Materials and methods Plant materia

Materials and methods Plant material and callus induction Mature dry seeds of lemon basil ( O. × citriodorum ) were purchased from Chia Tai Seed Co., LTD., Bangkok, Thailand. Those seeds were soaked with distilled water for 30 min and surface–sterilized with 15% (v/v) Clorox (a commercial bleach solution containing 5.25%, w/w, sodium hypochlorite as available chlorine) and 3–4 drops of Tween 20 for 15 min, followed by rinsing 5 min each in sterile distilled water 3 times. Afterward, surface– disinfected seeds were then placed on plant growth regulator–free MS medium [14] [5 seeds per jar (4.5 cm X 8.5 cm)] and incubated for 5 weeks in a growth room under 16 h light condition (daylight fluorescent lamps: 19.39 μmol/m2/s) and 8 h of darkness at 25±2 oC. To induce callus, leaves of 5-week-old seedlings were excised each 0.8 cm X 0.8 cm and transferred to MS basal medium containing 0, 0.25, 0.5 and 1 mg/l 2,4-D (4.0 cm X 6.5 cm container) and kept in the same growth room for 4 weeks. All media were adjusted to pH 5.7, gelled with 0.8% (w/v) agar, and autoclaved at 121 °C and 15 psi for 20 minutes. Callus fresh weight and characteristic were observed during the induction period.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีพืชวัสดุและให้เหนี่ยวนำสุกแห้งเมล็ดของแมงลัก (โอ× citriodorum) ซื้อจากเมล็ด Chia Tai Co., LTD. กรุงเทพ ประเทศไทย เมล็ดพันธุ์เหล่านั้นถูก soaked ด้วยน้ำกลั่นใน 30 นาที และผิว – sterilized 15% (v/v) Clorox การ (พาณิชย์การฟอกสีโซลูชันมี 5.25%, w/w ฟอกเป็นคลอรีนว่าง) และ 3-4 หยด Tween 20 สำหรับ 15 นาที ตาม ด้วยล้าง 5 นาทีแต่ละในน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ 3 ครั้ง หลัง ผิว – เมล็ดฆ่าเชื้อแล้วใส่ในโรงงานควบคุมฟรี MS เชื้อ [14] [5 เมล็ดต่อขวด (4.5 ซม. X 8.5 ซม.)] และ incubated สำหรับสภาพแสงที่ต่ำกว่า 16 h ห้อง 5 สัปดาห์ในการเจริญเติบโต (ตามฤดูกาลของหลอดฟลูออเรสเซนต์: 19.39 μmol/m2/s) และ h 8 แห่งความมืดที่ 25±2 oC. เพื่อก่อให้เกิดแคลลัส ใบของกล้าไม้อายุ 5 สัปดาห์มี excised ละ 0.8 ซม. X 0.8 ซม และโอนย้ายไป MS โรคปานกลางมี 0, 0.25, 0.5 และ 1 mg/l 2, 4-D (4.0 ซม. X 6.5 ซม.