TAF10, UBC6 and TCF1 (Teste, Duquen

TAF10, UBC6 and TCF1 (Teste, Duquenne, Francois, & Parrou, 2009)
genes were used as references in gene expression analysis (Table S1
and Fig. S1, Supplementary data). Some primers were designed
according to Saerens et al. (Saerens, Verbelen, Vanbeneden,
Thevelein, & Delvaux, 2008a) and Vidal et al. (Vidal et al., 2013).
The primers are available upon request. mRNA quantification was
conducted using SYBR Green PCR Master Mix kit (Peqlab Biotechnologie
GmbH, Erlangen, Germany) in the LightCycler 480
(Roche Diagnostics, Mannheim, Germany), according to the manufacturer's
instructions. The following conditions were used for the
amplification: initial denaturation for 60 s at 95 C, amplification by
45 cycles of 10 s at 95 C, 25 s at the optimal annealing temperature
for each primer pair and 10 s at 72 C elongation temperature. For
the relative quantification of gene expression, the 2DDCt method
(Livak & Schmittgen, 2001) was used. The values represent the
average of three independent replicates. The results were statistically
evaluated using one-way ANOVA (p < 0.05) followed by
Tukey's test.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

TAF10, UBC6 และ TCF1 (Teste, Duquenne, Francois, & Parrou, 2009)ยีนที่ถูกใช้เป็นการอ้างอิงในการวิเคราะห์การแสดงออกของยีน (ตาราง S1และมะเดื่อ S1 ข้อมูลเสริม) ออกแบบไพรเมอร์บางตาม Saerens et al. (Saerens, Verbelen, VanbenedenThevelein, & Delvaux, 2008a) และ Vidal ร้อยเอ็ด (Vidal et al. 2013)ไพรเมอร์ที่เมื่อแจ้งความประสงค์ mRNA นับถูกดำเนินการโดยใช้ชุด SYBR Green PCR หลักผสม (Peqlab BiotechnologieGmbH แอร์ลานเกน เยอรมนี) ใน LightCycler 480(โรชวินิจฉัย มานไฮม์ เยอรมนี), ตามของผู้ผลิตคำแนะนำ เงื่อนไขต่อไปนี้ใช้สำหรับการขยาย: denaturation เริ่มต้น 60 s ที่ C 95 ขยายโดยรอบ 45 10 s ที่ 95 C, 25 s ที่อุณหภูมิหลอมที่ดีที่สุดสำหรับแต่ละคู่ไพรเมอร์และ 10 s ที่อุณหภูมิ 72 C ยืด สำหรับด้านญาติของยีน การ DDCt 2(Livak & Schmittgen, 2001) ใช้งาน แสดงค่าการค่าเฉลี่ยของสามเหมือนอิสระ ผลได้ทางสถิติถูกประเมินโดยใช้ทางเดียว ANOVA (p < 0.05) ตามด้วยการทดสอบของ Tukey

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

TAF10, UBC6 และ TCF1 (Teste, Duquenne ฟรองซัวและ Parrou 2009)
ยีนถูกนำมาใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงในการวิเคราะห์การแสดงออกของยีน (ตาราง S1
และรูป. S1 ข้อมูลเสริม) ไพรเมอร์บางคนได้รับการออกแบบ
ตาม Saerens et al, (Saerens, Verbelen, Vanbeneden,
Thevelein และ Delvaux, 2008a) และวิดัล, et al (Vidal et al., 2013).
ไพรเมอร์ที่มีอยู่เมื่อมีการร้องขอ ปริมาณ mRNA ถูก
ดำเนินการโดยใช้ชุดสีเขียว SYBR PCR โท Mix (Peqlab Biotechnologie
GmbH, Erlangen, เยอรมนี) ใน LightCycler 480
(การวินิจฉัยโรชไฮม์เยอรมนี) ตามที่ผู้ผลิต
คำแนะนำ เงื่อนไขต่อไปนี้ถูกนำมาใช้สำหรับ
การขยาย: denaturation เริ่มต้น 60 s ที่ 95 C, เครื่องขยายเสียงด้วย?
45 รอบของ 10 วินาทีที่ 95 C, 25 S ที่อุณหภูมิการหลอมที่ดีที่สุด?
สำหรับแต่ละคู่ไพรเมอร์และ 10 วินาทีที่ 72 C การยืดตัว? อุณหภูมิ. สำหรับ
ปริมาณสัมพัทธ์ของการแสดงออกของยีนที่ 2? DDCt วิธี
(Livak & Schmittgen, 2001) ถูกนำมาใช้ ค่าที่เป็นตัวแทนของ
ค่าเฉลี่ยของสามซ้ำอิสระ ผลการวิจัยสถิติ
การประเมินโดยใช้ทางเดียว ANOVA (p <0.05) ตามด้วย
การทดสอบของ Tukey

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

taf10 ubc6 ( การทดสอบ , และ , tcf1 duquenne , ฟรองซัว และ parrou 2009 )ยีนที่ถูกใช้เป็นแหล่งอ้างอิงในการวิเคราะห์การแสดงออกของยีน ( ตาราง S1และมะเดื่อ S1 , ข้อมูลเพิ่มเติม ) บางชนิดถูกออกแบบมาตาม saerens et al . ( saerens vanbeneden เวอร์เบเลน , , ,thevelein & เดลโว 2008a ) และ วิดัล , et al . ( Vidal et al . , 2013 )ด้วยเมื่อมีการร้องขอ mRNA ปริมาณคือการใช้ดีเอ็นเอต้นแบบสีเขียว SYBR ผสมชุด ( peqlab biotechnologieGmbH , เพิร์ท , เยอรมัน ) ใน lightcycler 480( โรชวินิจฉัย Mannheim , เยอรมัน ) , ตาม ของผู้ผลิตคําแนะนํา เงื่อนไขต่อไปนี้ใช้สำหรับ( ( เริ่มต้น : 60 S 95 C ( โดย45 รอบ 10 s 95 C 25 S ที่เหมาะสมอุณหภูมิการอบอ่อนรองพื้นสำหรับแต่ละคู่ และ 10 เปอร์เซ็นต์ที่อุณหภูมิ 72 องศาเซลเซียส . สำหรับส่วนปริมาณสัมพัทธ์ของการแสดงออกของยีน , 2ddct วิธี( livak & schmittgen , 2544 ) คือใช้ ค่าที่เป็นตัวแทนเฉลี่ยสามแบบอิสระ ผลการวิจัยพบว่าการประเมินโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว ( p < 0.05 ) ตามด้วยทดสอบทดสอบ