2. Materials andmethods2.1. Larval

2. Materials andmethods
2.1. Larval supply and rearing protocol
Beluga specimens used in the present study were obtained by
the hormonally-induced (LHRHa2) spawning of 2 females that were
fertilized with the milt of 3 males at the Shahid Marjani Sturgeon
Center (Gorgan, Iran). Eggs were incubated in Yushchenko incubators
at 11–12 °C in a closed freshwater recirculation system. After
eight days of incubation, hatching took place (hatching rate: 68%)
and 1800 newly hatched larvae (body weight, BW: 15.6 ± 0.7 mg;
total length, TL: 11.2 ± 0.4 mm) were placed in three 500 l circular
fiberglass tanks connected to a flow-through freshwater system.
Malformation rate at hatching (11.2 mm TL) was 6.1%. During the
larval rearing period, water temperature, dissolved oxygen, pH
and flow rate were 16.5 ± 0.2 °C, 10.7 ± 0.3 mg/l, 7.8 ± 0.1 and
5.7 ± 0.4 l/min, respectively. Larvaewere reared under natural photoperiod
(37°4′30.62″ N, 54°40′10.45″ E). All tank surfaces were
scrubbed and the bottom of the tank siphoned to remove uneaten
feed and feces 3 times a day.
The feeding protocol used for H. huso larval rearing fromhatching to
the juvenile stage is summarized in Fig. 1. In brief, larvae were fed by a
mixture of Artemia nauplii (EG, INVE, Belgium) and Daphnia sp. from12
to 25 dph (199.2–432.5 degree days post hatch, ddph) (500–800
nauplii/larvae/day). A short co-feeding phase based on Cladocerans
and a compound diet (BioMar, Denmark; D1—particle size = 0.5 mm)
was conducted from 25 to 30 dph (432.5–534 ddph), whereas from
this age onward, fish were fed only with the inert feed (BioMar,
Denmark; D2—particle size = 0.8 mm) at a feeding rate of 30 and
20% of stocked fish biomass respectively. The compound diet was
given to larvae from 4-6 times per day and feed ration and particle
size were progressively adjusted for fish size from 25 to 50 dph
(432.5–906.5 ddph).
Proximate composition (dry matter) of live prey (Artemia nauplii
and Daphnia sp.) was determined in 3 samples per type of live prey.
Crude protein was determined by the Kjeldahl method (N × 6.25)
using an automatic Kjeldahl system (Behrotest WD 40, Germany) and
crude fat content was determined by Soxhlet method (Folch et al.,
1957). Total protein and lipid content in Artemia were 65.6 ± 1.4%
and 15.1 ± 0.2%, respectively, whereas Daphnia sp. contained 52.6 ±
1.9% of proteins and 11.1 ± 0.1% of lipids. The proximate composition
of compound diets (D1 and D2) was 63 and 58% of total protein, 11
and 15% of total lipids, and 11.6 and 11.5% total carbohydrate respectively
(data provided by feed manufacturer).
2.2. Fish growth measurements and sampling schedule
In order to determine larval growth in weight (BW) and total length
(TL), fish (n = 40)were daily sampled randomly prior to feeding in the
morning using a pipette with a large opening from hatching to 18 dph
(306 ddph), whereas samples were collected every 2 days from 18 to
50 dph (306–906.5 ddph). Sampled larvae were sacrificed with an
overdose of tricaine methanosulphonate (MS-222, Sigma-Aldrich,
Fig. 1. Feeding protocol and larval growth in total length and wet weight in Beluga (Huso
huso) fromhatching until 50 dph (906.5 ddph). Symbols: ○, bodyweight; Δ, total length.
