2.4. Fluorescence analysisFor the f

2.4. Fluorescence analysis

For the fluorescence analysis, compost samples were dried at 65 °C. One gram of each sample was extracted with 20 ml of deionised water by shaking for 24 h at room temperature. The extracts were filtered through Whatman No. 2 paper. Then, 1 ml of each sample was centrifuged at 15,000 rpm for 10 min in a SIGMA 2K15 centrifuge (rotor Nr. 12143, Osterode, Germany). Fluorescence spectra were obtained with an FP-6500 spectrofluorometer (JASCO, Japan). The excitation source was a 150-W xenon lamp. Contour maps of EEM spectra were obtained for water extracts of the composts. One hundred microlitres of the sample, filtered and centrifuged, were diluted in 2 ml of 20 mM phosphate buffer pH 8.0 (Marhuenda-Egea et al., 2007). The emission (Em) wavelength range was fixed from 300 to 550 nm in 2 nm steps, whereas the excitation (Ex) wavelength was increased from 220 to 400 nm in 5-nm steps. The slit widths were 5 nm and the compost extract was irradiated in a 1-cm-path-length, fused silica cell (Hellma). The UV–visible spectra of the diluted samples were acquired (Shimadzu UV-160 spectrophotometer, 200–800 nm, 1-cm quartz cuvette, Japan) and the absorbance was always lower than 0.1 at 254 nm, to reduce the absorbance of the solution and eliminate potential inner filter effects (Mobed et al., 1996). The fluorescence intensity was normalised to a quinine sulphate standard and expressed as quinine sulphate equivalent (QSE) in parts per billion (ppb) (Coble et al., 1993). The 45° ridge line of high fluorescence intensities in the upper left corner of the EEMs results from first-order Rayleigh scattering of the incident light from the excitation grating. Similarly, the 22.5° ridge line of high intensity on the right side is associated with second-order Rayleigh light scattering, where excited light is emitted at an emission wavelength twice that of the excitation wavelength. A new “excision, interpolation” technique was used to eliminate Rayleigh and Raman scattering peaks (Zepp et al., 2004). Windows-based software, Sigma-Plot 2001 (SPSS Inc.), was used to plot the contour maps. The increment of the contour lines was 5. In order to quantify the relative changes in the EEM spectra and for comparison of spectra, the percent fluorescence response (Pi,n) was calculated, using the integration method proposed by Chen (2003).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การการวิเคราะห์เรืองแสงสำหรับวิเคราะห์เรืองแสง ตัวอย่างปุ๋ยหมักถูกอบแห้งที่อุณหภูมิ 65 องศาเซลเซียส หนึ่งกรัมของตัวอย่างแต่ละถูกสกัด ด้วยน้ำ deionised 20 ml โดยการเขย่าที่อุณหภูมิห้อง 24 ชั่วโมง สารสกัดที่ถูกกรองผ่าน Whatman เลข 2 กระดาษ แล้ว 1 ml ของแต่ละอย่างคือจากที่ 15,000 rpm 10 นาทีในซิกม่า 2K 15 เหวี่ยง (ใบพัด Nr. 12143, Osterode เยอรมนี) เรืองแสงสเปกตรัมได้รับ ด้วยการ spectrofluorometer FP-6500 (JASCO