After shelling and removing the pul

After shelling and removing the pulp from longan fruits, the longan seeds are obtained, and then longan seeds are smashed, and the smashed longan seeds are immersed in a 20% to 95% ethanol solution at a temperature of 30° C. to 90° C., and the temperature is maintained at 30° C. to 90° C. for 1 to 3 hrs. The solution obtained through extraction is filtered, concentrated, and then subjected to low-temperature and low-pressure lyophilized, to obtain a rude extract (DL).

The rude extract is subjected to a high performance liquid chromatography assay as described in Table 1, and the result is shown in FIG. 3.

TABLE 1
Apparatus Agilent 1100
Chromatography Atlantis ®T35 μm 4.6 × 10 mm, Waters
column
Precolumn Cosmosil 5C18-AR-II 4.6 × 10 mm, Nacalai Tesque
Column temperature 25° C.
Flow rate 1.0 mL/min
Detection wave UV 270 nm
length
Injection volumn 10 μL
Time (min) 0 5 15 30 45 60 75 85
0.1% H3PO4 (%) 98 97 97 87 86 81 79 0
acetonitrile (%) 2 3 3 13 14 19 21 100

The rude extract (DL) is further extracted with ethyl acetate to obtain an ethyl acetate fraction (DL-P01) and a water fraction. The water fraction is further extracted with n-butanol to obtain an n-butanol sub-fraction (DL-P02) and a water sub-fraction (DL-P03). After extracting 24.13 g of the rude extract, DL-P01: 1.44 g (5.97%); DL-P02: 2.57 g (10.65%); DL-P03: 19.11 g (79.20%) are obtained.

The ethyl acetate fraction (DL-P01) is further subjected to the flash chromatography. About 1.1 g of DL-P01 is dissolved in ethyl acetate and methanol with the assistance of an ultrasonic cleaner, and then silica gel is added. After condensing to dry, the sample is placed into a empty sample tube. On the other hand, the normal phase column, 40 g silica gel, for the flash chromatography is equipped to the apparatus. The column is saturated with the solvent and the sample is loaded. The program is listed below: the flow rate is 18 mL/min; the mobile phase uses Solution A of ethyl acetate and Solution B of methanol; the gradient elution program is 100% Solution A and 0% Solution B at about 0 minute to about 30 minutes; 80% Solution A and 20% Solution B at about 31 minutes to about 45 minutes; 50% Solution A and 50% Solution B at about 46 minutes to about 65 minutes; 0% Solution A and 100% Solution B at about 66 minutes to about 85 minutes and at about 86 minutes to about 100 minutes.

The results are shown in FIG. 2, and DL-P01-SI01: 765.3 mg; DL-P01-SI02: 100.4 mg; DL-P01-SI03: 37.0 mg; DL-P01-SI04: 21.7 mg; DL-P01-SI05: 140.1 mg; DL-P01-SI06: 57.3 mg; DL-P01-SI07: 28.4 mg; DL-P01-SI08: 17.0 mg; DL-P01-SI09: 6.4 mg; DL-P01-SI10: 7.7 mg are obtained. DL-P01-SI01 is the main product (69.86%) which is collected by flash column chromatography with the gradient elution program of 100% Solution A and 0% Solution B at about 0 minute to about 30 minutes.

