2.2.2. Myofibrillar protein (MP) extraction
Fish fillets were thawed overnight at 4 C before performing MP
extraction according to the method described by Xiong (1993), with
slight modifications. Briefly, fish samples were blended with 4 volumes
of washing buffer (100 mmol L1, NaCl, 50 mmol L1 phosphate
buffer, pH 6.25) for 2 min. The homogenate was centrifuged
for 15 min at 1000 g and only pellets were collected. The process
was repeated twice. The obtained pellet was mixed with 8 volumes
of 100 mmol L1 NaCl (adjusted pH to 6.25) before filtering through
2 layers of gauze to remove connective tissue. The filtrate was
centrifuged at 1000g for 15 min and the pelletwas used asMP. The
protein concentration in pellet was determined by Biuret method
using bovine serum albumin as a standard. The protein pattern of
isolated MPwas determined using SDS-PAGE technique. In addition,
the moisture content in the MP was also determined by AOAC
method in order to calculate the total solid content.
2.2.2 . โปรตีน ( MP ) โดยการสกัด
เนื้อปลาถูกละลายค้างคืนที่ 4 C ก่อนการปฏิบัติการสกัด MP
ตามวิธีการที่อธิบายโดยเซียง ( 1993 ) ,
การปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สั้น , ตัวอย่างปลาผสมกับ 4 เล่ม
ล้างบัฟเฟอร์ ( 100 mmol l 1 , เกลือ , 50 mmol l ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 1
, 6.25 ) 2 นาทีโดยแยกเป็นระดับ
15 นาทีที่ 1 , 000 กรัมเท่านั้น และอัตราการเก็บรวบรวม กระบวนการ
ทำซ้ำสองครั้ง นำอาหารเม็ดผสมกับ 8 เล่ม
100 mmol l 1 NaCl ( ปรับ pH 6.5 ) ก่อนที่จะกรองผ่านชั้นของผ้ากอซ
2 เอาเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน หนักอยู่ที่ 1000
ระดับ G สำหรับ 15 นาทีและ pelletwas ใช้ asmp .
โปรตีนในเม็ดถูกกำหนดโดยวิธีไบยูเร็ต
การใช้อัลบูมินเป็นมาตรฐาน รูปแบบของโปรตีนที่แยก mpwas
หาได้โดยใช้เทคนิค SDS-PAGE . นอกจากนี้
ความชื้นใน MP ถูกกำหนดโดยวิธีไม่
เพื่อคำนวณหาปริมาณของแข็งทั้งหมด
การแปล กรุณารอสักครู่..