ญี่ปุ่น) แหล่งกระตุ้นมาโคมไฟซีนอน 150 W แผนที่ contour ของสเปกตรัม EEM ได้รับสำหรับสารสกัดน้ำของ composts Microlitres หนึ่งร้อยตัวอย่าง กรอง และ ผลิตภัณฑ์ ถูกเจือจางใน 2 มล. 20 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 8.0 (Marhuenda-Egea et al. 2007) ช่วงความยาวคลื่นปล่อย (Em) ถูกแก้ไขจาก 300 เป็น 550 nm ในขั้นตอนที่ 2 nm ในขณะที่เพิ่มจาก 220 กระตุ้น (Ex) ความยาวคลื่น 400 nm 5 nm ขั้น ความกว้างของร่องถูก 5 nm และสารสกัดที่หมักถูกฉายรังสีในเซลล์ 1 cm-เส้นทางยาว ครอบฟันด้วยทั่วซิลิกา (Hellma) สเปกตรัมรังสียูวี – มองเห็นตัวอย่างที่เจือจางได้รับมา (สเปค Shimadzu UV-160, 200 – 800 nm, 1 ซม.ควอตซ์ เวต ญี่ปุ่น) และค่าที่ต่ำกว่า 0.1 ที่ 254 nm การลดค่าของการแก้ปัญหา และกำจัดภายในกรองผลอาจเกิดขึ้น (Mobed et al. 1996) ปกติมาตรฐานควินินซัลเฟตความเข้มเรืองแสง และแสดงเป็นยาควินินซัลเฟตเทียบเท่าล้อม) ในส่วนต่อหนึ่งแสนล้าน (ppb) (Coble et al. 1993) บรรทัดริดจ์ 45 องศาของความเข้มสูงเรืองแสงในมุมบนซ้ายของผลลัพธ์ EEMs จากลำดับแรก Rayleigh scattering เกิดเหตุแสงจากไฟฟ้าลูกกรง ในทำนองเดียวกัน 22.5° สันเขาบรรทัดของความเข้มสูงด้านขวาจะเกี่ยวข้องกับใบสั่งสอง Rayleigh แสง ซึ่งออกมาตื่นเต้นแสงที่ความยาวคลื่นปล่อยสองที่ความยาวคลื่นกระตุ้น เทคนิคใหม่ "ผ่าตัดเล็ก แก้ไข" ถูกใช้เพื่อกำจัดรามันและ Rayleigh scattering ยอด (Zepp et al. 2004) ใช้ Windows ซอฟต์แวร์ Sigma พล็อต 2001 (SPSS Inc.), ถูกใช้ในการพล็อตแผนที่ contour การเพิ่มขึ้นของเส้น 5 ได้ เพื่อวัดปริมาณการเปลี่ยนแปลงสัมพัทธ์ ในสเปกตรัม EEM และ สำหรับการเปรียบเทียบสเปกตรัม การตอบสนองร้อยละเรืองแสง (Pi, n) คำนวณ ใช้วิธีรวมเสนอ โดยเฉิน (2003)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 วิเคราะห์เรืองแสง

สำหรับการวิเคราะห์เรืองแสงตัวอย่างปุ๋ยหมักแห้งที่ 65 ° C หนึ่งกรัมของแต่ละตัวอย่างถูกสกัดด้วยน้ำ 20 มิลลิลิตร deionised ด้วยการเขย่าเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง สารสกัดถูกกรองผ่าน Whatman ฉบับที่ 2 กระดาษ จากนั้น 1 มิลลิลิตรของแต่ละตัวอย่างหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีในการหมุนเหวี่ยง SIGMA 2K15 (ใบพัด Nr. 12143, Osterode, เยอรมนี) สเปกตรัมการเรืองแสงที่ได้รับกับ spectrofluorometer FP-6500 (JASCO ญี่ปุ่น) แหล่งที่มากระตุ้นเป็นหลอดไฟซีนอน 150-W แผนที่รูปร่างของ EEM สเปกตรัมที่ได้รับสารสกัดจากน้ำของปุ๋ยหมัก หนึ่งร้อย microlitres ของกลุ่มตัวอย่างกรองและหมุนเหวี่ยงถูกเจือจางใน 2 มิลลิลิตร 20 มิลลิเมตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 8.0 (Marhuenda-Egea et al., 2007) การปล่อย (เอ็ม) ช่วงความยาวคลื่นคง 300-550 นาโนเมตรใน 2 ขั้นตอนนาโนเมตรในขณะที่การกระตุ้น (Ex) ความยาวคลื่นเพิ่มขึ้น 220-400 นาโนเมตรในขั้นตอนที่ 5 นาโนเมตร ความกว้างช่อง 5 เป็นนาโนเมตรและสารสกัดจากปุ๋ยหมักได้รับการฉายรังสีใน 1 ซม. เส้นทางที่มีความยาวเซลล์ซิลิกาผสม (Hellma) สเปกตรัมรังสียูวีที่มองเห็นของกลุ่มตัวอย่างที่ปรับลดกำลังซื้อ (Shimadzu UV-160 spectrophotometer, 200-800 นาโนเมตร 1 ซม cuvette ควอทซ์ญี่ปุ่น) และการดูดกลืนแสงก็มักจะต่ำกว่า 0.1 ที่ 254 นาโนเมตรเพื่อลดการดูดกลืนแสงของการแก้ปัญหา และขจัดผลกระทบกรองภายในที่มีศักยภาพ (นายโมเบ็ด et al., 