At each sampling point, data represent mean value and its respective standard deviation
calculated from 40 specimens

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุ andmethods2.1. larval ซัพพลายและการเพาะเลี้ยงโพรโทคอลปลาสเตอร์เจียนขาวไว้เป็นตัวอย่างใช้ในการศึกษาปัจจุบันได้รับโดยการเกิด hormonally (LHRHa2) วางไข่ของหญิง 2 ที่มีปฏิสนธิกับ milt ของชาย 3 ที่ปลาสเตอร์เจียน Marjani หิทศูนย์ (อาวาร์ อิหร่าน) ไข่ถูก incubated ใน Yushchenko ผลิตและที่ 11 – 12 ° C ในระบบปิดปลา recirculation หลังจากวันที่แปดของคณะทันตแพทยศาสตร์ ฟักไข่เกิดขึ้น (อัตราฟักไข่: 68%)และ 1800 เพิ่งฟักตัวอ่อน (ตัวน้ำหนัก BW: ไม่เกิน 15.6 ± 0.7 มก.รวมความยาว TL: 11.2 ± 0.4 mm) ไว้ในวง 500 l 3ถังไฟเบอร์เชื่อมต่อการไหลผ่านน้ำจืดระบบอัตรา malformation ที่ฟัก (11.2 mm TL) เป็น 6.1% ในระหว่างการเพาะเลี้ยงระยะเวลา อุณหภูมิน้ำ ส่วนยุบ larval ออกซิเจน ค่า pHและอัตราการไหล 16.5 ± 0.2 ° C, 10.7 ± 7.8 ± 0.1, 0.3 mg/l และ5.7 ± 0.4 l/min ตามลำดับ Larvaewere ผลิตภัณฑ์ภายใต้ช่วงแสงธรรมชาติ(37 ° 4′30 62″ N, 54 ° 40′10. 45″ อี) พื้นผิวของถังทั้งหมดได้scrubbed และด้านล่างของถัง siphoned เอา uneatenอาหารและอุจจาระวันละ 3 ครั้งโพรโทคอลอาหารใช้สำหรับ H. huso larval แม่ fromhatching ไปเวทีเยาวชนสรุปใน Fig. 1 สังเขป ตัวอ่อนถูกเลี้ยงโดยการส่วนผสมของ Artemia nauplii (EG, INVE เบลเยียม) และ Daphnia sp. from12การดีพีเอช 25 (ปริญญา 199.2 – 432.5 วันไปรษณีย์แฮทช์ ddph) (500-800nauplii/ตัว อ่อน/วัน) ระยะร่วมอาหารสั้นตาม Cladoceransและอาหารผสม (BioMar เดนมาร์ก ล่าสุดโดย — ขนาดอนุภาค = 0.5 mm)ได้ดำเนินการจาก 25 ไป 30 ดีพีเอช (432.5 – 534 ddph), ในขณะที่จากยุคนี้เป็นต้นไป ปลาถูกเลี้ยง ด้วยอาหาร inert (BioMarเดนมาร์ก D2 คือขนาดอนุภาค = 0.8 mm) ราคาอาหาร 30 และ20% ของเก็บปลาชีวมวลตามลำดับ อาหารผสมให้ตัวอ่อนจาก 4 - 6 ครั้งต่อวัน และอาหารอาหารและอนุภาคขนาดมีความก้าวหน้าปรับขนาดปลา 25 50 ดีพีเอช(432.5 – 906.5 ddph)องค์ประกอบ (เรื่องแห้ง) เคียงของเหยื่อสด (Artemia naupliiและ Daphnia sp) กำหนดใน 3 ตัวอย่างต่อชนิดของเหยื่อสดกำหนดน้ำมันโปรตีน ด้วยวิธี Kjeldahl (N × 6.25)ใช้ระบบ Kjeldahl การอัตโนมัติ (Behrotest WD 40 เยอรมนี) และไขมันน้ำมันถูกกำหนด โดยวิธี Soxhlet (Folch et al.,1957) รวมเนื้อหาโปรตีนและไขมันใน Artemia 65.6 ± 1.4%15.1 ± 0.2% ตามลำดับ ในขณะที่ Daphnia sp.