2. Materials and methods2.1. Ground

2. Materials and methods
2.1. Ground chicken
Ground chicken (ca. 95% lean, 5% fat content) purchased at a
local wholesaler (Lansdale, PA) was delivered to lab in a cooler and
evenly portioned into 90 g samples in polynylon pouches (Uline,
Inc., Philadelphia, PA), vacuum sealed to 50 milibars a Multi-Vac
A300 packager (Multi-Vac Inc., Kansas City, MO) and then frozen
(20
C). The ground chicken was later gamma irradiated (Cs-137,
0.070 kGy/min, 20
C, Lockheed Georgia, Marietta, GA) to a dose
of ca. 5 kGy which inactivated any contaminating Salmonella
(Tamplin, Paoli, & Marmer, 2005) in survival study. The irradiated
and non-irradiated ground chicken under HPP stress showed
similar lethality in conditions tested, e.g. the plate count difference
was non-significant (P > 0.05). The ground chicken was then
maintained at 20
C. Ground chicken was thawed overnight in a
refrigerator (4
C) prior to use in experiments.
2.2. Salmonella spp. cultures and preparation
Five Salmonella strains (i.e. S. typhimurium, DT 104; S. Newport,
ATCC 6962; S. enterititis, ATCC 13076; S. Senftenberg, ATCC 8400;
and S. Kentucky, FSIS 074) were obtained from the culture collection
of the Eastern Regional Research Center (ERRC), Agricultural
Research Service (ARS), United States Department of Agriculture
(USDA) located in Wyndmoor, PA. Each Salmonella isolate was
plated onto XLT-4 agar (SMAC, BD/Difco, Sparks, MD, U.S.A.) and
stored at 8
C. Twenty-four hours before the experiment a loopful
of each strain was individually transferred to 10 ml Tryptic Soy
Broth (TSB broth, BD/Difco) and held at 37
C in an orbital shaker
(New Brunswick Scientific, Model G34, Edison, NJ) at 150 rpm for
approximately 20 h. Each culture was then harvested by centrifugation
(2400  g for 15 min at 4
C) in a Hermle Labnet Model Z-
206A (Hermle Labortechnik, Germany), and re-suspended in 20 ml
0.1% peptone water (PW, BD/Difco). After that 5 ml of each culture
was combined in one tube to make a cocktail.
A working cocktail was formed by combining and mixing the
five individual washed bacterial cultures. Every culture contained a
cell population of ca. 1089 CFU/ml. Fresh cultures were prepared
for each experiment. Thawed ground chicken (5 g) was aliquoted
into 2oz Whirl-Pak bags (Nasco Co, Ft. Atkinson, WI), inoculated
with 0.1 ml of the cocktail, mixed manually for 30 s, and then sealed
using the Multi-Vac A300 Packager. Samples receiving the same
treatment were then sealed in a polynylon bag (Uline, Inc., Philadelphia,
PA) as a secondary barrier prior to HPP treatment to prevent
any leak. The samples were stored at 4
C and ready for HPP
treatment.
