั้งกับ 10 มิลลิลิตรน้ำกลั่นและ
เก็บไว้สำหรับการย่อยสลายของเอนไซม์ ปรับสภาพ NaOH: ชานอ้อย
ตัวอย่างถูกล้างครั้งที่ 5 กับ 10 มิลลิลิตรน้ำกลั่นและเพิ่ม
6 มิลลิลิตร NaOH ที่สามความเข้มข้น (0.5%, 1%, 4% w / v)
หลอดตัวอย่างถูกเขย่าที่ 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่ 50 องศาเซลเซียส หลังจากการหมุนเหวี่ยง
ที่ 3000g เป็นเวลา 5 นาที, เม็ดถูกล้างสามครั้งกับ
10 มิลลิลิตรน้ำกลั่นและเก็บไว้สำหรับการย่อยสลายของเอนไซม์ การทดสอบทั้งหมด
ถูกดำเนินการใน triplicates ชีวภาพ
ตัวอย่างกากอ้อยจากข้างบนการเตรียมถูกล้าง 5
ครั้งมี 6 มิลลิลิตรน้ำกลั่นและครั้งเดียวกับ 10 ml mixedcellulases
บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา (0.2 M กรดอะซิติกโซเดียมอะซิเตท, pH
4.8) ล้างสารพิษตกค้างถูกเพิ่มกับ 0.16% (w / v) mixedcellulases
(ที่มี b-glucanase P2.98 104 U, เซลลูเลส
P298 U และไซลาเนส P4.8 104 U จากอิมพีเรียลหยก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . การตรวจหาระดับสารตัวอย่างและคุณสมบัติ
celluloses ละลายในกรดซัลฟิวริก 67 เปอร์เซ็นต์ ( v / v )
1 H ที่ 25  C และ hexoses ถูกตรวจพบโดยแอนโทรน / กรดซัลฟิวริก
แบบระดับเซลลูโลส .
degree of polymerization ( DP ) ของเซลลูโลสถูกอธิบายโดย
Zhang et al . ( 2013 ) ใช้ความหนืดวิธีอัตนัย
สมการ : dp0.905 = 0.75 [ g ] ( Puri , 1984 ; คูมาร์ และ kothari
, 1999 )ทั้งหมดทดลอง 25 ± 0.5  C ใช้
ubbelohde ความหนืดเมตรและ cupriethylenediamine โซดาไฟ
( cuen ) เป็นตัวทำละลาย ความหนืดภายในถูกคำนวณโดยการใช้ยา
โต๊ะ ( USP , 2002 ) ที่แสดงคุณค่าของผลิตภัณฑ์ไว้

( และความหนืดภายในของ [ G ] C ) สำหรับตัวอย่างจากญาติ
เซลลูโลสความหนืด ( GRE ) ค่าระหว่าง 1.1 และ 9.9 . grel ถูกคำนวณโดยใช้ความสัมพันธ์ grel =
: t / t0 ที่ t และมีการผลักดันครั้ง t0
เซลลูโลสและโซลูชั่น cuen ( ว่าง ) ตัวทำละลาย ตามลำดับ แต่ละตัวอย่างถูกวัด

ทั้งสามใบ ดัชนีความเป็นผลึก ( CRI ) ของลิกโนเซลลูโลสถูกตรวจพบโดยการเลี้ยวเบนรังสีเอกซ์
( XRD ) โดยใช้ rigaku-d / แม็กซ์เครื่องดนตรี ( uitima
III ,ญี่ปุ่น ) ตามที่อธิบายไว้โดย Zhang et al . ( 4 ) มีการปรับปรุงเล็กน้อย ผสมผง
แห้ง ชานอ้อย วางแก้ว
ตัวอย่างผู้ถือ ( 35  50  5 มม. ) และวิเคราะห์ข้อมูลภายใต้เงื่อนไขอัน

