Young offshoots of date palm cv.Bre

Young offshoots of date palm cv.Bream (2 – 3 years old) were chosen and detached from the mother tree. Offshootswere dissected acropetaly until the shoot tips appeared. Shoot tips of 3 cm (apicalmeristem with soft inner leaves) were excised with immature fiber 2 cm in diameter and then dipped in autioxidantืsolution consisted of 150 mg/L cirtic acid plus 100 mg/L ascorbic acid (Tisserat 1991).Explants were surface sterilized in 50%(v:v) commercial bleach (sodium
hypochlorite) plus 300 mg/L KMNO4 containing eight drops of tween 20 as emulsifier for 20 minutes under vacuum,and rinsed three times with sterile distilled water. They were transferred to Petri dishes and all leaf primordia were removed except two pairs surrounding the apical meristem.The medium used in the initiation stage was composed of Murashige and Skoog1962 (MS) salts plus the following (mg/L):thiamine – HCl, 1.0; pyridoxine – HCl, 1.0;adenine sulfate 2H2O, 50; myo-inositol, 100;NaH2PO4. 2H2O, 170; glutamine, 200;sucrose, 30000 activated charcoal, 2500;polyvenypyroledone (PVP), 2000 and agaragar7000. Callus initiation medium was
supplemented with 50 mg/L Picloram and3.0 mg/L isopentenyladenine (2ip). The pH
of the medium was adjusted to 5.7 with 0.1N NaOH or HCl, before the addition of
agar. Media were heated until boiling and dispensed into 150×25 mm culture tubes
with 25 ml each, then covered with aluminium plugs. All tubes with media were autoclaved at 121°C and 1.04 kg/cm²for 15 minutes. Apical meristems were
divided longitudinally into four equal segments aseptically inside laminar air flow
cabinet and cultured on callus initiation medium for 24 weeks and recultured at 4
weeks intervals (Fig. 1-A and B). Initial calli were then inoculated into 250 ml
polycarbonate jars containing 40 mL of embryogenic callus proliferation medium
(Fig. 1-C). The medium consisted of MS salts with the same supplements described
for callus induction medium for eight weeks. Embryogenic calli were then
transferred to MS medium containing various concentrations of coconut water (0,
5, 10 or 20%) (v:v) or casein hydrolysate (0,0.5, 1.0, or 2.0 g/L) after cytokinin exclusion. Coconut water was prepared according to Al-Khayri (2010). Embryos germination percentage was recorded after4 weeks of transferring the globular embryo masses into to a medium containing 0.1
mg/L NAA and 0.05 mg/L BAP. All cultures were incubated in a culture room under low light intensity (1000 lux) for 16 hours daily at 27 + 1°C for four weeks. Two subcultures at four week intervals were done and data were recorded. Ten replicates of each treatment were used.
