AbstractFructose-1,6-bisphosphate (

Abstract
Fructose-1,6-bisphosphate (FBP) aldolase, is a glycolytic enzyme that catalyzes the reversible condensation reaction of FBP to dihydroxyacetone phosphate (DHAP) and glyceraldehyde-3-phosphate (G3P). The aldolase gene from Aquifex aeolicus was subcloned, overexpressed in E. coli and purified to 95% homogeneity. The purified enzyme was activated by high concentrations of NH4+ and low concentrations of Co2+. The native molecular weight of the purified FBP aldolase was identified as 67 kDa (dimer) by gel filtration chromatography. The enzyme exhibits optimum pH at 6.5 and temperature at 90 °C. Based on the kinetic characterizations, the apparent Km was calculated to be 4.4 ± 0.07 mM, while Vmax was found to be 100 ± 0.02 μM min−1 mg protein−1. The recombinant protein showed extreme heat stability; no activity loss was observed even at 100 °C for 2 h. In addition, the thermophilic enzyme also showed higher stability against several organic solvents viz. acetonitrile, 1,4-dioxane, and methanol. With higher stability against both heat and organic solvents than any other class II aldolase, the A. aeolicus FBP aldolase is an attractive enzyme for use as a biocatalyst for industrial applications.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นามธรรม
ฟรักโทส-1 ,6-bisphosphate (FBP) อัลโดเป็นเอนไซม์ที่กระตุ้น glycolytic ปฏิกิริยาการรวมตัวของ FBP กลับไป dihydroxyacetone ฟอสเฟต (DHAP) และ glyceraldehyde-3-ฟอสเฟต (G3P) ยีนอัลโดจาก aeolicus aquifex ถูก subcloned, overexpressed ในอีเมล coli และบริสุทธิ์ถึง 95% เนื้อเดียวกันเอนไซม์บริสุทธิ์ที่ถูกเปิดใช้งานโดยความเข้มข้นสูงของความเข้มข้นและ NH4 CO2 ต่ำของ น้ำหนักโมเลกุลพื้นเมืองของอัลโด FBP บริสุทธิ์ถูกระบุว่าเป็น 67 kda (dimer) โดยการกรองโคเจล เอนไซม์แสดง ph เหมาะสมที่ 6.5 และอุณหภูมิที่ 90 องศาเซลเซียส ขึ้นอยู่กับลักษณะเฉพาะที่เกี่ยวกับการเคลื่อนไหวที่ชัดเจนกิโลเมตรที่คำนวณได้จะเป็น 4.4 ± 0.07 มิลลิเมตรในขณะที่ VMAX พบว่ามี 100 ± 0.02 ไมโครเมตรนาที 1 มิลลิกรัมโปรตีน-1 โปรตีนที่แสดงให้เห็นความมีเสถียรภาพความร้อนสูงสูญเสียไม่มีกิจกรรมใด ๆ ก็สังเกตเห็นได้ที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 ชั่วโมง นอกจากนี้เอนไซม์ที่อุณหภูมิยังแสดงให้เห็นความมีเสถียรภาพสูงขึ้นกับตัวทำละลายอินทรีย์หลาย ได้แก่ acetonitrile, 1,4-dioxane และเมทานอลที่มีความมั่นคงสูงขึ้นกับทั้งความร้อนและตัวทำละลายอินทรีย์กว่าชั้นอื่น ๆ ii อัลโด, aeolicus FBP อัลโดเป็นเอนไซม์ที่น่าสนใจสำหรับใช้เป็น biocatalyst สำหรับงานอุตสาหกรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นามธรรม