About 0.6 mL of methanol is added in 6 mg of the above mentioned DL-P01-SI01 and further subjected to vibration, dissolve, and filtration, and then subjected to a Gas Chromatography-Mass Spectrophotometry (GC-MS) assay. The gas chromatography is conducted with Trace GC Ultra, thermo; and the mass spectrophotometry is conducted with ITQ 900, thermo; the column is Varian® VF-5 ms 30 m×0.25 mm (I.D. 0.25 μm). The temperature program is 150° C. for 5 min; heating to 190° C. at a rate of 5° C./min for 20 min. As shown in FIG. 1, the spectrogram obtained comprises peaks at retention time of about 5.56 min, about 10.36 min, 14.90 min, about 27.52 min, about 28.16 min, about 35.51 min, about 35.93 min, and about 37.56 min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจากเก็บเปลือกหอย และเอาเนื้อเยื่อจากผลไม้ลำไย ลำไยเมล็ดพืชจะได้ รับ แล้ว เมล็ดลำไยมีซึ่งได้ถูก ทุบ เมล็ดลำไยซึ่งได้ถูกทุบถูกแช่อยู่ในโซลูชั่นเอทานอล 20% ถึง 95% ที่อุณหภูมิ 30° ถึง 90° C. C. และอุณหภูมิไว้ที่ 30° C. ถึง 90° C. สำหรับ 1-3 ชั่วโมง โซลูชั่นได้ผ่านการสกัดกรอง เข้มข้น และจากนั้น ภายใต้อุณหภูมิต่ำ และ low-pressure lyophilized รับสารสกัดหยาบ (DL)สารสกัดหยาบจะอยู่ภายใต้การทดสอบการ chromatography เหลวประสิทธิภาพสูงตามที่อธิบายไว้ในตารางที่ 1 และแสดงผลใน FIG. 3ตารางที่ 1เครื่อง Agilent 1100น้ำ chromatography ®แอตแลนติ T35 4.6 × 10 มม. μmคอลัมน์Tesque Cosmosil precolumn 5C 18-AR-II 4.6 × 10 มม. Nacalaiคอลัมน์อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสกระแสอัตรา 1.0 mL/minตรวจหาคลื่น UV 270 nmความยาวฉีด volumn 10 μLเวลา (นาที) 0 5 15 30 45 60 75 850.1% H3PO4 (%) 98 97 97 87 86 81 79 0acetonitrile (%) 2 3 3 13 14 19 21 100เพิ่มเติมมีสกัดสารสกัดหยาบ (DL) ด้วยเอทิล acetate รับเศษส่วน acetate เอทิล (DL-P01) และเศษส่วนน้ำ เพิ่มเติมมีแยกเศษส่วนน้ำกับเอ็นบิวทานอรับการเอ็นบิวทานอย่อยเศษ (DL-P02) และน้ำย่อยเศษ (DL-P03) หลังจากแยก g 24.13 ของสารสกัดหยาบ DL-P01: 1.44 กรัม (5.97%); DL-P02: 2.57 กรัม (10.65%); DL-P03: 19.11 g (79.20%) จะได้รับการเศษส่วน acetate เอทิล (DL-P01) จะเพิ่มเติมภายใต้ chromatography แฟลช ประมาณ 1.1 กรัมของ DL P01 จะละลายในเมทานอลและเอทิล acetate ด้วยความช่วยเหลือของการทำความสะอาดอัลตราโซนิก และเพิ่มซิลิก้าเจล หลังจากการกลั่นตัวให้แห้ง ตัวอย่างเป็นอยู่ในหลอดตัวอย่างว่างเปล่า บนมืออื่น ๆ คอลัมน์ระยะปกติ 40 g ซิลิก้าเจล สำหรับ chromatography แฟลชมาพร้อมกับเครื่อง คอลัมน์จะอิ่มตัวไป ด้วยในตัวทำละลาย และโหลดตัวอย่าง โปรแกรมด้านล่างนี้: อัตราการไหลเป็น 18 mL/min เฟสเคลื่อนที่ใช้โซลูชันของเอทิล acetate A และ B โซลูชันของเมทานอล โปรแกรม elution ไล่ระดับเป็นโซลูชัน A 100% และ 0% B โซลูชันที่ 0 นาทีประมาณ 30 นาที