The use of luciferase reporters has

The use of luciferase reporters has become a precise, noninvasive, high-throughput method for real-time monitoring of promoter activity in living cells, especially for rhythmic biological processes such as circadian rhythms. We developed a destabilized firefly luciferase as a reporter for rhythmic promoter activity in both the cell division and respiratory cycles of the budding yeast Saccharomyces cerevisiae in which real-time luminescence reporters have not been previously applied. The continuous output of light from luciferase reporters allowed us to explore the relationship between the cell division cycle and the yeast respiratory oscillation, including the observation of responses to chemicals that cause phase shifting of the respiratory oscillations. Destabilized firefly luciferase is a good reporter of cell cycle position in synchronized or partially synchronized yeast cultures, in both batch and continuous cultures. In addition, the oxygen dependence of luciferase can be used under certain conditions as a genetically encodable oxygen monitor. Finally, we use this reporter to show that there is a direct correlation between premature induction of cell division and phase resetting of the respiratory oscillation under the continuous culture conditions tested.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การใช้งานของผู้สื่อข่าว luciferase ได้กลายเป็น วิธีที่แม่นยำ noninvasive อัตราความ เร็วสูงสำหรับการตรวจสอบแบบเรียลไทม์ของโปรโมเตอร์กิจกรรมในชีวิตเซลล์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งจังหวะกระบวนการทางชีวภาพเช่นแบบ circadian เราพัฒนา luciferase หิ่งห้อย destabilized เป็นผู้สื่อข่าวสำหรับโปรโมเตอร์จังหวะกิจกรรมในฝ่ายเซลล์และรอบหายใจโตยีสต์ Saccharomyces cerevisiae ใน luminescence แบบเรียลไทม์ที่ผู้สื่อข่าวไม่ได้ก่อนหน้านี้ใช้ ผลผลิตต่อเนื่องของแสงจาก luciferase ผู้สื่อข่าวให้เราสำรวจความสัมพันธ์ระหว่างวงจรการแบ่งเซลล์ยีสต์หายใจสั่น รวมทั้งสังเกตการณ์ตอบสนองกับสารเคมีที่ทำให้ระยะขยับของแกว่งทางเดินหายใจ Luciferase หิ่งห้อย destabilized เป็นผู้สื่อข่าวดีของวงจรเซลล์ตำแหน่งในยีสต์และซิงโครไนส์ ปรับบางส่วนให้ตรงวัฒนธรรม ในชุดและวัฒนธรรมอย่างต่อเนื่อง นอกจากนี้ สามารถใช้ภายใต้เงื่อนไขบางประการอาศัยออกซิเจนของ luciferase เป็นจอออกซิเจน encodable แปลงพันธุกรรม สุดท้าย เราใช้โปรแกรมรายงานนี้เพื่อแสดงว่า มีความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างก่อนกำหนดการเหนี่ยวนำของเซลล์ส่วน และขั้นตอนการรีเซ็ตสั่นหายใจภายใต้เงื่อนไขวัฒนธรรมอย่างต่อเนื่องผ่านทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การใช้งานของนักข่าว luciferase ได้กลายเป็นที่แม่นยำไม่รุกล้ำวิธีสูงผ่านสำหรับการตรวจสอบเวลาจริงของกิจกรรมก่อการในเซลล์ที่มีชีวิตโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับกระบวนการทางชีวภาพจังหวะเช่นจังหวะ circadian เราได้พัฒนา destabilized luciferase หิ่งห้อยเป็นนักข่าวกิจกรรมก่อการจังหวะทั้งในการแบ่งเซลล์และวงจรระบบทางเดินหายใจของยีสต์ Saccharomyces cerevisiae รุ่นที่เรียลไทม์ผู้สื่อข่าวเรืองแสงยังไม่ได้ถูกนำมาใช้ก่อนหน้านี้ การส่งออกอย่างต่อเนื่องของแสงจากนักข่าว luciferase ให้เราไปสำรวจความสัมพันธ์ระหว่างวงจรการแบ่งตัวของเซลล์ยีสต์และความผันผวนทางเดินหายใจรวมทั้งการสังเกตของการตอบสนองต่อสารเคมีที่ก่อให้เกิดขั้นตอนการขยับของแนบแน่นระบบทางเดินหายใจ destabilized luciferase หิ่งห้อยเป็นนักข่าวที่ดีของตำแหน่งวงจรมือถือในตรงกันหรือตรงกันบางส่วนวัฒนธรรมยีสต์ทั้งชุดและวัฒนธรรมอย่างต่อเนื่อง นอกจากนี้ยังมีการพึ่งพาอาศัยออกซิเจน luciferase สามารถนำมาใช้ภายใต้เงื่อนไขบางเป็นจอภาพออกซิเจน encodable พันธุกรรม ในที่สุดเราจะใช้รายงานนี้แสดงให้เห็นว่ามีความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างการเหนี่ยวนำก่อนวัยอันควรของการแบ่งเซลล์และเฟสของการตั้งค่าความผันผวนทางเดินหายใจภายใต้เงื่อนไขวัฒนธรรมอย่างต่อเนื่องผ่านการทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ใช้นักข่าวลูซิเฟอเรสได้กลายเป็นชัดเจนขึ้น ไม่ วิธีช่วยสำหรับการตรวจสอบเวลาจริงของการกิจกรรมในเซลล์ที่มีชีวิต โดยกระบวนการทางชีวภาพ จังหวะดังกล่าวเป็นจังหวะรอบวัน .เราพัฒนาสูญสลายหิ่งห้อยลูซิเฟอเรสในฐานะนักข่าวสำหรับกิจกรรมส่งเสริมการขายทั้งในการแบ่งเซลล์ และจังหวะวงจรการหายใจของยีสต์ Saccharomyces cerevisiae ซึ่งเป็นนักข่าวแบบเรืองแสงได้ ก่อนหน้านี้ใช้ผลผลิตอย่างต่อเนื่องของแสงจากนักข่าวลูซิเฟอเรสให้เราเพื่อศึกษาความสัมพันธ์ ระหว่างการแบ่งเซลล์วงจรและยีสต์หายใจสั่น รวมทั้งสังเกตการตอบสนองต่อสารเคมีที่ทำให้เกิดระยะการขยับของการสั่น ทางเดินหายใจสูญสลายหิ่งห้อยลูซิเฟอเรสเป็นนักข่าวของวัฎจักรเซลล์ตำแหน่งตรงกันหรือตรงกันบางส่วนยีสต์วัฒนธรรม ทั้งชุด และ วัฒนธรรมอย่างต่อเนื่อง นอกจากนี้ ออกซิเจนอิสระของลูซิเฟอเรส สามารถใช้ภายใต้เงื่อนไขบางอย่าง เช่น จอภาพออกซิเจนทางพันธุกรรม encodable . ในที่สุดเราใช้รายงานนี้แสดงให้เห็นว่ามีความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างการแบ่งเซลล์และการตั้งค่าก่อนกําหนดระยะของการแกว่งหายใจภายใต้สภาพการเลี้ยงแบบทดสอบ