2. Materials and methods2.1. Sampli

2. Materials and methods
2.1. Sampling
A total of 86 tissue samples of five coral reef associated fish species of the genus Amphiprion were collected at different locations in the Indo-Malay Archipelago (Table 1 and Fig. 1). The
fishes were caught with two aquarium nets.


A fin clip from the caudal fin was taken and the fishes were released into their host anemones.

It was therefore possible to obtain tissue samples without killing the animals. The samples were stored in 96% ethanol.

*Fig. 1. (a) Distribution patterns and sample sites of the species Amphiprion akallopisos (dark grey, circles), A. perideraion (grey, stars) and A. sandaracinos (light grey, diamonds)
in the Indo-Malay Archipelago (Fautin and Allen 1994). Names of the main ocean basins and islands are added. (b) Distribution patterns and sample sites of the species Amphiprion ocellaris (grey, stars) and A. percula (dark grey, circles) in the Indo-Malay Archipelago (Fautin and Allen 1994). Dominant currents are added (simplified after Godfrey, 1996).


* Table 1
Number of sampled individuals from 5 species of the genus Amphiprion, abbreviations used (Abbr.), accession numbers (EMBL), and the corresponding sample locations in the Indo-Malay Archipelago

Thirty-two samples of A. ocellaris were obtained from five different locations over a range of 1500 km. The sibling species A. percula was collected in Biak (New Guinea; 10 samples) and from New Britain (New Guinea; 4 samples).

An additional number of 9 tissue samples have been collected from depths between 1 and 25 m
from the Togian Islands (Tomini Bay, Sulawesi).

Since A. ocellaris is distributed across the Indo-Malay Archipelago (Fautin and Allen,
1994), with its eastern border of distribution around the Molucca Islands and the most western tip of New Guinea, the samples from the Togian Islands have been classified as A. ocellaris.


One sequence of A. percula from Solomon Islands was added for each marker from
genebank (Table 1).

Within the subgenus Phalerebus, 10 specimens from two locations in the Indo-Malay Archipelago were analysed for each of the species A. akallopisos, A. sandaracinos, and A. perideraion.


