The DNA-immobilized membranes weigh

The DNA-immobilized membranes weighing 3.5 mg each were
first incubated with 1 mL of 1.5 mg/mL bovine serum albumin,
shaken at 300 rpm for 6 h at room temperature in an Eppendorf tube
(Protein LoBind) in order to reduce the non-specific binding. After
incubation, the membranes were repeatedly washed with distilled
water (each sample: 2 mL × 5 for 10 × 5 min) to remove the traces of
unbound albumin. Each membrane was then incubated with 0.5 mL
of 10 g/mL antibody solution for 3 h in an ice bath (around 4 ◦C)
on a mechanical shaker (500 rpm) in an Eppendorf tube (Protein
LoBind). After incubation, the membranes were removed, and theremaining antibody solution was used to determine the amount of
IgG bound by membranes using the mouse anti-dsDNA IgG ELISA
Kit. In addition, 2, 1, 0.5, 0.25 g/mL IgG solutions were also prepared for the standard curve for ELISA.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีเยื่อดีเอ็นเอตรึงน้ำหนัก 3.5 มิลลิกรัมครั้งแรก ได้รับการกกกับวัว 1.5 mg/mL serum albumin, 1 มิลลิลิตรเขย่าที่ 300 rpm สำหรับ 6 ชม.ที่อุณหภูมิห้องในหลอด Eppendorf(โปรตีน LoBind) เพื่อลดการรวมเฉพาะไม่ หลังจากที่กกไข่ เยื่อถูกซ้ำ ๆ ล้างด้วยกลั่นน้ำ (แต่ละอย่าง: 2 mL × 5 10 × 5 นาที) เพื่อลบร่องรอยของalbumin ผูก เมมเบรนแต่ละถูกแล้วได้รับการกกกับ 0.5 mLของ 10 g/mL ตไว้สำหรับ 3 ชม.ในห้องน้ำเป็นน้ำแข็ง (ประมาณ 4 ◦C)บนปั่นเครื่องจักรกล (500 รอบต่อนาที) ใน Eppendorf เป็นหลอด (โปรตีนLoBind) หลังจากบ่ม เยื่อออก และ theremaining ตไว้ใช้กำหนดจำนวนหา igg จำเพาะตามเยื่อใช้เมาส์ ELISA IgG ต่อต้าน-dsDNAชุด นอกจากนี้ 2, 1, 0.5, 0.25 g/mL หา igg จำเพาะโซลูชันที่พร้อมสำหรับเส้นโค้งมาตรฐาน ELISA

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เยื่อดีเอ็นเอตรึงชั่งน้ำหนัก 3.5 มิลลิกรัมแต่ละถูก
บ่มครั้งแรกกับ 1 มิลลิลิตร 1.5 mg / ml วัวซีรั่มอัลบูมิ,
เขย่าที่ 300 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 6 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องในหลอด Eppendorf
(โปรตีน LoBind) เพื่อที่จะลดความไม่เฉพาะเจาะจง ผูกพัน. หลังจาก
บ่มเยื่อถูกล้างซ้ำ ๆ กับกลั่น
น้ำ (แต่ละตัวอย่าง: 2 มล× 5 × 10 5 นาที) ลบร่องรอยของ
โปรตีนชนิดหนึ่งที่ไม่ถูกผูก แต่ละเมมเบรนถูกบ่มแล้วกับ 0.5 มิลลิลิตร
10? g / วิธีการแก้ปัญหามลแอนติบอดีเวลา 3 ชั่วโมงในอ่างน้ำแข็ง (ประมาณ 4 ◦C)
บนเครื่องปั่นกล (500 รอบต่อนาที) ในหลอด Eppendorf (โปรตีน
LoBind) หลังจากการบ่มเยื่อถูกถอดออกและวิธีการแก้ปัญหาแอนติบอดี theremaining ถูกใช้ในการกำหนดจำนวนของ
IgG ผูกพันตามเยื่อใช้เมาส์ป้องกัน dsDNA IgG ELISA
Kit นอกจากนี้ 2, 1, 0.5, 0.25? g / แก้ปัญหามล IgG ยังเตรียมไว้สำหรับโค้งมาตรฐานสำหรับวิธี ELISA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดีเอ็นเอสามารถชั่งได้ตรึง 3.5 มก.ก่อนแยก 1 มิลลิลิตร 1.5 mg / ml ) ซีรั่มอัลบูมินเขย่าความเร็ว 300 รอบต่อนาที 6 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องในหลอดเพนดอร์ฟ( lobind โปรตีน ) เพื่อลดชนิดผูก หลังจากบ่ม , เยื่อแผ่นแบบซ้ำ ๆล้างด้วยน้ำกลั่นน้ำ ( ตัวอย่าง : 2 ml × 5 10 × 5 นาที ) เพื่อลบร่องรอยของจับกับ albumin . แผ่น แล้วบ่มด้วย 0.5 มล.10 กรัม / มิลลิลิตร ) โซลูชั่นสำหรับ 3 ชั่วโมงในน้ำแข็งบาท ( ประมาณ 4 ◦ C )ในเครื่องปั่นกล ( 500 รอบต่อนาที ) ในหลอดเพนดอร์ฟ ( โปรตีนlobind ) หลังจากระยะเวลาที่หุ้มออก และ theremaining แอนติบอดีที่ใช้โซลูชั่นการตรวจสอบยอดเงินของรายชื่อสมาชิกผูกพันโดยเมมเบรนโดยใช้เมาส์ dsdna IgG ) ต่อต้านชุด นอกจากนี้ , 2 , 1 , 0 , 0.25 กรัม / มล. ปกติโซลูชั่นเตรียมกราฟมาตรฐานสำหรับวิธีอีไลซ่า