Yeasts were individually picked ont

Yeasts were individually picked onto Petri dishes with PDA
medium in the form of two parallel lines 1 cm apart from each other.
A C. gloeosporioides mycelium disk of 6 mm in diameter, cultured in
PDA for 10 d, was placed at the center of the plate precisely between
the two yeast strains streak spots. The plates were incubated
at 28
◦
C until an interaction between the phytopathogen hyphae
and the test yeast (4 d of incubation) was reached. Subsequently,
samples of approximately 1 cm
2
containing both organisms were
extracted with a scalpel, washed twice with distilled water and prepared for SEM imaging, according to Bozzola and Russell (1999).
The positive control was a mycelium portion (1 cm
2
) taken from a
C. gloeosporioides culture, which was grown on PDA at 28
◦
C for 10 d.
The samples were placed in a modified Karnovsky fixative for 48 h
and post-fixed in 1% osmium tetroxide in sodium cacodylate buffer
(0.1 M, pH 7.2) for 1 h. Afterwards, the samples were dehydrated
by immersion in crescent ethanol series (30%, 50%, 70% and 90%)
for 10 min. Next, the samples were immersed in 3 pure ethanol
baths of 10 min each and taken to a critical point dryer (Emitech
K850), coated with gold sputter coating (Emitech K550) and examined with a SEM (Zeiss DSM 940 A) using an acceleration voltage of
15 kV

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Yeasts ที่รับแต่ละรายการลงบนอาหาร PDA Petriสื่อในรูปแบบของเส้นขนานสอง 1 ซ.ม.จากแต่ละอื่น ๆดิสก์ mycelium C. gloeosporioides 6 มม.เส้นผ่านศูนย์กลาง ในอ่างPDA สำหรับ 10 d ถูกวางไว้ที่ศูนย์กลางของจานตรงระหว่างยีสต์ 2 ริ้วจุด แผ่นที่ incubatedที่ 28◦C จนถึงการโต้ตอบระหว่าง phytopathogen hyphaeและแล้วทดสอบยีสต์ (4 d ของคณะทันตแพทยศาสตร์) ในเวลาต่อมาตัวอย่างประมาณ 1 ซม.2ประกอบด้วยทั้งสิ่งมีชีวิตได้สกัด ด้วย scalpel ล้าง ด้วยน้ำกลั่นสองครั้ง และเตรียมภาพ SEM ตาม Bozzola และรัสเซลล์ (1999)ควบคุมบวกถูกส่วน mycelium (1 ซม.2) มาจากการวัฒนธรรม C. gloeosporioides ซึ่งปลูกบน PDA ที่ 28◦C สำหรับ 10 dตัวอย่างถูกวางในการตรึง Karnovsky แก้ไขสำหรับ 48 hและหลังถาวรใน 1% เทโตรไซด์ออสเมียมในบัฟเฟอร์ cacodylate โซเดียม(0.1 M, pH 7.2) สำหรับ 1 h. หลัง ตัวอย่างอบแห้งโดยแช่ในเอทานอลเครสเซนท์ชุด (30%, 50%, 70% และ 90%)สำหรับ 10 นาที ตัวอย่างถูกแช่อยู่ในเอทานอลบริสุทธิ์ 3มีห้องอาบน้ำ 10 นาที และนำมาสู่จุดสำคัญเครื่องเป่า (EmitechK850), เคลือบ ด้วยทอง sputter เคลือบ (Emitech K550) และตรวจสอบกับแบบ SEM (Zeiss DSM 940 A) โดยใช้แรงการเร่ง15 kV