ผมกรองรังสีจุฬาค่ะ ( k = 0.154056 nm ) สร้างขึ้น
ที่แรงดัน 40 กิโลโวลต์และกระแสของมา 18 และสแกนที่ความเร็วของ 0.0197 
/ s จาก 10  45  . ดัชนีความเป็นผลึก ( CRI )
ถูกประเมินโดยใช้ความเข้มของ 200 สูงสุด ( i200 , H = 22.5  )
และความเข้มต่ำสุดระหว่าง 200 และ 110 ยอด
( เอี่ยม , H = 18.5  ) ในฐานะที่ติดตาม : CRI = 100  ( i200  เอี่ยม ) / i200 . i200
เป็นตัวแทนทั้งผลึกและสัณฐานวัสดุในขณะที่เอี่ยม
หมายถึงสัณฐานวัสดุ ความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของวิธีการตรวจที่± CRI
+
5 – 0.15 โดยใช้ตัวแทนตัวอย่างทั้งสามใบ
2.8 . สังเกตจาก ชีวมวล กากชานอ้อยที่ผ่านพื้นผิว
จำนวนด้วย NaOH 1 % หรือ 1 % กรดซัลฟิวริก
, และย่อยด้วยเซลลูเลสผสม ที่เหลือตกค้างและล้างด้วยน้ำกลั่น
จนกว่าพีเอช 7.0 . ลักษณะพื้นผิวของตัวอย่างละล่ำละลัก
เคลือบด้วยทองและสังเกต
ด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( SEM jsm-6390 / LV , ฮิตาชิ ,
โตเกียวญี่ปุ่น ) ตามที่อธิบายไว้โดย Xu et al . ( 2012 ) .
2.9 . การวิเคราะห์ปริมาณเอนไซม์ในการย่อยทางเคมีโดยวิธี
อธิบายโดย Huang et al .
( 2012 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย กรดซัลฟิวริกโดย : ชานอ้อย
ตัวอย่างซัก 5 ครั้งกับ 10 มล. น้ำกลั่นและเพิ่ม
6 ml กรดซัลฟิวริก 3 ( 0.25 % ความเข้มข้น 1 % , 4 % v / v )
)หลอดตัวอย่างถูกปิดและให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส นาน 20 นาที 
ในหม้อนึ่งความดัน 15 psi ) หลังจากผสมดีและจากนั้นเขย่า
ที่ความเร็ว 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 ชั่วโมง 50  C หลังการปั่นเหวี่ยงที่ 3000g นาน 5 นาที
เม็ดซักสามครั้งกับ 10 มล. น้ำกลั่นและ
เก็บไว้สำหรับเอนไซม์ การย่อยสลาย . การใช้ : ชานอ้อย
ตัวอย่างซัก 5 ครั้งกับ 10 มล. น้ำกลั่นและเพิ่ม
กับ 6 ml NaOH ที่ความเข้มข้น 3 ( 0.5% , 1% , 4 % W / V )
ตัวอย่างหลอดมันเขย่าที่ความเร็ว 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 ชั่วโมง 50  C หลังการปั่นเหวี่ยงที่ 3000g
5 นาที เม็ดล้างสามครั้งกับ
10 มล. น้ำกลั่นและเก็บไว้สำหรับการย่อยด้วยเอนไซม์ . ทั้งหมดจำนวน 3 ซ้ำการทดลอง

กากชีวภาพ ตัวอย่างจากข้างต้นได้ซัก 5
การเตครั้งที่ 6 มล. น้ำกลั่น และเมื่อมี 10 ml mixedcellulases
ปฏิกิริยาบัฟเฟอร์ ( 0.2 เมตร กรดโซเดียมอะซิเตต , pH
4.8 ) ล้างสารตกค้าง เพิ่มกับ 0.16 % ( w / v ) mixedcellulases
( ที่มีเอนไซม์เบต้า - กลูคาเนส p2.98  104 U
U p298 เซลลูเลส และเอนไซม์ p4.8  104 U จากหยกอิมพีเรียล