ภาชนะ) และเก็บพัก 4 สัปดาห์การเจริญเติบโต สื่อทั้งหมดถูกปรับให้ค่า pH 5.7, gelled กับ agar 0.8% (w/v) และ autoclaved ที่ 121 ° C และ 15 psi 20 นาที ให้น้ำหนักสดและลักษณะที่สังเกตระยะเหนี่ยวนำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการวัสดุอาคารและการชักนำแคลลัสผู้ใหญ่เมล็ดแห้งของใบโหระพามะนาว (ทุม× citriodorum) ที่ซื้อมาจาก Chia Tai Seed Co. , LTD., Bangkok, Thailand เมล็ดพันธุ์เหล่านั้นถูกแช่ด้วยน้ำกลั่นนาน 30 นาทีและพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อด้วย 15% (v / v) Clorox (สารฟอกขาวในเชิงพาณิชย์ที่มี 5.25% w / W, โซเดียมไฮโปคลอไรต์คลอรีนมี) และ 3-4 หยด Tween 20 15 นาทีตามด้วยการล้าง 5 นาทีในแต่ละน้ำกลั่นปลอดเชื้อ 3 ครั้ง หลังจากนั้น surface- ฆ่าเชื้อเมล็ดถูกวางไว้แล้วบนอาหารสูตร MS ที่ regulator ฟรีเจริญเติบโตของพืช [14] [5 เมล็ดต่อขวด (4.5 ซม. x 8.5 ซม.)] และบ่มเป็นเวลา 5 สัปดาห์ในห้องพักการเจริญเติบโตต่ำกว่า 16 ชั่วโมงสภาพแสง (เรืองแสงในเวลากลางวัน หลอดไฟ: 19.39 ไมโครโมล / m2 / s) และ 8 ชั่วโมงแห่งความมืดที่อุณหภูมิ 25 ± 2 องศาเซลเซียส เพื่อก่อให้เกิดแคลลัส, ใบของต้นกล้า 5 สัปดาห์เก่าถูกตัดแต่ละ 0.8 ซม. X 0.8 ซม. และโอนไปยังสูตร MS พื้นฐานที่มี 0, 0.25, 0.5 และ 1 มิลลิกรัม / ลิตร 2,4-D (4.0 ซม. x 6.5 ซม. ภาชนะ) และเก็บไว้ในห้องพักการเจริญเติบโตเหมือนกันเป็นเวลา 4 สัปดาห์ สื่อทั้งหมดจะถูกปรับค่า pH 5.7, กาวกับ 0.8% (w / v) วุ้นและนึ่งฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียสและ 15 ปอนด์ต่อตารางนิ้วเป็นเวลา 20 นาที แคลลัสน้ำหนักสดและลักษณะถูกตั้งข้อสังเกตในช่วงเวลาเหนี่ยวนำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ และวัสดุพืชแห้งชักนำผู้ใหญ่เมล็ดแมงลัก ( O . × citriodorum ) ซื้อจากเจียไต๋เมล็ดพันธุ์ จำกัด กรุงเทพมหานคร ประเทศไทย เมล็ดที่แช่ด้วยน้ำประมาณ 30 นาที และพื้นผิว และฆ่าเชื้อด้วย 15 % ( v / v ) คลอรอกซ์ ( เทพมรณะพาณิชย์โซลูชั่นที่มี 5.25 % w / w ,โซเดียมไฮโปคลอไรต์เป็นคลอรีนสามารถใช้ได้ ) และ 3 - 4 หยด Tween 20 15 นาที ตามด้วยการล้าง 5 นาทีในแต่ละงานน้ำกลั่น 3 ครั้ง หลังจากนั้น ผิวและฆ่าเชื้อเมล็ดแล้ววางไว้บนสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืช และนางสาวฟรี ) [ 14 ] [ 5 เม็ดต่อกระปุก ( 4.5 ซม. x 8.5 ซม. ) ] และบ่มเป็นเวลา 5 สัปดาห์ในห้องการเจริญเติบโตภายใต้สภาพแสง 16 ชั่วโมง ( กลางวันหลอด : 1939 μโมล / ตารางเมตร / s ) และ 8 ชั่วโมงแห่งความมืดที่ 25 ± 2 องศาเซลเซียส ชักนำแคลลัส ใบของต้นกล้า คือ 5-week-old เฉลี่ย 0.8 x 0.8 ซม. แต่ละและโอนไปยัง MS แรกเริ่ม BAP ความเข้มข้น 0 , 0.25 , 0.5 และ 1 มิลลิกรัมต่อลิตรที่เติม 2 , 4-D ( 4.0 ซม. x 6.5 ซม. บรรจุ ) และเก็บไว้ในห้องพักของเดียวกัน เป็นเวลา 4 สัปดาห์ สื่อทั้งหมดเพื่อปรับพีเอช 5.7 เจล 0.8 % ( w / v ) วุ้น และสังเคราะห์ที่ 121 ° C และ 15 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว เป็นเวลา 20 นาทีน้ำหนักสดแคลลัสและลักษณะที่พบในช่วง induction