โซลูชั่น A 80% และ 20% B โซลูชันที่ประมาณ 45 นาที ประมาณ 31 นาที โซลูชัน A 50% และ 50% B โซลูชันที่ประมาณ 46 นาทีประมาณ 65 นาที โซลูชัน A 0% และ 100% แก้ปัญหา B 66 นาทีประมาณ 85 นาที และประมาณ 86 นาทีประมาณ 100 นาทีผลลัพธ์จะแสดงใน FIG. 2, DL-P01-SI01: 765.3 มก. DL-P01-SI02: 100.4 มก. DL-P01-SI03: 37.0 มก. DL-P01-SI04: 21.7 มก. DL-P01-SI05: 140.1 มก. DL-P01-SI06: 57.3 มก. DL-P01-SI07: 28.4 มก. DL-P01-SI08: 17.0 มก. DL-P01-SI09: 6.4 มิลลิกรัม DL-P01-SI10: 7.7 มก.จะรับ DL-P01-SI01 เป็นผลิตภัณฑ์หลัก (ร้อยละ 69.86) ซึ่งรวบรวม โดย chromatography คอลัมน์แฟลชด้วยโปรแกรม elution ไล่ระดับแก้ปัญหา A 100% และ 0% B โซลูชันที่ 0 นาที 30 นาทีประมาณ 0.6 mL ของเมทานอลในการกล่าว DL-P01-SI01 6 มก. และเพิ่มเติม ต้อง การสั่นสะเทือน จางหาย เครื่องกรอง แล้ว ต้องทดสอบ Spectrophotometry มวลก๊าซ Chromatography (GC-MS) Chromatography ก๊าซจะดำเนินการกับติดตามที่ Ultra GC เทอร์โม และ spectrophotometry โดยรวมจะดำเนินการกับ ITQ 900 เทอร์โม คอลัมน์เป็นแล้วแต่กำหนด® VF-5 ms 30 m × 0.25 มม. (ประชาชน 0.25 μm) โปรแกรมอุณหภูมิเป็น 150° C. สำหรับ 5 นาที เครื่องทำความร้อน 190 องศา C. ในอัตรา 5° C./min ใน 20 นาที แสดงใน FIG. 1, spectrogram รับประกอบด้วยยอดเขาเวลาเก็บข้อมูลประมาณ 5.56 นาที ประมาณ 10.36 นาที 14.90 min ประมาณ 27.52 นาที เกี่ยวกับ 28.16 นาที เกี่ยวกับ 35.51 นาที เกี่ยวกับ 35.93 นาที และเกี่ยวกับ 37.56 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจากปลอกกระสุนและลบเยื่อกระดาษจากผลไม้ลำไยเมล็ดลำไยจะได้รับแล้วเมล็ดลำไยจะถูกทุบและเมล็ดลำไยทุบจะแช่อยู่ใน 20% ถึง 95% วิธีการแก้ปัญหาเอทานอลที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสถึง 90 ° C. , และอุณหภูมิจะคงที่ 30 องศาเซลเซียสถึง 90 องศาเซลเซียสสำหรับ 1 ถึง 3 ชั่วโมง วิธีการแก้ปัญหาที่ได้รับผ่านการสกัดจะถูกกรองเข้มข้นและจากนั้นภายใต้อุณหภูมิต่ำและความดันต่ำแห้งเพื่อให้ได้สารสกัดหยาบ (DL). สารสกัดหยาบอยู่ภายใต้การทดสอบประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography ตามที่อธิบายไว้ในตารางที่ 1 และผลที่แสดงในรูป 3. ตาราง 1 เครื่อง Agilent 1100 โครมาแอตแลนติ®T35ไมโครเมตร 4.6 × 10 มมน้ำคอลัมน์precolumn Cosmosil 5C18-AR-II 4.6 × 10 มม, Nacalai Tesque อุณหภูมิคอลัมน์ 25 องศาเซลเซียสอัตราการไหล 1.0 มิลลิลิตร / นาทีการตรวจจับคลื่นรังสียูวี 270 นาโนเมตรระยะเวลาในการฉีดปริมาตร 10 ไมโครลิตรเวลา (นาที) 0 5 15 30 45 60 75 85 0.1% H3PO4 (%) 98 97 97 87 86 81 79 0 acetonitrile (%) 2 3 3 13 14 19 21 100 สารสกัดหยาบ (DL) เป็น สกัดอีกด้วยเอทิลอะซิเตที่จะได้รับส่วนเอทิลอะซิเต (DL-P01) และส่วนน้ำ ส่วนน้ำสกัดอีกด้วย n-butanol ที่จะได้รับ n-butanol ส่วนย่อย (DL-P02) และส่วนย่อยน้ำ (DL-P03) หลังจากการสกัด 24.13 กรัมของสารสกัดหยาบ, DL-P01: 1.44 กรัม (5.97%) DL-P02: 2.57 กรัม (10.65%) DL-P03. 