1996) ความเข้มของการเรืองแสงได้รับปกติให้มีมาตรฐานควินินซัลเฟตและแสดงความเป็นเทียบเท่าควินินซัลเฟต (ว่าด้วยคุณภาพ) ในส่วนต่อพันล้าน (ppb) (Coble et al., 1993) สาย 45 °แนวความเข้มสูงเรืองแสงในที่มุมบนซ้ายของ EEMs ผลมาจากการสั่งซื้อครั้งแรก Rayleigh กระเจิงของแสงเหตุการณ์ที่เกิดขึ้นจากการกระตุ้นตะแกรง ในทำนองเดียวกันเส้น 22.5 °แนวความเข้มสูงบนด้านขวามีความเกี่ยวข้องกับลำดับที่สองกระเจิงแสงเรย์ลีที่แสงรู้สึกตื่นเต้นที่ถูกปล่อยออกมาที่ความยาวคลื่นปล่อยก๊าซเรือนกระจกเป็นสองเท่าของความยาวคลื่นกระตุ้น เทคนิคใหม่ "ตัดตอน, การแก้ไข" ถูกใช้ในการกำจัดและเรย์ลีรามันยอดกระเจิง (Zepp et al., 2004) ซอฟแวร์ที่ใช้ Windows ซิกพล็อต 2001 (SPSS Inc) ถูกนำมาใช้ในการวาดแผนที่เส้น การเพิ่มเส้นชั้นความสูงได้ 5. เพื่อให้ปริมาณการเปลี่ยนแปลงเมื่อเทียบกับในสเปกตรัม EEM และสำหรับการเปรียบเทียบสเปกตรัมการตอบสนองร้อยละเรืองแสง (PI, n) ที่คำนวณโดยใช้วิธีบูรณาการที่เสนอโดยเฉิน (2003)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การวิเคราะห์การเรืองแสงสำหรับการวิเคราะห์สารตัวอย่างปุ๋ยหมักแห้งที่อุณหภูมิ 65 องศา C หนึ่งกรัมของแต่ละตัวอย่างถูกสกัดด้วยน้ำ โดย deionised 20 มิลลิลิตร เขย่าเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง สารสกัดถูกกรองผ่านกระดาษ 2 whatman . แล้ว 1 มิลลิลิตรของแต่ละตัวอย่างที่ระดับ 15 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีใน Sigma 2k15 เครื่องหมุนเหวี่ยง ( ใบพัด Nr 12143 Osterode , เยอรมนี ) สเปกตรัมฟลูออเรสเซนซ์ที่ได้มี fp-6500 spectrofluorometer ( jasco , ญี่ปุ่น ) 01 เป็น 150-w ไฟซีนอน แผนที่โครงร่างของ eem สเปกตรัมที่ได้รับสารสกัดน้ำของปุ๋ยหมัก . หนึ่งร้อย microlitres ของตัวอย่างกรองไฟฟ้าถูกเจือจางใน 2 มล. 20 มิลลิเมตร ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 8.0 ( marhuenda egea et al . , 2007 ) การปล่อย ( EM ) ความยาวคลื่นช่วงคงที่จาก 300 550 nm ในขั้นตอนที่ 2 นาโนเมตร ส่วนกระตุ้น ( อดีต ) ความยาวคลื่นเพิ่มขึ้นจาก 220 400 nm ในขั้นตอน 5-nm . ร่องความกว้าง 5 nm และปุ๋ยอินทรีย์สกัดความรุนแรงใน 1-cm-path-length , ซิลิกาหลอมเซลล์ ( hellma ) และมองเห็นแสงยูวีการเจือจางตัวอย่างได้มา ( Shimadzu uv-160 Spectrophotometer , 200 – 800 nm 1-cm ควอทซ์คิวเวตต์ ญี่ปุ่น ) และการดูดกลืนแสงก็มักจะต่ำกว่า 0.1 ที่ 254 nm เพื่อลดการดูดกลืนแสงของสารละลายและลดศักยภาพผลตัวกรองภายใน ( mobed et al . , 1996 ) เรืองแสง เพื่อความเข้มเท่ากับยาควินินซัลเฟตมาตรฐานและแสดงเป็น ยาควินินซัลเฟตเทียบเท่า ( qse ) ในส่วนในพันล้าน ( ppb ) ( คอเบิล et al . , 1993 ) 45 องศาของความเข้มแสงในแนวสันเขาสูงที่มุมบนซ้ายของ eems ผลลัพธ์จากการกระเจิงของแสงเพื่อเรย์เหตุการณ์จากแผ่นตะแกรง ส่วน 22.5 องศาแนวสันเขาของความเข้มสูง ข้างขวาจะเกี่ยวข้องกับสอง - เรย์ การกระจายแสง ซึ่งแสงที่ความยาวคลื่นตื่นเต้นออกมาจากสองที่ของและความยาวคลื่น เป็นข้อมูลใหม่ " การ " ใช้เทคนิคลดและเรย์รามันยอดการกระเจิง ( เซปป์ et al . , 2004 ) ซอฟต์แวร์ Windows ใช้ ซิกม่า พล็อต 2001 ( SPSS Inc . ) ใช้พล็อต Contour แผนที่ การเพิ่มขึ้นของเส้นสาย 5 . เพื่อวัดการเปลี่ยนแปลงที่สัมพันธ์กันใน eem สเปกตรัม และการเปรียบเทียบสเปกตรัมการตอบสนอง ( ปี่ ) , n ) คือคำนวณโดยใช้การรวมวิธีการที่เสนอโดย เฉิน ( 2003 )