2.4. Transmission electron microsco

2.4. Transmission electron microscopy (TEM)
Dissected normal and hypertrophic AGs (hAGs) were immediately
fixed in cold 4% paraformaldehyde and 2.5% glutaraldehyde
(Karnovsky’s fixative) in 0.2M phosphate buffer (pH 7.2), at 4 ◦C
for 1 h. They were then cut into small pieces, washed with phosphate
buffer, and post-fixed with 1% osmium tetroxide (OsO4) in
phosphate buffer at 4 ◦C for 1 h, and dehydrated with a series of
ethyl alcohol (50–100% ethanol), for 30 min each. The fixed AGs
were infiltrated in a mixture of propylene oxide and Araldite 502
(Electron Microscopic Science, Hatfield, PA, USA) at a ratio of 2:1
for 30 min, 1:1 for 30 min, and 1:2 overnight. They were infiltrated
with pure Araldite 502 overnight, and incubated in an oven at 45 ◦C
for 2 days and then transferred to 60 ◦C for 2 days. Semi-thin sections
were cut at 0.5m using a Sorvall MT-2 ultramicrotome,
and sections were then stained with 1% methylene blue, mounted,
observed under the light microscope, and photographed. Ultrathin
sections of 50–70nm were cut and placed on copper grids, and
then stained with lead citrate and uranyl acetate. The sections were
examined under a Hitachi H300 transmission electron microscope
at 75 kV.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. ส่งชาวดัตช์ (TEM)Dissected ปกติ และแรก AGs (hAGs) ได้ทันทีแก้ไขในเย็น 4% paraformaldehyde และ 2.5% glutaraldehyde(ตรึงของ Karnovsky) ใน 0.2M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2), ที่ 4 ◦Cสำหรับ 1 h พวกเขาถูกแล้วตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ ล้าง ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และแก้ไขหลัง มี 1% ออสเมียมเทโตรไซด์ (OsO4) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ 4 ◦C สำหรับ 1 h และอบแห้ง ด้วยชุดของเอทิลแอลกอฮอล์ (เอทานอ 50 – 100%), 30 นาที AGs ถาวรถูกแทรกซึมเข้าไปในส่วนผสมของโพรพิลีนออกไซด์และซี 502(วิทยาศาสตร์กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน แฮทฟิลด์ PA สหรัฐอเมริกา) ในอัตราส่วน 2:130 นาที 1:1 สำหรับ 30 นาที และค้างคืน 1:2 พวกเขาได้แทรกซึมเข้าไปกับเพียวซี 502 ข้ามคืน และได้รับการกกในเตาอบที่ 45 ◦C2 วัน และโอนไป 60 ◦C 2 วัน ส่วนบางกึ่งถูกตัดที่ 0.5 ม.ใช้เป็น ultramicrotome Sorvall MT-2และส่วนถูกแล้วย้อม ด้วยสีฟ้าเมทิลี 1% ติดตั้งสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสง และถ่ายภาพ บางเฉียบส่วนของ 50 – 70nm ถูกตัด และวางบนกริดทองแดง และจากนั้น ย้อม ด้วยตะกั่วอะซิเตเตรตและ uranyl ส่วนถูกตรวจสอบภายใต้ฮิตาชิ H300 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนที่ 75 เควี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 เกียร์กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (TEM)
ชำแหละกลุ่มโฆษณาปกติและ hypertrophic (แม่มด) ได้รับทันที
การแก้ไขในเย็น paraformaldehyde 4% และ 2.5% glutaraldehyde
(ตรึง Karnovsky ของ) ใน 0.2M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2) วันที่ 4 ◦C
เป็นเวลา 1 ชั่วโมง พวกเขาได้รับแล้วตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ ล้างด้วยฟอสเฟต
บัฟเฟอร์และหลังการแก้ไขด้วยออสเมียม tetroxide 1% (OsO4) ใน
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ 4 ◦Cเป็นเวลา 1 ชั่วโมงและอบแห้งด้วยชุดของ
เอทิลแอลกอฮอล์ (50-100% เอทานอล ) เป็นเวลา 30 นาทีในแต่ละ AGS 's คง
ถูกแทรกซึมเข้าไปอยู่ในส่วนผสมของโพรพิลีนออกไซด์และ Araldite 502
(Electron กล้องจุลทรรศน์วิทยาศาสตร์ Hatfield, PA, สหรัฐอเมริกา) ในอัตราส่วน 2: 1
เป็นเวลา 30 นาที, 1: 1 เป็นเวลา 30 นาทีและ 1: 2 ในชั่วข้ามคืน พวกเขาถูกแทรกซึม
กับ Araldite บริสุทธิ์ 502 ค้างคืนและบ่มในเตาอบที่ 45 ◦C
เป็นเวลา 2 วันแล้วย้าย 60 ◦Cเป็นเวลา 2 วัน ส่วนบางกึ่ง
ถูกตัดที่ 0.5? m ใช้ Sorvall MT-2 ultramicrotome,
และส่วนมีการย้อมแล้วกับ 1% เมทิลีนสีฟ้า, ติดตั้ง
ข้อสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงและการถ่ายภาพ Ultrathin
ในส่วนของ 50-70nm ถูกตัดและวางไว้บนตะแกรงทองแดงและ
แล้วย้อมด้วยสีตะกั่วและซิเตรต uranyl acetate ส่วนที่ได้รับการ
ตรวจสอบภายใต้ฮิตาชิ H300 ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน
ที่ 75 กิโลโวลต์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( TEM )รายงานปกติและ hypertrophic AGS ( แม่มด ) ได้ทันทีถาวรในพาราฟอร์มาลดิไฮด์ 4% และ 2.5% glutaraldehyde เย็น( karnovsky เป็นฟิกเซทีฟ ) ใน 0.2m ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2 ) , ที่ 4 ◦ c1 ชั่วโมง จากนั้นหั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ ล้างด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และหลังซ่อมด้วย 1% ออสเมียม tetroxide ( oso4 )ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ 4 ◦ C เป็นเวลา 1 ชั่วโมงและอบแห้งกับชุดของเอทิลแอลกอฮอล์ ( 50 – 100 % เอทานอล ) เป็นเวลา 30 นาทีในแต่ละ รุ่นถาวรแทรกซึมอยู่ในส่วนผสมของโพรพิลีน ออกไซด์ และ araldite 502( ทางกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน , วิทยาศาสตร์ , ฮัท , PA , USA ) ในอัตราส่วน 2 : 130 นาที 30 นาที อัตราส่วน 1 : 1 และ 1 : 2 คืน พวกเขาแทรกซึมบริสุทธิ์ araldite 502 ค้างคืน และบ่มในเตาอบที่อุณหภูมิ 45 ◦ c2 วัน แล้วค่อยโอนไป 60 ◦ C เป็นเวลา 2 วัน ส่วนบางกึ่งเคยตัดที่ 0.5 โดยใช้ sorvall ultramicrotome ถูก ,และส่วนที่ถูกย้อมด้วยเมทธิลีน 1 เปอร์เซ็นต์ บลู เมาท์ตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสงและถ่ายภาพ ลตร้าธินส่วน 50 – 70nm ที่ถูกตัดและวางไว้บนตะแกรงทองแดง และแล้วย้อมด้วยสารเคมี ตะกั่ว และยูเรนิลอะซิเทต ส่วนคือบริษัท ฮิตาชิ h300 ตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนที่ 75 KV .