19.11 กรัม (79.20%) จะได้รับส่วนเอทิลอะซิเต (DL-P01) อยู่ภายใต้ต่อไปโคแฟลช ประมาณ 1.1 กรัมของ DL-P01 ถูกกลืนหายไปในน้ำนมและเมทานอลด้วยความช่วยเหลือของเครื่องทำความสะอาดอัลตราโซนิกและจากนั้นซิลิกาเจลจะมีการเพิ่ม หลังจากที่กลั่นตัวให้แห้งตัวอย่างจะถูกวางลงในหลอดตัวอย่างที่ว่างเปล่า ในทางตรงกันข้ามคอลัมน์เฟสปกติ, 40 กรัมซิลิกาเจลสำหรับโคแฟลชพร้อมที่จะอุปกรณ์ คอลัมน์อิ่มตัวด้วยตัวทำละลายและตัวอย่างการโหลด โปรแกรมจะระบุไว้ด้านล่าง: อัตราการไหลคือ 18 มิลลิลิตร / นาที; เฟสเคลื่อนที่ใช้โซลูชั่นของเอทิลอะซิเตและโซลูชั่น B เมทานอล; โปรแกรมชะลาดเป็นโซลูชั่น 100% และ 0% โซลูชั่น B ที่ประมาณ 0 นาทีประมาณ 30 นาที; 80% โซลูชั่นและ 20% โซลูชั่น B เวลาประมาณ 31 นาทีในการประมาณ 45 นาที; โซลูชั่น 50% และ B สารละลาย 50% อยู่ที่ประมาณ 46 นาทีถึงประมาณ 65 นาที; 0% โซลูชั่นและ 100% โซลูชั่น B เวลาประมาณ 66 นาทีในการประมาณ 85 นาทีและเวลาประมาณ 86 นาทีในการประมาณ 100 นาที. ผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงในรูป 2 และ DL-P01-SI01: 765.3 มิลลิกรัม; DL-P01-SI02: 100.4 มิลลิกรัม; DL-P01-SI03: 37.0 มิลลิกรัม; DL-P01-SI04: 21.7 มิลลิกรัม; DL-P01-SI05: 140.1 มิลลิกรัม; DL-P01-SI06: 57.3 มิลลิกรัม; DL-P01-SI07: 28.4 มิลลิกรัม; DL-P01-SI08: 17.0 มิลลิกรัม; DL-P01-SI09: 6.4 มิลลิกรัม; DL-P01-SI10: 7.7 มก. จะได้รับ DL-P01-SI01 เป็นผลิตภัณฑ์หลัก (69.86%) ซึ่งเป็นที่เก็บรวบรวมโดยคอลัมน์แฟลชกับโปรแกรมชะลาดของการแก้ปัญหา 100% และ 0% โซลูชั่น B ที่ประมาณ 0 นาทีไปประมาณ 30 นาที. เกี่ยวกับ 0.6 มิลลิลิตรของเมทานอลเป็น เพิ่มเข้ามาใน 6 มิลลิกรัมของดังกล่าวข้างต้น DL-P01-SI01 และยัดเยียดต่อการสั่นสะเทือน, ละลายและการกรองแล้วยัดเยียดให้แก๊สโครมา-มวล Spectrophotometry (GC-MS) ในการตรวจ แก๊สโครมาจะดำเนินการกับ Trace GC Ultra, เทอร์โม; และ spectrophotometry มวลจะดำเนินการกับ ITQ 900, เทอร์โม; คอลัมน์ที่เป็นVarian® VF-5 ms 30 เมตร× 0.25 มม (H 0.25 ไมครอน) โปรแกรมอุณหภูมิ 150 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที; ความร้อนถึง 190 องศาเซลเซียสในอัตรา 5 องศาเซลเซียส / นาทีเป็นเวลา 20 นาที ดังแสดงในรูป 1 spectrogram ที่ได้รับประกอบด้วยยอดเขาในเวลาการเก็บรักษาประมาณ 5.56 นาทีประมาณ 10.36 นาที, 14.90 นาทีประมาณ 27.52 นาทีประมาณ 28.16 นาทีประมาณ 35.51 นาทีประมาณ 35.93 นาทีและประมาณ 37.56 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจากปลอกกระสุนและลบ ผลิตจากผลไม้ลำไย , ลำไย เมล็ดพันธุ์ที่ได้รับ และเมล็ดลำไยถูกทุบและทำลายลำไย เมล็ดที่แช่อยู่ใน 20% ถึง 95% เอทานอล สารละลายที่อุณหภูมิ 30 องศา ถึง 90 องศา และอุณหภูมิไว้ที่ 30 องศา ถึง 90 องศา สำหรับ 1 ถึง 2 ชั่วโมง โซลูชั่นที่ได้จากการสกัดจะถูกกรอง , เข้มข้นและภายใต้ความดันต่ำและอุณหภูมิแห้งเพื่อให้ได้สารสกัดหยาบ ( DL ) .

