Establishing conditions for minipri

Establishing conditions for miniprimer PCR. (A) Minimum primer length. Beginning with a 20-nt primer, a series of shortened primers having a common 5′ end was designed. These primers were used in combination with a 19-nt reverse primer (B) and a 10-nt primer (C) to demonstrate that 10-nt primers can be used for PCR. (B) Amplification using the forward primer series. When electrophoresed on an agarose gel, PCR with S-Tbr produces detectable amplification using primers as short as 10 nt (F10/R19). (C) Miniprimer PCR. Agarose gel electrophoresis of PCR products with S-Tbr and a range of annealing temperatures demonstrates robust amplification for a pair of 10-nt primers (F10/R10). In panels B and C, agarose gels are stained with ethidium bromide and arrows mark the expected size of PCR products.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สร้างเงื่อนไขสำหรับ pcr miniprimer (ก) ระยะเวลาไพรเมอร์ขั้นต่ำ เริ่มต้นด้วยไพรเมอร์ 20-NT, ชุดของไพรเมอร์ที่สั้นกว่าที่มีร่วมกัน 5 'ในตอนท้ายได้รับการออกแบบ ไพรเมอร์เหล่านี้ถูกนำมาใช้ร่วมกับ 19-NT กลับไพรเมอร์ (ข) และไพรเมอร์ 10-NT (ค) แสดงให้เห็นว่าไพรเมอร์ 10-NT สามารถใช้สำหรับการ pcr (ข) การขยายการใช้ไพรเมอร์ซีรีส์ไปข้างหน้าเมื่อ electrophoresed บนเจล agarose, pcr ด้วย s-TBR ผลิตเครื่องขยายเสียงที่ตรวจพบโดยใช้ไพรเมอร์สั้นที่สุดเท่าที่ 10 NT (f10/r19) (c) pcr miniprimer อิเจล agarose ผลิตภัณฑ์ pcr ด้วย s-TBR และช่วงของอุณหภูมิการหลอมแสดงให้เห็นถึงการขยายประสิทธิภาพสำหรับคู่ของไพรเมอร์ 10-NT (f10/r10) ในแผง B และ C,เจล agarose จะเปื้อน ethidium โบรไมด์และลูกศรทำเครื่องหมายขนาดที่คาดหวังของผลิตภัณฑ์ pcr

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กำหนดเงื่อนไขสำหรับ miniprimer PCR (A) ความยาวพื้นน้อยที่สุด เริ่มต้น ด้วยพื้น 20 nt ชุดตัดให้สั้นลงไพรเมอร์มีปลาย 5′ ทั่วไปถูกออกแบบมา ไพรเมอร์เหล่านี้ถูกใช้ร่วมกับรองพื้นแบบ 19 nt ย้อน (B) และสีรองพื้น 10-nt (C) แสดงว่า สามารถใช้ไพรเมอร์ 10-nt สำหรับ PCR (ข) ขยายใช้ชุดพื้นไปข้างหน้า เมื่อ electrophoresed ในการเจล agarose, PCR กับ S-Tbr สร้างขยายสามารถใช้ไพรเมอร์โดยย่อที่ 10 (F10 R19) nt (C) Miniprimer PCR Agarose electrophoresis เจลผลิตภัณฑ์ PCR กับ S-Tbr และช่วงของอุณหภูมิการอบเหนียวแสดงขยายประสิทธิภาพสำหรับคู่ไพรเมอร์ 10-nt (F10 R10) ในแผง B และ C สีเจ agarose กับโบรไมด์ ethidium และลูกศรเครื่องหมายขนาดที่คาดไว้ของผลิตภัณฑ์ PCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสร้างเงื่อนไขสำหรับ miniprimer pcr. (ก)เชื้อปะทุความยาวต่ำสุด. เริ่มต้นด้วย 20 - NT ชนวน Series ของ primers สั้นลงโดยทั่วไปมี 5 "ที่ได้รับการออกแบบมา primers เหล่านี้ได้ถูกนำมาใช้ในการใช้งานร่วมกับ 19 - NT ย้อนกลับเชื้อปะทุ( B )และ 10 - NT เชื้อปะทุ( C )เพื่อแสดงให้เห็นว่า 10 - NT primers สามารถใช้สำหรับ pcr. (ข)ใช้การขยายเสียงโดยใช้เชื้อปะทุส่งต่อได้.เมื่อ electrophoresed บนเจล agarose ที่ pcr ด้วย S - TBR ให้สามารถตรวจพบการขยายสัญญาณเสียงโดยใช้ primers เป็นในระยะสั้น 10 NT ( F 10 / R 19 ) ( c ) miniprimer pcr. electrophoresis เจล agarose ของตัวสินค้า pcr ด้วย S - TBR และความหลากหลายของ อุณหภูมิ annealing แสดงให้เห็นถึงการขยายสัญญาณเสียงที่แข็งแกร่งสำหรับคู่ของ 10 - NT primers ( F 10 / R 10 ) ในแผงควบคุม B และ Cผลิตภัณฑ์ ประเภท แวกซ์,เจล agarose มีแต้มสีพร้อมด้วยสำหรับอัดรูปถ่าย ethidium และเครื่องหมายลูกศรขนาดใหญ่คาดว่าจะได้ของ ผลิตภัณฑ์ pcr