PKC protein was hydrolyzed separately by mixing 0.65 g of protein
with each of the following enzymes at a ratio of 50:1 (w/w)
in 35 mL of 50 mM respective buffer solution under defined conditions:
papain (phosphate buffer, pH 6.5, 65 ◦C), alcalase (phosphate
buffer, pH 7.5, 55 ◦C), pepsin (KCl–HCl buffer, pH 1.5, 37 ◦C), trypsin
(Tris–HCl buffer, pH 8, 37 ◦C), flavourzyme (Tris–HCl buffer, pH 8,
55 ◦C), bromelain (acetate buffer, pH 5, 55 ◦C), and chymotrypsin
(phosphate buffer, pH 6.8, 50 ◦C). After mixing, each solution was higher degree of hydrolysis. The hydrolysis was stopped by heating
the mixture in boiling water (100 ◦C) for 10 min to inactivate
the protease. The supernatant was collected after centrifugation
(10,000 × g, 10 min), and used for ACE-inhibitory activity evaluation.
incubated in a water bath shaker at an agitation rate of 150 rpm
under the optimal hydrolysis conditions for each protease. The
enzyme was added again to the hydrolysis mixture at every 6 h
intervals at enzyme – substrate ratio of 1:50 to reach to the
PKC โปรตีนถูก hydrolyzed แยกผสม 0.65 กรัมของโปรตีนแต่ละเอนไซม์ต่อไปในอัตราส่วน 50:1 (w/w)ใน 35 มิลลิลิตรของสารละลายบัฟเฟอร์ที่เกี่ยวข้อง 50 มม.ภายใต้เงื่อนไขที่กำหนดไว้:พาเพอิน (ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ค่า pH 6.5, 65 ◦C), alcalase (ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.5, 55 ◦C), เพพซิน (บัฟเฟอร์ KCl – HCl ค่า pH 1.5, 37 ◦C), ทริปซิน(ทริ – HCl บัฟเฟอร์ ค่า pH 8, 37 ◦C), flavourzyme (ทริ – HCl บัฟเฟอร์ pH 855 ◦C), bromelain (อะซิเตบัฟเฟอร์ ค่า pH 5, 55 ◦C), และ chymotrypsin(ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ค่า pH 6.8, 50 ◦C) หลังจากผสม ละโซลูชันเป็นระดับสูงสลาย สลายตัวหยุดลง โดยเครื่องทำความร้อนส่วนผสมในน้ำ (100 ◦C) เพื่อปิดการทำงาน 10 นาทีเดือดรติเอส Supernatant รวบรวมหลังจากการหมุนเหวี่ยง(10,000 × g, 10 นาที), และใช้การประเมินผลกิจกรรม inhibitory เอได้รับการกกในการปั่นอาบน้ำที่มีอัตราการกวน 150 รอบต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมย่อยสำหรับรติเอสแต่ละ การเอนไซม์เพิ่มอีกส่วนย่อยที่ทุก 6 ชมช่วงที่เอนไซม์ – พื้นผิวอัตราส่วน 1:50 ถึง
การแปล กรุณารอสักครู่..

PKC โปรตีนไฮโดรไลซ์แยกโดยการผสม 0.65 กรัมของโปรตีน
กับแต่ละของเอนไซม์ดังต่อไปนี้ในอัตราส่วน 50: 1 (w / w)
ใน 35 มิลลิลิตรขนาด 50 มมวิธีการแก้ปัญหาที่เกี่ยวข้องบัฟเฟอร์ภายใต้เงื่อนไขที่กำหนดไว้:
ปาเปน (ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 6.5 65 ◦C), อัลคาเล (ฟอสเฟต
บัฟเฟอร์พีเอช 7.5, 55 ◦C) เปปซิน (KCl-HCl บัฟเฟอร์พีเอช 1.5, 37 ◦C) trypsin
(บัฟเฟอร์ Tris-HCl ค่า pH 8, 37 ◦C) flavourzyme ( บัฟเฟอร์ Tris-HCl ค่า pH 8,
55 ◦C) Bromelain (บัฟเฟอร์อะซิเตท, พีเอช 5, 55 ◦C) และ chymotrypsin
(ฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 6.8, 50 ◦C) หลังจากผสม, การแก้ปัญหาแต่ละระดับสูงของการย่อยสลาย การย่อยก็หยุดด้วยความร้อน
ผสมในน้ำเดือด (100 ◦C) เป็นเวลา 10 นาทีเพื่อยับยั้ง
น้ำย่อย ใสถูกเก็บรวบรวมหลังจากการหมุนเหวี่ยง
(10,000 × G, 10 นาที) และใช้สำหรับ ACE-ยับยั้งการประเมินผลกิจกรรม.
บ่มในเครื่องปั่นอ่างน้ำที่อัตราการกวน 150 รอบต่อนาที
ภายใต้เงื่อนไขการย่อยสลายที่ดีที่สุดสำหรับแต่ละน้ำย่อย
เอนไซม์ถูกเพิ่มเข้ามาอีกครั้งเพื่อย่อยสลายสารผสมในทุก 6 ชั่วโมง
ในช่วงเวลาที่เอนไซม์ - สารตั้งต้นอัตราส่วน 1:50 ในการเข้าถึงไปยัง
การแปล กรุณารอสักครู่..

โปรตีนไฮโดรไลซ์ จำกัด คือ แยก โดยผสม 0.65 กรัมโปรตีนกับแต่ละของเอนไซม์ในอัตราส่วน 50 : 1 ต่อไปนี้ ( w / w )ใน 35 ml 50 มม. ตามลำดับสารละลายบัฟเฟอร์ภายใต้เงื่อนไขที่กําหนด :เอนไซม์ปาเปน ( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.5 , 65 ◦วัตถุดิบ ( C ) , ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ พีเอช 7.5 , 55 ◦ C ) , เตยหอม ( KCL ) HCl บัฟเฟอร์ pH 1.5 , 37 ◦ C ) , ซิน( บริษัท ) HCl บัฟเฟอร์ pH 8 , 37 ◦ C ) flavourzyme ( ทริส– HCl บัฟเฟอร์ pH 855 ◦ C ) , เอนไซม์ ( อะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 5 55 ◦ C ) และไคโมทริปซิน( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 6.8 , 50 ◦ C ) หลังจากผสมแต่ละโซลูชั่นสูงกว่าระดับของการย่อยสลาย . การย่อยสลายถูกหยุดโดยความร้อนส่วนผสมในการต้มน้ำ ( 100 ◦ C ) เป็นเวลา 10 นาทีเพื่อยับยั้งส่วนโปรติเอส ที่นำเก็บข้อมูลหลังการปั่นเหวี่ยง( 10 ×กรัม , 10 นาที ) , และใช้ ACE ยับยั้งกิจกรรมการประเมินผลบ่มในน้ำร้อน Shaker ที่อัตราการกวน 150 รอบต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมสำหรับแต่ละเอนไซม์โปรติเอส ที่เอนไซม์เพิ่มอีกครั้งเพื่อการย่อยสลายผสมทุก 6 ชม.ช่วงเวลาที่ผสมเอนไซม์ ) อัตราส่วน 1 : 50 ไปถึง
การแปล กรุณารอสักครู่..