As outgroup for the phylogenetic analyses Chromis viridis was used, which is a member of the same family (Pomacentridae).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การสุ่มตัวอย่างจำนวน 86 ตัวอย่างเนื้อเยื่อของปะการังห้าเกี่ยวข้องปลาพันธุ์สกุล Amphiprion ถูกรวบรวมไว้ที่สถานต่าง ๆ ในหมู่เกาะอินโด-มาเลย์ (ตารางที่ 1 และ Fig. 1) ที่ปลาถูกจับ ด้วยตาข่ายพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำ 2 คลิปหูจากฟิน caudal กระ และปลาที่ปล่อยหมู่ของโฮสต์ ดังนั้นจึงไม่สามารถรับตัวอย่างเนื้อเยื่อโดยไม่ต้องฆ่าสัตว์ ตัวอย่างถูกเก็บไว้ใน 96% เอทานอล* Fig. 1 (ก) การกระจายรูปแบบและตัวอย่างเว็บไซต์สปีชีส์ Amphiprion akallopisos (วงกลมสีเทา สีดำ), A. perideraion (สีเทา ดาว) และ A. sandaracinos (เพชรสีเทา ไฟ)ในเกาะอินโด-มาเลย์ (Fautin และอัลเลน 1994) มีเพิ่มชื่ออ่างล่างหน้าหลักมหาสมุทรและหมู่เกาะ (ข) การกระจายรูปแบบและตัวอย่างเว็บไซต์พันธุ์การ์ตูน (สีเทา ดาว) และอ. percula (วงกลมสีเทา สีดำ) ในหมู่เกาะอินโด-มาเลย์ (Fautin และอัลเลน 1994) กระแสหลักบวก (ง่ายหลังจาก Godfrey, 1996)* ตาราง 1จำนวนบุคคลตัวอย่างจาก 5 สปีชีส์ของสกุล Amphiprion ใช้ตัวย่อ (Abbr.), หมายเลขทะเบียน (EMBL), และสถานที่เก็บตัวอย่างที่สอดคล้องกันในหมู่เกาะอินโด-มาเลย์ตัวอย่างสามสิบสองของ ocellaris อ.ได้รับจากสถานที่ห้าช่วง 1500 กม. พี่น้องสายพันธุ์ A. percula รวบรวม ในเบียค (นิวกินี ตัวอย่าง 10) และ จากราชอาณาจักรใหม่ (นิวกินี ตัวอย่าง 4) จำนวน 9 ตัวอย่างเนื้อเยื่อที่เพิ่มเติมได้รวบรวมจากความลึกระหว่าง 1 และ 25 เมตรเกาะ Togian (อ่าว Tomini, Sulawesi) เนื่องจากอ. ocellaris กระจายหมู่เกาะอินโด-มาเลย์ (Fautin และอัลเลน1994), ขอบตะวันออกของกระจายเที่ยว Molucca และนิวกินีตะวันตกสุดปลาย ตัวอย่างเกาะ Togian ได้ถูกจัดให้เป็น A. ocellaris ลำดับหนึ่งของอ. percula จากหมู่เกาะโซโลมอนเพิ่มสำหรับแต่ละเครื่องหมายจาก genebank (ตารางที่ 1)ภายใน subgenus Phalerebus ไว้เป็นตัวอย่างที่ 10 จากสองตำแหน่งในหมู่เกาะอินโด-มาเลย์ถูก analysed สำหรับแต่ละ akallopisos สายพันธุ์ A., A. sandaracinos และ perideraion อ.เป็น outgroup สำหรับวิเคราะห์ phylogenetic ใช้ Chromis viridis ซึ่งเป็นสมาชิกของครอบครัวเดียวกัน (Pomacentridae)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 เก็บตัวอย่าง
ทั้งหมด 86 ตัวอย่างเนื้อเยื่อในห้าของแนวปะการังที่เกี่ยวข้องปลาสายพันธุ์ของพืชและสัตว์ Amphiprion ถูกเก็บในสถานที่แตกต่างกันในหมู่เกาะอินโดมาเลย์ (ตารางที่ 1 และรูปที่ 1).
ปลาที่ถูกจับด้วยสองมุ้งพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำ. คลิปจากครีบครีบหางถูกนำตัวและปลาได้รับการปล่อยตัวเป็นดอกไม้ทะเลโฮสต์ของพวกเขา. มันจึงเป็นไปได้ที่จะได้รับตัวอย่างเนื้อเยื่อโดยไม่ต้องฆ่าสัตว์ ตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ในเอทานอล 96%. * รูป 1. (ก) รูปแบบการจัดจำหน่ายและเว็บไซต์ตัวอย่างของสายพันธุ์ปลาการ์ตูนอินเดียนแดง (สีเทาเข้มวงกลม), A. perideraion (สีเทาดาว) และ A. sandaracinos (สีเทาอ่อน, เพชร) ในหมู่เกาะอินโดมาเลย์ (Fautin และอัลเลน 1994) ชื่อของแอ่งมหาสมุทรหลักและหมู่เกาะที่มีการเพิ่ม (ข) รูปแบบการจัดจำหน่ายและเว็บไซต์ตัวอย่างของสายพันธุ์ Amphiprion ocellaris (สีเทาดาว) และ A. percula (สีเทาเข้มวงกลม) ในหมู่เกาะอินโดมาเลย์ (Fautin และอัลเลน 1994) กระแสที่โดดเด่นมีการเพิ่ม (จีนหลังจากที่ก็อดฟรีย์, 1996). * ตารางที่ 1 จำนวนของบุคคลตัวอย่างจาก 5 ชนิดของพืชและสัตว์ Amphiprion, ตัวย่อที่ใช้ (ชื่อย่อ.) หมายเลขภาคยานุวัติ (EMBL) และสถานที่ตัวอย่างที่สอดคล้องกันในอินโดมาเลย์ หมู่เกาะสามสิบสองตัวอย่างของ A. ocellaris ที่ได้รับจากห้าสถานที่ต่างกันในช่วง 1,500 กม. พี่น้องสายพันธุ์ A. percula ถูกเก็บรวบรวมเบียค (นิวกีนี 10 ตัวอย่าง) และจากสหราชอาณาจักร (นิวกินี 4 ตัวอย่าง). จำนวนที่เพิ่มขึ้นของ 9 ตัวอย่างเนื้อเยื่อได้รับการเก็บจากส่วนลึกระหว่างวันที่ 1 และ 25 เมตรจากหมู่เกาะ Togian (Tomini เบย์, สุลาเวสี). ตั้งแต่ ocellaris A. มีการกระจายไปทั่วหมู่เกาะอินโดมาเลย์ (Fautin และอัลเลน, 1994) ที่มีพรมแดนทางทิศตะวันออกของการกระจายรอบเกาะ Molucca และปลายตะวันตกที่สุดของนิวกินีตัวอย่างจาก Togian เกาะได้รับการจัดเป็น A. ocellaris. หนึ่งลำดับของ percula A. จากหมู่เกาะโซโลมอนถูกเพิ่มเข้ามาสำหรับเครื่องหมายจากแต่ละgenebank (ตารางที่ 1). ภายใน subgenus Phalerebus, 10 ตัวอย่างจากสถานที่สองแห่งในหมู่เกาะอินโดมาเลย์มาวิเคราะห์ แต่ละสายพันธุ์ A. akallopisos, sandaracinos A. และ A. perideraion. ในฐานะที่เป็น outgroup สำหรับการวิเคราะห์สายวิวัฒนาการ Chromis ดิสที่ใช้ซึ่งเป็นสมาชิกของครอบครัวเดียวกัน (Pomacentridae)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . ทั้งหมด 86 ตัวอย่างเนื้อเยื่อของปะการังปลาชนิดนี้เกี่ยวข้องสกุลปลาการ์ตูน )
ถูกเก็บในสถานที่ที่แตกต่างกันในอินโดกลุ่มเกาะมลายู ( ตารางที่ 1 และรูปที่ 1 )
ปลาถูกจับสองตู้ปลาตาข่าย