2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 ไก่สับไก่ (ca. 95% แบบ lean, 5% ไขมัน) ซื้อที่ดินเป็นเจ้าถิ่น (Lansdale, PA) ถูกส่งไปห้องปฏิบัติการความเย็น และเท่า ๆ กันตามที่เป็นตัวอย่าง 90 กรัมในกระเป๋า polynylon (Ulineอิงค์ ฟิลาเดลเฟีย PA), เครื่องบรรจุปิดผนึก 50 milibars Vac หลายA300 ห่อ (Vac หลาย Inc. แคนซัสซิตี้ MO) และแช่แข็งแล้ว(20 C) ไก่สับถูกหลังแกมมา irradiated (Cs-1370.070 kGy/min, 20 C ล็อกฮีดจอร์เจีย นมารีเอต GA) กับปริมาณของ ca 5 kGy ซึ่งยกเลิกใด ๆ ขยะระดับ(Tamplin, Paoli, & Marmer, 2005) ในการศึกษาการอยู่รอด การ irradiatedและแสดงให้เห็นพื้นดินไม่ใช่ irradiated ไก่ภายใต้ความเครียด HPPlethality คล้ายในเงื่อนไขทดสอบ เช่นจานจำนวนความแตกต่างถูกไม่อย่างมีนัยสำคัญ (P > 0.05) ไก่สับได้แล้วยังคงอยู่ที่ 20 C. ล่างไก่เป็น thawed ค้างคืนในตู้เย็น (4 C) ก่อนที่จะใช้ในการทดลอง2.2 ระดับโอวัฒนธรรมและการเตรียมสาย 5 สายพันธุ์ (เช่น S. typhimurium, DT 104 S. นิวพอร์ทATCC 6962 S. enterititis, ATCC 13076 S. Senftenberg, ATCC 8400และ s ได้ เคนทักกี FSIS 074) ได้รับมาจากการรวบรวมวัฒนธรรมของตะวันออกภูมิภาคศูนย์วิจัย (ERRC), เกษตรวิจัยบริการ (อาอาร์ส), กรมวิชาการเกษตรสหรัฐอเมริกา(จาก) ตั้งอยู่ใน Wyndmoor, PA. แต่ละระดับแยกเป็นชุบลง XLT 4 agar (SMAC, BD/Difco สปาร์ค MD สหรัฐอเมริกา) และเก็บที่ 8 C. ยี่สิบสี่ชั่วโมงก่อนการทดลองแบบ loopfulของต้องใช้แต่ละแต่ละโอนย้ายไป 10 ml Tryptic ถั่วเหลืองซุป (ซุป TSB, BD/Difco) และ 37 C ในเชคเกอร์การโคจร(วิทยาศาสตร์รัฐนิวบรันสวิก G34 รุ่น เอดิสัน NJ) ที่ 150 rpm สำหรับประมาณ 20 h แล้วได้เก็บเกี่ยวผลผลิตแต่ละวัฒนธรรม โดย centrifugation(2400 กรัมสำหรับ 15 นาทีที่ 4 C) ใน Hermle Labnet รุ่น Z -206A (Hermle Labortechnik เยอรมนี), และหยุดชั่วคราวอีกครั้งใน 20 ml0.1 น้ำ peptone % (PW, BD/Difco) หลังจากที่ ml 5 ของแต่ละวัฒนธรรมไม่รวมหลอดหนึ่งทำค็อกเทลค็อกเทลงานก่อตั้งขึ้น โดยรวม และผสมการบุคคลห้าล้างวัฒนธรรมเชื้อแบคทีเรีย ทุกวัฒนธรรมประกอบด้วยการเซลล์ประชากรของ ca 1089 CFU / มล.วัฒนธรรมสดเตรียมไว้ในการทดลองแต่ละ ไก่สับ thawed (5 กรัม) เป็น aliquotedเป็น 2oz กระเป๋าปากวน (Nasco Co ฟอร์ทอันดับ WI), inoculatedมี 0.1 มล.ของค็อกเทล ผสมด้วยตนเองสำหรับ 30 s และปิดสนิทแล้วใช้ห่อ A300 Vac หลาย ตัวอย่างที่ได้รับเหมือนกันรักษาได้แล้วปิดผนึกในถุง polynylon (Uline, Inc. ฟิลาเดลเฟียPA) เป็นอุปสรรครองก่อน HPP รักษาป้องกันการรั่วไหล ตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่ 4 C และพร้อมสำหรับ HPPรักษา2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 พื้นไก่ไก่พื้น (แคลิฟอร์เนียได้ 95% ยัน 5% ปริมาณไขมัน) ซื้อได้ที่ผู้ค้าส่งท้องถิ่น(แลนส์, PA) ที่ถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการในที่เย็นและสม่ำเสมอportioned เข้าไปในกลุ่มตัวอย่าง 90 กรัมในกระเป๋า polynylon (ULINE, อิงค์, ฟิลาเดล , PA) สูญญากาศปิดผนึก 50 milibars แบบ Multi-Vac A300 ห่อ (Multi-Vac อิงค์แคนซัสซิตี) และจากนั้นแช่แข็ง(20 องศาเซลเซียส) ไก่พื้นแกมมาต่อมาได้รับการฉายรังสี (Cs-137, 0.070 กิโลเกรย์ / นาที 20 องศาเซลเซียสล็อกฮีดจอร์เจีย, รีเอตตา) เพื่อให้ปริมาณของแคลิฟอร์เนีย 5 กิโลเกรย์ซึ่งการใช้งานใด ๆ ที่ปนเปื้อนเชื้อ Salmonella (Tamplin, เปา & Marmer, 2005) ในการศึกษาความอยู่รอด ฉายรังสีและไก่พื้นดินที่ไม่ผ่านการฉายรังสีภายใต้ความเครียด HPP แสดงให้เห็นว่าตายที่คล้ายกันในสภาพที่ผ่านการทดสอบความแตกต่างเช่นแผ่นนับเป็นที่ไม่ได้อย่างมีนัยสำคัญ(P> 0.05) ไก่พื้นดินจากนั้นก็เก็บรักษาไว้ที่ 20 องศาเซลเซียส พื้นไก่ถูกละลายในชั่วข้ามคืนในตู้เย็น (4? C) ก่อนที่จะใช้ในการทดลอง. 