สารสกัดหยาบคือต้องการประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography ( ตามที่อธิบายไว้ใน ตารางที่ 1 ผลจะแสดงในรูปที่ 3 . โต๊ะ

1
-
Agilent 1100 มิลลิแอตแลนติส ® t35 4.6 μ m × 10 มม. น้ำ

precolumn คอลัมน์ cosmosil 5c18-ar-ii 4.6 × 10 มม. nacalai tesque
คอลัมน์ร้อน 25 องศา อัตราการไหล 1.0 มิลลิลิตร / นาที

ตรวจจับคลื่น UV 270 nm

10 μ volumn ฉีดความยาว L
เวลา ( นาที ) 0 5 15 30 45 60 75 85
0.1% H3PO4 ( % ) 98 97 97 87 86 81 79 0
ไน ( % ) 2 3 3 13 14 19 21 100

สารสกัดหยาบ ( DL ) สกัดด้วยเอทิลอะซิเตทต่อขอรับเอทิลอะซิเตท และเศษส่วนเศษส่วน ( dl-p01 ) น้ำส่วนที่สกัดด้วยน้ำและ n-butanol ขอรับ n-butanol เศษส่วนย่อย ( dl-p02 ) และน้ำซุบเศษส่วน ( dl-p03 ) หลังจากแยก 24.13 กรัมสารสกัด หยาบคาย dl-p01 : 1.44 กรัม ( 5.97 % ) ; dl-p02 : 2.57 กรัม ( 10.65 เปอร์เซ็นต์ ) ; dl-p03 : 19.11 G ( ทาง ) ได้

ส่วนเอทิลอะซิเตต ( dl-p01 ) เพิ่มเติม ภายใต้แฟลชโครมาโทกราฟี เรื่องที่ 11 กรัมของ dl-p01 ละลายในเอทิลอะซิเตท และเมทานอล ด้วยความช่วยเหลือของ ultrasonic cleaner และซิลิกาเจลจะถูกเพิ่ม หลังจากกลั่นแห้ง ตัวอย่างจะถูกวางลงในหลอดตัวอย่างที่ว่างเปล่า บนมืออื่น ๆ , คอลัมน์เฟสปกติ 40 กรัม ซิลิกาเจล สำหรับแฟลชเครื่องเป็นอุปกรณ์ในเครื่อง คอลัมน์อิ่มตัวกับตัวทำละลายและตัวอย่างคือโหลดโปรแกรมที่แสดงไว้ด้านล่าง : อัตราการไหล 25 มิลลิลิตรต่อนาที ; ระยะเคลื่อนที่ใช้โซลูชั่นของเอทิลอะซิเตท และสารละลายเมทานอล ; โปรแกรมการใช้ 100% แก้ปัญหาและ 0 % สารละลายที่ 0 นาที ประมาณ 30 นาที ร้อยละ 80 และ 20 % โซลูชั่น โซลูชั่น บี ที่ เกี่ยวกับ นาทีที่ 31 จาก 45 นาที ; 50% และ 50% โซลูชั่นโซลูชั่น B ประมาณ 46 นาที ประมาณ 65 นาที0 % โซลูชั่นและ 100% สารละลายประมาณ 66 นาที 85 นาทีที่ 86 นาทีประมาณ 100 นาที .

ผลแสดงในรูปที่ 2 และ dl-p01-si01 : 765.3 มิลลิกรัม ; dl-p01-si02 : 100.4 มิลลิกรัม ; dl-p01-si03 : 35 มิลลิกรัม ; dl-p01-si04 : 21.7 มิลลิกรัม ; dl-p01-si05 : 140.1 มิลลิกรัม ; dl-p01-si06 : 57.3 mg ; dl-p01-si07 : 28.4 mg ; dl-p01-si08 : 17.0 mg ; dl-p01-si09 : 6.4 มิลลิกรัม ; dl-p01-si10 : 7.7 มก. ได้ .dl-p01-si01 เป็นผลิตภัณฑ์หลัก ( 69.86 % ) ซึ่งเป็นที่เก็บรวบรวมโดยแฟลชคอลัมน์โครมาโทกราฟี ด้วยการใช้โปรแกรม 100% แก้ปัญหาและ 0 % สารละลายที่ 0 นาที ประมาณ 30 นาที

ประมาณ 0.6 มิลลิลิตรเมธาเพิ่มใน 6 มิลลิกรัมต่อ dl-p01-si01 ดังกล่าวข้างต้นและการสั่นสะเทือน ละลายและการกรองแล้วต้องแก๊สโครมาโตกราฟีแมสสเปกโทรโฟโตเมตรี ( GC-MS ) ตามลำดับ แก๊สโครมาโทกราฟีและด้วยการติดตามอัลตร้า , GC เทอร์โม และมวลวิธีจะดำเนินการกับ itq 900 , เทอร์โม ; เสาเครื่อง® vf-5 MS 30 m × 0.25 มม. ( บัตร 0.25 μ M ) โปรแกรมอุณหภูมิ 150 องศา นาน 5 นาที ; ความร้อน 190 องศา ในอัตรา 5 ° C / นาที 20 นาที ดังแสดงในรูปที่ 1ที่ทำให้ได้รับประกอบด้วยยอดเขาที่คงอยู่ในเวลาประมาณ 5.56 นาทีเกี่ยวกับ 10.36 นาที 14.90 min เกี่ยวกับ 27.52 นาที เกี่ยวกับ 28.16% มิน เรื่องเกี่ยวกับ 35.93 35.51 มิน มิน และ 37.56
.