ฟินคลิปจากครีบและหาง ถ่ายปลาถูกปล่อยออกจากโฮสต์ของพวกเขา .

ดังนั้นจึงเป็นไปได้ที่จะได้รับตัวอย่างเนื้อเยื่อโดยไม่ต้องฆ่าสัตว์ ตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ในแอลกอฮอล์ 96% .

รูปที่ 1 ( 1 ) รูปแบบการกระจายและตัวอย่างเว็บไซต์ชนิดของปลาการ์ตูนอินเดียนแดง ( สีเทาเข้มกลม ) , A . perideraion ( ดาวสีเทา ) และ sandaracinos ( เพชรสีเทาอ่อน )
ในอินโดกลุ่มเกาะมลายู ( fautin และอัลเลน 1994 )ชื่อของลุ่มน้ำหลักของมหาสมุทรและเกาะจะถูกเพิ่ม ( ข ) รูปแบบการกระจายและตัวอย่างเว็บไซต์ชนิดของปลาการ์ตูนเซลลาริส ( ดาวสีเทา ) และ เพอคูล่า ( สีเทาเข้มกลม ) ในอินโดกลุ่มเกาะมลายู ( fautin และอัลเลน 1994 ) เด่นกระแสจะเพิ่ม ( ประยุกต์จาก Godfrey , 1996 ) .



* ตารางที่ 1 จํานวนบุคคลจากตัวอย่าง 5 ชนิดของปลาการ์ตูนสกุล ,คำย่อที่ใช้ ( abbr ) หมายเลขภาคยานุวัติ ( สัตว ) และสอดคล้องกันตัวอย่างสถานที่ในอินโด มาเลย์ หมู่เกาะ

สามสิบสองตัวอย่างของ เซลลาริส ได้จาก 5 สถานที่ที่แตกต่างกันในช่วงของ 1 , 500 กิโลเมตร พี่น้องสายพันธุ์เอเพอคูล่า เก็บข้อมูลใน Biak ( นิวกินี ; 10 ตัวอย่าง ) และใหม่จากอังกฤษ ( นิวกินี ; 4 ตัวอย่าง )

หมายเลขเพิ่มเติมของ 9 ตัวอย่างเนื้อเยื่อได้รับการรวบรวมจากความลึกระหว่าง 1 และ 25 m
จาก togian เกาะ ( โทมินิ Bay , Sulawesi )

ตั้งแต่ A เซลลาริสกระจายทั่วอินโดกลุ่มเกาะมลายู ( fautin และอัลเลน
1994 ) กับชายแดนตะวันออกของกระจายทั่วเกาะโมลุกกะ และปลายตะวันตกมากที่สุด ของ นิว กินีตัวอย่างจาก togian เกาะได้รับการจัดเป็น เซลลาริส


หนึ่งลำดับของ เพอคูล่า จากเกาะโซโลมอนถูกเพิ่มสำหรับแต่ละเครื่องหมายจาก
genebank ( ตารางที่ 1 ) .

ภายใน phalerebus subgenus 10 ตัวอย่างจากสองสถานที่ในหมู่เกาะอินโด มาเลย์ วิเคราะห์แต่ละชนิด akallopisos A , 1 . sandaracinos และ perideraion


. . .ซึ่งเป็นกลุ่มเพื่อวิเคราะห์ chromis ลูกใช้ ซึ่งเป็นสมาชิกของครอบครัวเดียวกัน
( Pomacentridae )