2.2 Salmonella spp วัฒนธรรมและการเตรียมห้าสายพันธุ์เชื้อ Salmonella (เช่น typhimurium เอส DT 104; เอสนิวพอร์ต ATCC 6962; เอส enterititis, ATCC 13076; Senftenberg เอส, ATCC 8400; และ S. เคนตั๊กกี้ FSIS 074) ที่ได้รับจากคอลเลกชันวัฒนธรรมทางทิศตะวันออกของศูนย์การวิจัย (ERRC) การเกษตรบริการการวิจัย(ARS), สหรัฐอเมริกากรมวิชาการเกษตร(USDA) ที่ตั้งอยู่ใน Wyndmoor, PA Salmonella แยกแต่ละชุบบนXLT-4 วุ้น (SMAC, BD / Difco ประกาย, MD, USA) และเก็บไว้ที่8 องศาเซลเซียส ยี่สิบสี่ชั่วโมงก่อนการทดลอง loopful ของแต่ละสายพันธุ์ก็ถูกย้ายเป็นรายบุคคลถึง 10 มล. Tryptic Soy น้ำซุป (ซุป TSB, BD / Difco) และจัดขึ้นที่ 37 องศาเซลเซียสในเครื่องปั่นโคจร(New Brunswick วิทยาศาสตร์รุ่น G34, เอดิสัน, นิวเจอร์ซีย์ ) ที่ 150 รอบต่อนาทีสำหรับประมาณ20 ชั่วโมง วัฒนธรรมแต่ละคนได้รับการเก็บเกี่ยวแล้วโดยการหมุนเหวี่ยง(2400? กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส) ใน Hermle Labnet รุ่น Z-206A (Hermle Labortechnik เยอรมนี) และอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน 20 มล. 0.1% น้ำเปปโตน (PW, BD / Difco) หลังจากนั้น 5 มล. ของแต่ละวัฒนธรรมได้ร่วมในหลอดหนึ่งที่จะทำให้ค็อกเทล. ค๊อกเทลการทำงานที่ถูกสร้างขึ้นโดยการรวมและการผสมแต่ละห้าล้างวัฒนธรรมแบคทีเรีย ทุกวัฒนธรรมประกอบด้วยประชากรเซลล์ของแคลิฟอร์เนีย 1,089 โคโลนี / มิลลิลิตร วัฒนธรรมสดถูกจัดเตรียมสำหรับการทดสอบแต่ละ ไก่ละลายพื้นดิน (5 กรัม) ถูก aliquoted เข้า 2oz ถุงวนปาก (Nasco Co, Ft. แอตกินสัน, WI) เชื้อ0.1 มิลลิลิตรค๊อกเทลที่ผสมด้วยตนเองเป็นเวลา 30 วินาทีและปิดผนึกแล้วโดยใช้Multi-Vac A300 ห่อ . ตัวอย่างที่ได้รับเดียวกันการรักษาถูกปิดผนึกแล้วในถุง polynylon (ULINE, Inc, Philadelphia, PA) เป็นอุปสรรคที่สองก่อนที่จะมีการรักษา HPP เพื่อป้องกันการรั่วไหลใดๆ กลุ่มตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสและพร้อมสำหรับการ HPP รักษา. 2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . ไก่บด ไก่บด
( ประมาณ 95% ยัน 5% ปริมาณไขมัน ) ซื้อที่
ผู้ค้าส่งท้องถิ่น ( ออร์แลนโด , PA ) ถูกส่งไปยังห้องแล็บในเย็นและ
เท่าๆ กัน ( 90 กรัม ) ลงในถุง polynylon ( uline
, Inc , Philadelphia , PA ) , สูญญากาศปิดผนึกถึง 50 milibars หลาย Vac
A300 ขน ( Multi Vac อิงค์ , แคนซัส ซิตี้ โม ) แล้วแช่แข็ง
( 20
C )พื้นหลังฉายรังสีแกมมา ( มัน ไก่ cs-137
, 0.070 kGy / นาที , 20
C , ล็อกฮีดจอร์เจีย , Marietta , GA ) dose
ของ CA 5 กิโลเกรย์ซึ่งยับยั้งการปนเปื้อนเชื้อซัลโมเนลลาๆ
( เป๋าลี่ แทมปลิน , , &มาร์เมอร์ , 2005 ) ในการศึกษาการอยู่รอด ที่ฉายรังสีและไม่ฉายรังสี
ไก่พื้นดินภายใต้เอชพีความเครียดพบ
คล้ายกัน Lethality ในเงื่อนไขการทดสอบ เช่น จานนับความแตกต่าง
คือไม่แตกต่างกัน ( P > 0.05 ) ไก่สับแล้ว
ไว้ที่ 20
C . ไก่พื้นดินถูกละลายในชั่วข้ามคืนในตู้เย็น (