Data were subjected to analysis of variance (ANOVA) and the means were compared at
5% significance level using least significant difference (LSD) test.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หนุ่ม offshoots วันปาล์ม cv ทรายแดง (2-3 ปี) ได้เลือก และแยกออกจากต้นแม่ Acropetaly Offshootswere dissected จนเคล็ดลับยิงปรากฏ ยิง เคล็ดลับ 3 ซม (apicalmeristem มีใบอ่อนนุ่มภายใน) excised มี immature ใยเส้นผ่าศูนย์กลาง 2 ซม. และจากนั้น จุ่มลงใน autioxidantืsolution ประกอบด้วย 150 mg/L cirtic 100 mg/L และกรดแอสคอร์บิคกรด (Tisserat 1991) Explants ถูกผิว sterilized ใน 50%(v:v) พาณิชย์ฟอกขาว (โซเดียมไฮโป) บวก 300 mg/L KMNO4 ประกอบด้วยแปดหยด tween 20 เป็นอิมัลซิ 20 นาทีภายใต้สูญญากาศ และ rinsed สามครั้ง ด้วยน้ำกลั่นที่ฆ่าเชื้อ จะถูกโอนย้ายไปจาน Petri และ primordia ใบไม้ทั้งหมดออกยกเว้นคู่ที่สอง apical meristem ที่อยู่โดยรอบ สื่อที่ใช้ในระยะเริ่มต้นได้ประกอบ Murashige และ Skoog1962 (MS) salts บวกต่อ (mg/L): ไทอามีน – HCl, 1.0 ไพริดอกซีน – HCl, 1.0; 2H2O ซัลเฟต adenine, 50 myo-inositol, 100 NaH2PO4 2H2O, 170 glutamine, 200 ซูโครส 30000 ถ่าน 2500 polyvenypyroledone (PVP), 2000 และ agaragar7000 สื่อเริ่มต้นให้ได้เสริม ด้วย 50 mg/L Picloram and3.0 mg/L isopentenyladenine (2ip) PHของกลางถูกปรับปรุง 5.7 กับ 0.1N NaOH หรือ HCl ก่อนการเพิ่มagar สื่อถูกความร้อนจนเดือด และคำเป็น 150 × 25 มม.วัฒนธรรมหลอดมี 25 มล.ละ ปกคลุม ด้วยอลูมิเนียมปลั๊กแล้ว หลอดทั้งหมดกับสื่อได้ autoclaved cm²for 1.04 กิโลกรัมและ 121° C 15 นาที มี apical meristemsแบ่งออกเป็น 4 เซกเมนต์เท่าภายในกระแสอากาศ laminar aseptically longitudinallyตู้ และอ่างบนให้เริ่มต้นกลางสัปดาห์ 24 และ recultured ที่ 4ช่วงสัปดาห์ที่ผ่านมา (Fig. 1 A และ B) Calli เริ่มต้นได้แล้ว inoculated เป็น 250 mlขวดโพลีคาร์บอเนตประกอบด้วย 40 mL ของเยื่อให้แพร่หลายสื่อกิน 1-C) สื่อประกอบด้วยเกลือของ MS กับอาหารเสริมเหมือนกับที่อธิบายไว้สำหรับสื่อเหนี่ยวนำให้แปดสัปดาห์ Calli เยื่อได้แล้วโอนย้ายไปกลาง MS ที่ประกอบด้วยความเข้มข้นต่าง ๆ น้ำมะพร้าว (05, 10 หรือ 20%) (v: v) หรือเคซีนด้วย (0,0.5, 1.0 หรือ 2.0 g/L) หลังจากแยก cytokinin น้ำมะพร้าวเตรียมไว้ตามอัล-Khayri (2010) เปอร์เซ็นต์การงอกโคลนถูกสัปดาห์ after4 บันทึกการโอนอ่อน globular มวลชนเป็นสื่อประกอบด้วย 0.1NAA และ 0.05 mg/L BAP. mg/L วัฒนธรรมทั้งหมดถูก incubated ในห้องวัฒนธรรมภายใต้ความเข้มแสงต่ำ (1000 lux) ชั่วโมงที่ 16 วันที่ 27 + 1 ° C สำหรับ 4 สัปดาห์ ทำ subcultures สองในช่วงเวลา 4 สัปดาห์ และบันทึกข้อมูล เหมือนกับการรักษาแต่ละ 10 ใช้ข้อมูลถูกต้องวิเคราะห์ผลต่างของ (การวิเคราะห์ความแปรปรวน) และมีการเปรียบเทียบวิธีการที่ระดับนัยสำคัญ 5% ที่ใช้ทดสอบความแตกต่าง (LSD) อย่างมีนัยสำคัญน้อยที่สุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หน่ออ่อนของวันที่ปาล์ม