By comparing the cDNA sequence of t

By comparing the cDNA sequence of the
Wx-D1b allele with genomic DNA sequence, two
specific primers were designed to amplify a specific
region of the Wx-D1 gene. This region covers the 588
bp deletion and 12 bp insertion of the mutant allele.
PCR was carried out using two specific primers (D1:
5′-GAGATGGTCAAGAACTGCAT-3′; D2: 5′-TAGTGCGTCCAGACTCACAG-3′)
as described by
Vrinten et al [10]. Another two specific primers located
inside D1 and D2, D3: 5 ′-TGGTGCTCTTGTTCGATGT-3′
and D4: 5′-AGACTCACAGTTTAACAGCA-3′,
were designed, respectively. Amplification
reactions were performed with pre-denaturation at
94℃for 10 min, followed by 28 cycles of denaturation
at 94℃ for 1 min, annealing at 56℃ for 1 min,
and extension at 72℃ for 1 min. A final extension
was carried out at 72℃ for 5 min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โดยการเปรียบเทียบลำดับ cDNA ของWx D1b allele ด้วย genomic DNA ลำดับ 2ไพรเมอร์เฉพาะถูกออกแบบมาเพื่อขยายการภูมิภาคของยีน Wx ง 1 588 ครอบคลุมภูมิภาคนี้บีพีการลบและแทรก bp 12 allele กลายพันธุ์PCR ถูกดำเนินการโดยใช้ไพรเมอร์เฉพาะสอง (ง 1:5′-GAGATGGTCAAGAACTGCAT-3′ D2: 5′-TAGTGCGTCCAGACTCACAG-3′)ตามที่อธิบายไว้โดยVrinten et al [10] อีกสองเฉพาะไพรเมอร์อยู่ภายในง 1 และ D2 ดี 3: 5 ′-TGGTGCTCTTGTTCGATGT-3′และ D4: 5′-AGACTCACAGTTTAACAGCA-3′ถูกออกแบบ ตามลำดับ ขยายปฏิกิริยาดำเนินกับ denaturation ก่อนที่94℃for 10 นาที ตาม ด้วยวงจร 28 การ denaturationที่ 94℃ ใน 1 นาที การอบเหนียวที่ 56℃ ใน 1 นาทีและ 72℃ ใน 1 นาที นามสกุลเป็นขั้นสุดท้ายได้ดำเนินการใน 72℃ สำหรับ 5 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โดยการเปรียบเทียบลำดับยีนของอัลลีล Wx-D1B ลำดับดีเอ็นเอสองไพรเมอร์ได้รับการออกแบบเฉพาะเพื่อขยายเฉพาะภูมิภาคของยีนWx-D1 ภูมิภาคนี้ครอบคลุมถึง 588 ลบ bp และแทรก bp 12 ของอัลลีลกลายพันธุ์. PCR ได้ดำเนินการโดยใช้สองไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง (D1: 5'-GAGATGGTCAAGAACTGCAT-3 '; D2: 5'-TAGTGCGTCCAGACTCACAG-3) ตามที่อธิบายVrinten et อัล [10] อีกสองไพรเมอร์โดยเฉพาะที่ตั้งอยู่ภายใน D1 และ D2, D3: 5 '-TGGTGCTCTTGTTCGATGT-3' และ D4: 5'-AGACTCACAGTTTAACAGCA-3 'ได้รับการออกแบบตามลำดับ ขยายปฏิกิริยาได้ดำเนินการกับการสูญเสียสภาพธรรมชาติก่อนที่94 ℃เป็นเวลา 10 นาทีตามด้วย 28 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่94 ℃เป็นเวลา 1 นาที, การอบที่ 56 ℃เป็นเวลา 1 นาทีและการขยายที่72 ℃เป็นเวลา 1 นาที ขยายสุดท้ายได้ดำเนินการที่ 72 ℃เป็นเวลา 5 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดยการเปรียบเทียบดีเอ็นเอลำดับ
wx-d1b ในลำดับดีเอ็นเอไพรเมอร์จำเพาะสอง
ถูกออกแบบมาเพื่อขยายขอบเขตเฉพาะ
ของ wx-d1 ยีน เขตนี้ครอบคลุมคุณ
BP การลบและ 12 BP แทรกของยีนกลายพันธุ์
PCR ได้ดําเนินการใช้ไพรเมอร์ที่จำเพาะสอง ( D1 :
5 ’ - ’ gagatggtcaagaactgcat-3 ; D2 : 5 ’ - ’ตามที่อธิบายไว้โดย tagtgcgtccagactcacag-3 )

vrinten et al [ 10 ]อีกสองที่เฉพาะเจาะจงโดยตั้งอยู่ภายใน D1 และ D2 D3
,
: 5 ’ - ’และ tggtgctcttgttcgatgt-3 D4 : 5 ’ - ’
agactcacagtttaacagca-3 , ออกแบบ ตามลำดับ ปฏิกิริยาการสอน ( (

℃ 94 ที่ 10 นาที ตามด้วย 28 รอบ (
1 นาทีที่ 94 ℃ annealing ที่ 56 ℃ 1 นาที
และส่งเสริม℃ 1 นาทีที่ 72 เป็น
นามสกุลสุดท้ายดำเนินการใน 5 นาที 72 ℃