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีสต์ถูกเลือกเป็นรายบุคคลลงบนจานเลี้ยงเชื้อ PDA ที่มี
ขนาดกลางในรูปแบบของสองเส้นคู่ขนาน 1 ซม. ห่างจากกัน.
C. gloeosporioides ดิสก์เส้นใย 6 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางเลี้ยงใน
PDA 10 D, ถูกวางไว้ที่ศูนย์กลางของ แผ่นได้อย่างแม่นยำระหว่าง
สองยีสต์สายพันธุ์จุดแนว แผ่นถูกบ่ม
ที่ 28
◦
C จนปฏิสัมพันธ์ระหว่าง hyphae phytopathogen
และยีสต์ทดสอบ (4 d ของการบ่ม) ก็มาถึง ต่อจากนั้น
กลุ่มตัวอย่างประมาณ 1 ซม.
2
ที่มีทั้งสิ่งมีชีวิตที่ถูก
สกัดด้วยมีดผ่าตัดล้างสองครั้งด้วยน้ำกลั่นและเตรียมความพร้อมสำหรับการถ่ายภาพ SEM ตาม Bozzola และรัสเซล (1999).
ควบคุมบวกเป็นส่วนเส้นใย (1 ซม.
2
) ดำเนินการ จาก
ซี gloeosporioides วัฒนธรรมซึ่งได้รับการปลูกบน PDA ที่ 28
◦
C เป็นเวลา 10 d.
ตัวอย่างถูกวางไว้ในการปรับเปลี่ยนตรึง Karnovsky เป็นเวลา 48 ชั่วโมง
และหลังการแก้ไขใน 1% ออสเมียม tetroxide ในบัฟเฟอร์โซเดียม cacodylate
(0.1 M ค่า pH 7.2) 1 ชั่วโมง หลังจากนั้นกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการอบแห้ง
โดยการแช่ในซีรีส์เอทานอลเสี้ยว (30%, 50%, 70% และ 90%)
เป็นเวลา 10 นาที ถัดไปตัวอย่างที่ถูกแช่อยู่ใน 3 เอทานอลบริสุทธิ์
อาบน้ำ 10 นาทีแต่ละคนและนำตัวไปเป่าจุดวิกฤติ (Emitech
K850) เคลือบด้วยทองเคลือบปะทุ (Emitech K550) และการตรวจสอบกับ SEM (Zeiss DSM 940) โดยใช้การเร่งความเร็ว แรงดันไฟฟ้าของ
15 กิโลโวลต์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ยีสต์เป็นแบบเลือกลงบนจานเลี้ยงเชื้อกับ PDA
ขนาดกลาง ในรูปแบบของบรรทัดที่สอง 1 ซม. ห่างจากแต่ละอื่น ๆ : C . gloeosporioides เส้นใยขนาน ดิสก์ 6 มม. ในเส้นผ่าศูนย์กลาง เพาะเลี้ยง
PDA 10 D อยู่ในศูนย์กลางของจานแน่นอนระหว่าง
สองสายพันธุ์ยีสต์แนวจุด จานถูกบ่ม

ที่ 28 ◦
C จนถึงปฏิสัมพันธ์ระหว่าง phytopathogen
)และทดสอบยีสต์ ( 4 D 1 ) ครบ ต่อมา
ตัวอย่างประมาณ 1 cm
2

มีทั้งสิ่งมีชีวิตถูกสกัดด้วยมีด , ล้างด้วยน้ำกลั่น 2 ครั้ง และเตรียมไว้สำหรับการถ่ายภาพ SEM , ตาม bozzola และ Russell ( 2542 ) .
ควบคุมบวกเป็นเส้นใยส่วน ( 1 cm
2
) ถ่ายจาก
C . gloeosporioides วัฒนธรรม ซึ่งปลูกบน PDA ที่ 28 ◦


C 10 Dตัวอย่างถูกวางไว้ในการแก้ไข karnovsky ฟิกเซทีฟ 48 H
โพสต์คงที่ 1% ออสเมียม tetroxide ในโซเดียม จากนั้นนำกันชน
( 0.1 โมลาร์ pH 7.2 ) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังจากนั้น ทำการอบแห้งโดยการแช่ในแอลกอฮอล์
ชุดเสี้ยว ( 30% , 50% , 70% และ 90% )
สำหรับ 10 นาทีต่อมา ตัวอย่างที่ถูกแช่อยู่ในเอทานอลบริสุทธิ์
3 บาท 10 นาทีแต่ละไปที่ไดร์จุดวิกฤต ( emitech
k850 )เคลือบด้วยทองมิดหมีเคลือบ ( emitech k550 ) และการตรวจสอบด้วย SEM ( Zeiss DSM 940 ) โดยใช้แรงดัน ความเร่งของ
15 กิโลโวลต์