ฟรักโทส-1,6-bisphosphate (FBP) aldolase เป็นเอนไซม์ glycolytic ที่ catalyzes ปฏิกิริยาควบแน่นอย่างของ FBP dihydroxyacetone ฟอสเฟต (DHAP) และ glyceraldehyde-3-ฟอสเฟต (G3P) ยีน aldolase จาก Aquifex aeolicus ได้ subcloned, overexpressed ใน E. coli และบริสุทธิ์ที่ 95% homogeneity เอนไซม์บริสุทธิ์เรียกใช้ โดยความเข้มข้นสูงของ NH4 และความเข้มข้นต่ำสุดของ Co2 น้ำหนักโมเลกุลเจ้าของ aldolase FBP บริสุทธิ์มีการระบุไว้เป็น kDa 67 (ผลิตของ dimer) โดยเจกรอง chromatography เอนไซม์จัดแสดงค่า pH ที่เหมาะสมที่ 6.5 และอุณหภูมิที่ 90 องศาเซลเซียส ขึ้นอยู่กับ characterizations เดิม ๆ Km ชัดเจนถูกคำนวณเป็น 4.4 ± 0.07 มม. ขณะพบ Vmax จะ 100 ± 0.02 μM min−1 protein−1 มิลลิกรัม Recombinant โปรตีนแสดงให้เห็นว่าความมั่นคงความร้อน ไม่ขาดทุนกิจกรรมที่สังเกตได้ที่ 100 ° C สำหรับ 2 h นอกจากนี้ เอนไซม์ thermophilic ยังพบเสถียรภาพสูงกับอินทรีย์ได้แก่ acetonitrile หลาย 1,4 dioxane และเมทานอล มีเสถียรภาพสูงขึ้นจากความร้อนและอินทรีย์กว่าใด ๆ aldolase II เรียนที่อื่น ๆ aldolase FBP A. aeolicus เป็นเอนไซม์น่าสนใจสำหรับใช้เป็น biocatalyst แบบสำหรับงานอุตสาหกรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

aldolase -1,6 - bisphosphate (‐ FBP )
น้ำตาลฟรัค - โทซนามธรรมคือเอนไซม์ glycolytic catalyzes ปฏิกริยาที่กลั่นตัวเป็นหยดน้ำใส่ได้สองด้านของ‐ FBP ‐เพื่อ dihydroxyacetone ฟอสเฟต( dhap )และ glyceraldehyde - 3 - ฟอสเฟต( G 3 p ) aldolase ยีนจาก aeolicus aquifex overexpressed ซึ่งประกอบขึ้นด้วยส่วนที่เหมือนกันอยู่ในผลและบริสุทธิ์ถึง 95% subclonedเอนไซม์บริสุทธิ์ที่ถูกเปิดใช้งานโดยความเข้มข้นสูงของ NH 4 และความเข้มข้นต่ำของความร่วมมือ 2 น้ำหนักโมเลกุลพื้นเมืองของ aldolase ‐ FBP ‐บริสุทธิ์ก็ไม่สามารถระบุได้ว่า 67 kda ( dimer )โดยการกรอง chromatography เจล นิทรรศการเอนไซม์ที่ pH สูงสุดที่ 6.5 และ อุณหภูมิ ที่ 90 ° C ที่ใช้แสดงลักษณะดูแบบ Kinetic ที่กิโลเมตรที่จะคำนวณได้ 4.4 ± 0.07 มม.ในขณะที่ vmax เป็น 100 ± 0.02 μ m นาที 1 มก.โปรตีน 1 โปรตีน poxvaccine แสดงให้เห็นความมั่นคงความร้อนสูงไม่มีการสูญเสียการทำงานพบว่าแม้จะอยู่ที่ C 100 °สำหรับ 2 ชั่วโมง ในการเอนไซม์ thermophilic ที่ยังมีให้เห็นความมั่นคงสูงกับตัวทำละลายอินทรีย์หลากหลาย acetonitrile กล่าวคือ 1,4 - dioxane และโรงงานเมธานอลมีความมั่นคงสูงกับตัวทำละลายทั้งความร้อนและประกอบรัฐธรรมนูญว่าด้วยกว่าอื่นๆ Class II ใดๆ aldolase aldolase aeolicus ‐ FBP ‐ A ที่เป็นเอนไซม์ที่ดึงดูดใจสำหรับการใช้งานเป็น biocatalyst สำหรับใช้งานในอุตสาหกรรม