อยู่ 52.6 ±1.9% ของโปรตีนและ 11.1 ± 0.1% ของโครงการ องค์ประกอบเคียงของผสมอาหาร (ง 1 และ D2) ถูก 63 และ 58% ของโปรตีนทั้งหมด 11และ 15% ของโครงการทั้งหมด และ 11.6 และ 11.5% รวมคาร์โบไฮเดรตตามลำดับ(ข้อมูลสำหรับผู้ผลิตอาหารสัตว์)2.2 การวัดการเจริญเติบโตและกำหนดการสุ่มตัวอย่างปลาเพื่อกำหนดเติบโต larval น้ำหนัก (BW) และความยาวรวม(TL), ปลา (n = 40) มีความทุกวันสุ่มก่อนการให้อาหารในการตอนเช้าใช้เปตต์แบบเปิดขนาดใหญ่จากฟักไข่ให้ 18 ดีพีเอช(306 ddph), ในขณะที่ตัวอย่างถูกเก็บทุก 2 วันจาก 18 ไป50 ดีพีเอช (306-906.5 ddph) ตัวอย่างตัวอ่อนได้เสียสละด้วยการใช้ยาเกินขนาดของ tricaine methanosulphonate (MS-222 ซิก-AldrichFig. 1 อาหารโพรโทคอลและเติบโต larval ยาวรวมและปลาสเตอร์เจียนขาว (Huso น้ำหนักเปียกfromhatching huso) จนถึง 50 ดีพีเอช (906.5 ddph) สัญลักษณ์: ○ bodyweight Δยอด ความยาวทั้งหมดในแต่ละจุดเก็บตัวอย่าง ข้อมูลแสดงค่าเฉลี่ยและส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของแต่ละคำนวณไว้เป็นตัวอย่างที่ 40

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุ andmethods
2.1 การจัดหาและการเลี้ยงตัวอ่อนโปรโตคอล
ตัวอย่าง Beluga ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้จากการ
เหนี่ยวนำให้เกิดฮอร์โมน (LHRHa2) วางไข่ของ 2 หญิงที่ได้รับการ
ปฏิสนธิกับน้ำเชื้อของเพศที่ 3 Shahid Marjani ปลาสเตอร์เจียน
เซ็นเตอร์ (Gorgan อิหร่าน) ไข่ถูกบ่มในตู้อบหลักปฏิบัติ
ที่ 11-12 ° C ในระบบหมุนเวียนน้ำจืดปิด หลังจาก
แปดวันของการบ่มฟักเกิดขึ้น (อัตราการฟัก: 68%)
และ 1,800 ตัวอ่อนที่เพิ่งฟัก (น้ำหนักตัว BW: 15.6 ± 0.7 มิลลิกรัม
ยาวทั้งหมด, TL: 11.2 ± 0.4 มม) อยู่ในสาม l 500 วงกลม
ไฟเบอร์กลาส รถถังที่เชื่อมต่อกับระบบน้ำจืดที่ไหลผ่าน.
อัตราจุกที่ฟัก (11.2 มม TL) เป็น 6.1% ในช่วง
ระยะเวลาการเลี้ยงตัวอ่อนอุณหภูมิของน้ำ, ปริมาณออกซิเจนละลายน้ำมีค่า pH
และอัตราการไหลอยู่ที่ 16.5 ± 0.2 ° C, 10.7 ± 0.3 มิลลิกรัม / ลิตร, 7.8 ± 0.1 และ
5.7 ± 0.4 ลิตร / นาทีตามลำดับ Larvaewere เลี้ยงภายใต้แสงธรรมชาติ
(37 ° 4'30.62 "N, 54 ° 40'10.45" E) พื้นผิวถังทั้งหมดถูก
ขัดและด้านล่างของถังดูดเพื่อลบกะหรี่
อาหารสัตว์และอุจจาระวันละ 3 ครั้ง.