4 C ) ก่อนที่จะใช้ในการทดลอง .
2.2 . Salmonella spp . วัฒนธรรมและการเตรียม
5 สายพันธุ์ ( เช่นเชื้อ S . typhimurium DT 104 ; s Newport ,
) 6962 ; S . enterititis , ATCC 13076 ; เอสเซนเฟนแบล์ค , ATCC 8400 ;
. รัฐเคนตั๊กกี้FSIS 074 ) ที่ได้รับจากวัฒนธรรมของสะสม
ทางทิศตะวันออกของศูนย์วิจัยภูมิภาค ( errc ) , บริการวิจัยการเกษตร
( ARS ) , สหรัฐอเมริกากรมวิชาการเกษตร ( USDA ) ตั้งอยู่ใน wyndmoor
.
ชุบลงในแต่ละเชื้อซัลโมเนลลาที่แยกได้ xlt-4 ( smac BD / difco , ประกายไฟ , MD , ประเทศสหรัฐอเมริกา
8
C และเก็บไว้ที่ยี่สิบสี่ชั่วโมงก่อนทดลอง loopful
ของแต่ละสายพันธุ์ แต่ละโอน 10 ml อาหารถั่วเหลือง
ซุป ( ซุป TSB BD / difco ) และจัดขึ้นที่ 37
C ใน
เครื่องปั่นโคจร ( บรุนซ์ใหม่ทางวิทยาศาสตร์ แบบ g34 , Edison , NJ ) ที่ความเร็ว 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลาประมาณ 20 ชั่วโมง ในแต่ละวัฒนธรรม
ถูกเก็บเกี่ยวโดย 3
( 2400  กรัม 15 นาทีที่ 4
C ) ในเฮอร์เมิล labnet รุ่น Z -
206a ( เฮอร์เมิล labortechnik , เยอรมัน ) , และแขวนลอยใน 20 ml
0เปปโตนน้ำ 1 % ( PW BD / difco ) หลังจากนั้น 5 ml ของแต่ละวัฒนธรรม
ถูกรวมในหนึ่งหลอดเพื่อให้ค๊อกเทล .
ค็อกเทลการทำงานรูปแบบโดยรวม และแต่ละวัฒนธรรมผสม
5 ล้างแบคทีเรีย ทุกวัฒนธรรมมีประชากรประมาณ 956
เซลล์ CFU / มล. สดวัฒนธรรมเตรียม
สำหรับแต่ละการทดลอง ไก่บดละลาย ( 5 กรัม ) คือ aliquoted
วนปากถุงเป็น 2 ( NASCO Co ,ฟุต Atkinson , WI ) หัวเชื้อ
กับ 0.1 มิลลิลิตรของค๊อกเทลที่ผสมด้วยตนเองเป็นเวลา 30 วินาทีและจากนั้นปิดผนึก
ใช้ Multi Vac A300 ขน . ตัวอย่างที่ได้รับการรักษาเดียวกัน
แล้วปิดผนึกในถุง polynylon ( uline , อิงค์ , Philadelphia , PA
) เป็นอุปสรรครองก่อนเอชพีรักษาป้องกัน
รั่วใด ๆ ตัวอย่าง เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส และ
พร้อมรักษาเอชพี
.
2