cv.Bream (2-3 ปี) ได้รับการแต่งตั้งและออกจากต้นแม่ Offshootswere ชำแหละ acropetaly จนเคล็ดลับการถ่ายภาพที่ปรากฏ ยิงเคล็ดลับ 3 เซนติเมตร (apicalmeristem ภายในที่มีใบอ่อน) ได้รับการตัดที่มีกากใยที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ 2 ซม. ในเส้นผ่าศูนย์กลางแล้วจุ่มลงใน autioxidant ืแก้ปัญหาประกอบด้วย 150 มิลลิกรัม / ลิตรกรด cirtic บวก 100 มิลลิกรัม / ลิตรวิตามินซี (Tisserat 1991) .Explants อยู่ พื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อใน 50% (V: V) สารฟอกขาวในเชิงพาณิชย์
(โซเดียมไฮโปคลอไรต์) บวก 300 มิลลิกรัม / ลิตร KMNO4 มีแปดหยดทวี 20 เป็นอิมัลซิเป็นเวลา 20 นาทีภายใต้สูญญากาศและล้างสามครั้งด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ พวกเขาจะถูกโอนไปยังจานเลี้ยงเชื้อและใบ primordia ทั้งหมดถูกถอดออกยกเว้นสองคู่รอบกลาง meristem.The ปลายที่ใช้ในขั้นตอนการเริ่มต้นประกอบไปด้วยอาหารสูตร Murashige และ Skoog1962 (MS) เกลือบวกดังต่อไปนี้ (mg / L): วิตามินบี - HCl, 1.0; ไพริดอกซิ - HCl 1.0; 2H2O ซัลเฟต adenine, 50; myo-ทอ 100; NaH2PO4 2H2O 170; glutamine 200; ซูโครสถ่าน 30000 เปิดใช้งาน, 2500; polyvenypyroledone (PVP) 2000 และ agaragar7000 แคลลัสขนาดกลางเริ่มต้นได้รับการเสริมด้วย 50 มิลลิกรัม / ลิตร picloram and3.0 มิลลิกรัม / ลิตร isopentenyladenine (2ip)
ค่าพีเอชของกลางที่ถูกปรับให้กับ NaOH 5.7 0.1N หรือ HCl ก่อนที่การเพิ่มขึ้นของวุ้น สื่อถูกความร้อนจนเดือดและจ่ายออกเป็น 150 × 25 มมหลอดวัฒนธรรมที่มี25 มล. แต่ละปกคลุมแล้วด้วยปลั๊กอลูมิเนียม หลอดทั้งหมดที่มีสื่อถูกเบาที่ 121 องศาเซลเซียสและ 1.04 กก. / cm²for 15 นาที meristems ปลายถูกแบ่งออกตามยาวออกเป็นสี่ส่วนเท่ากันปลอดเชื้อภายในการไหลของอากาศราบเรียบตู้และเพาะเลี้ยงแคลลัสในกลางเริ่มต้น24 สัปดาห์และ recultured ที่ 4 ช่วงสัปดาห์ที่ผ่านมา (รูปที่. 1 A และ B) แคลลัสเริ่มต้นถูกเชื้อแล้วเป็น 250 มล. ขวดโพลีคาร์บอเนตที่มี 40 มลแคลลัส embryogenic กลางงอก(รูป. 1 C) สื่อที่ประกอบด้วยเกลือ MS ด้วยอาหารเสริมเดียวกับที่อธิบายสำหรับสื่อเหนี่ยวนำแคลลัสแปดสัปดาห์ แคลลัส Embryogenic แล้วถูกถ่ายโอนไปยังสูตรMS ที่มีความเข้มข้นต่างๆของน้ำมะพร้าว (0, 5, 10 หรือ 20%) (V: V) หรือไฮโดรไลเซเคซีน (0,0.5, 1.0 หรือ 2.0 กรัม / ลิตร) หลังจากที่ไซโตไคนิยกเว้น น้ำมะพร้าวที่ถูกจัดทำขึ้นตามอัล Khayri (2010) งอกร้อยละอ่อนได้รับการบันทึก after4 สัปดาห์ของการถ่ายโอนฝูงตัวอ่อนเข้าไปในทรงกลมขนาดกลางที่มี 0.1 มิลลิกรัม / ลิตร NAA และ 0.05 มิลลิกรัม / ลิตร BAP วัฒนธรรมทั้งหมดถูกบ่มในห้องวัฒนธรรมภายใต้ความเข้มแสงต่ำ (1000 ลักซ์) เป็นเวลา 16 ชั่วโมงทุกวันที่ 27 + 1 องศาเซลเซียสเป็นเวลาสี่สัปดาห์ สองวัฒนธรรมในช่วงเวลาสี่สัปดาห์ที่ได้ทำและข้อมูลที่ถูกบันทึกไว้ สิบซ้ำของการรักษาแต่ละถูกนำมาใช้. ข้อมูลภายใต้การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) และวิธีการเปรียบเทียบที่ระดับนัยสำคัญ5% ใช้น้อยแตกต่างกัน (LSD) การทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หนุ่ม offshoots ของอินทผลัมพันธุ์แดง ( 2 – 3 ปี ) ได้รับเลือก และแยกออกจากต้นแม่ offshootswere ผ่า acropetaly จนถึงปลายยอดที่ปรากฏ ยิงเคล็ดลับ 3 ซม. ( apicalmeristem ใบชั้นในที่อ่อนนุ่ม ) ถูกตัดด้วยเส้นใยอ่อนขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 2 เซนติเมตร แล้วจุ่มลงในสารละลายื autioxidant จำนวน 150 mg / l ( cirtic บวก 100 มิลลิกรัม / ลิตร กรดแอสคอร์บิค ( tisserat 1991 )เติมสารฆ่าเชื้อที่ผิวได้ 50% ( V : V ) สารฟอกขาว ( โซเดียมไฮโปคลอไรท์พาณิชย์
) และ 300 มก. / ล. KMnO4 ที่มีแปดหยด Tween 20 เป็นอิมัลซิไฟเออร์ ประมาณ 20 นาที ในสุญญากาศ และล้างสามครั้งกับการเป็นหมัน น้ำกลั่น พวกเขาโอนไปยังจานเลี้ยงเชื้อและทุกใบ ไพรม ์เดียออกยกเว้นสองคู่รอบเนื้อเยื่อเจริญปลายยอด .สื่อที่ใช้ในการริเริ่มประกอบด้วยอาหารที่ skoog1962 ( MS ) เกลือบวกต่อไปนี้ ( mg / L ) : Thiamine HCl และ 1.0 ; pyridoxine HCL ) , 1.0 ; และซัลเฟต 2H2O-dx , 50 ; เมียวไอโนซิทอล , 100 ; nah2po4 . 2H2O-dx , 170 ; Glutamine , 200 ; ซูโครส , ผงถ่าน , 2500 ; polyvenypyroledone ( PVP ) , 2000 และ agaragar7000 . การเสริมแคลลัสคือ
) 50 มก. / ล. พิคลอแรม 3 .0 มิลลิกรัมต่อลิตร isopentenyladenine ( 2ip ) pH
ของสื่ออยู่ในระดับที่เหมาะสมกับ 0.1n 5.7 NaOH หรือ HCl , ก่อนที่จะเพิ่ม
วุ้น สื่อถูกอุ่นจนเดือดและจ่ายไป 150 × 25 มม. ท่อ
25 มิลลิลิตร ในแต่ละวัฒนธรรมก็ปกคลุมด้วยปลั๊กอลูมิเนียม หลอดทั้งหมดที่มีสื่อที่ 121 ° C และสังเคราะห์ 1.04 กก. / ซม. พนักงานขายสำหรับ 15 นาที ปลาย
meristems คือแบ่งออกเป็นสี่ส่วน aseptically ตามยาวเท่ากับอากาศภายในตู้ไหลเวียน
แบบเพาะเลี้ยงบนอาหารเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 24 สัปดาห์ และการ recultured 4
สัปดาห์ช่วง ( รูปกระเทียมดองและ B ) เริ่มต้นแคลลัสแล้วเชื้อ 250 ml
โพลีคาร์บอเนตที่มี 40 มิลลิลิตรขวดเลี้ยงแคลลัสมาก ( รูป )
1 c )กลางประกอบด้วยเกลือ MS กับอาหารเสริมเดียวกันอธิบาย
ชักนำขนาดกลางสำหรับแปดสัปดาห์ เลี้ยงแคลลัสแล้ว
โอน MS ที่มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของน้ำมะพร้าว ( 0
5 , 10 หรือ 20 % ) ( 5 : 5 ) หรือ เคซีน ไฮโดรไลเสท ( 0,0.5 1.0 และ 2.0 กรัมต่อลิตร ) หลังจากที่ ) ยกเว้น น้ํามะพร้าวที่เตรียมไว้ตามล khayri ( 2010 )เปอร์เซ็นต์ ความงอก ถูกบันทึก after4 สัปดาห์ของการถ่ายโอนมวลของทรงกลมในอาหารที่มี NAA 0.1
mg / l และ 0.05 มิลลิกรัมต่อลิตร เหมาะสม วัฒนธรรมทั้งหมดถูกบ่มในวัฒนธรรมห้องภายใต้ความเข้มแสงต่ำ ( 1 , 000 ลักซ์ ) 16 ชั่วโมง ทุกวันที่ 27 1 ° C เป็นเวลา 4 สัปดาห์ ในช่วงสี่สัปดาห์ที่ 2 พัฒนาจนเสร็จ และทำการบันทึก10 นาทีของการรักษาแต่ละครั้งใช้ .
ข้อมูลภายใต้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) และวิธีการเปรียบเทียบที่ระดับนัยสำคัญ 5%
ใช้ Least Significant Difference ( LSD ) ทดสอบ