โปรโตคอลที่ใช้สำหรับการให้อาหารเอชกระดูกแข็งอนุบาล fromhatching เพื่อ
เวทีเด็กและเยาวชนได้สรุปไว้ในรูป 1. ในช่วงสั้น ๆ ตัวอ่อนได้รับการเลี้ยงดูโดย
ส่วนผสมของอาร์ทีเมีย (เช่น INVE, เบลเยียม) และไรน้ำ from12
ถึง 25 DPH (199.2-432.5 องศาวันที่โพสต์ฟัก ddph) (500-800
อาร์ที / ลูกน้ำ / วัน) ขั้นตอนการร่วมให้อาหารระยะสั้นขึ้นอยู่กับไรแดง
และอาหารผสม (BIOMAR, เดนมาร์กขนาด D1-อนุภาค = 0.5 มม)
ได้ดำเนินการ 25-30 DPH (432.5-534 ddph) ในขณะที่จาก
วัยนี้เป็นต้นไปปลาเป็นอาหารเท่านั้น กับฟีดเฉื่อย (BIOMAR,
เดนมาร์กขนาด D2-อนุภาค = 0.8 มิลลิเมตร) อัตราการเลี้ยงลูกด้วยนม 30 และ
20% ของชีวมวลปลา stocked ตามลำดับ อาหารสารประกอบถูก
มอบให้กับตัวอ่อน 4-6 ครั้งต่อวันและสูตรอาหารและอนุภาค
ขนาดมีการปรับก้าวหน้าขนาดปลา 25-50 DPH
(432.5-906.5 ddph).
วิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมี (แห้ง) ของเหยื่อสด (อาร์ทีเมีย
และไรน้ำ.) ได้กำหนดใน 3 ตัวอย่างต่อประเภทของเหยื่อสด.
โปรตีนถูกกำหนดโดยวิธี Kjeldahl (ยังไม่มี× 6.25)
โดยใช้ระบบ Kjeldahl อัตโนมัติ (Behrotest WD 40, เยอรมนี) และ
ปริมาณไขมันดิบถูกกำหนดโดยวิธีการวิธีการสกัดแบบ (Folch et al.,
1957) โปรตีนรวมและไขมันในอาร์ทีเมีย 65.6 ± 1.4%
และ 15.1 ± 0.2% ตามลำดับในขณะที่ไรน้ำ มีอยู่ 52.6 ±
1.9% ของโปรตีนและ 11.1 ± 0.1% ของไขมัน องค์ประกอบใกล้เคียง
ของอาหารผสม (D1 และ D2) เป็น 63 และ 58% ของโปรตีนทั้งหมด, 11
และ 15% ของไขมันทั้งหมดและ 11.6 และ 11.5% คาร์โบไฮเดรตรวมตามลำดับ
(ข้อมูลจาก บริษัท ผู้ผลิตอาหารสัตว์).
2.2 การวัดการเจริญเติบโตของปลาและกำหนดเวลาการเก็บตัวอย่าง
เพื่อตรวจสอบการเจริญเติบโตของตัวอ่อนในน้ำหนัก (BW) และความยาวทั้งหมด
(TL) ปลา (n = 40) ได้รับการสุ่มเก็บตัวอย่างทุกวันก่อนที่จะมีการให้อาหารใน
ช่วงเช้าโดยใช้ปิเปตด้วยการเปิดขนาดใหญ่จากการฟักไข่ 18 DPH
(306 ddph) ในขณะที่กลุ่มตัวอย่างที่ถูกเก็บรวบรวมทุก 2 วันจาก 18 ถึง
50 DPH (306-906.5 ddph) ตัวอ่อนตัวอย่างถูกเสียสละกับ
ยาเกินขนาดของ tricaine methanosulphonate (MS-222, Sigma-Aldrich,
รูป. 1. โปรโตคอลการให้อาหารและการเจริญเติบโตของตัวอ่อนในความยาวทั้งหมดและน้ำหนักเปียกใน Beluga (Huso
huso) fromhatching จนถึง 50 DPH (906.5 ddph). สัญลักษณ์ :. ○, น้ำหนัก; Δ, ความยาวรวม
ณ จุดสุ่มตัวอย่างแต่ละข้อมูลที่แสดงค่าเฉลี่ยและค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานของแต่ละ
คำนวณจาก 40 ตัวอย่าง