2. Material and Methods 2.1. The Se

2. Material and Methods
2.1. The Selection of the Microorganism and Culture Medium
Three Aspergillus species (A. japonicus 246A, A. tamarii 3 and Aspergillus sp. GM4) belonging to the culture col- lection of the Laboratory of Prospection and Genetics of Fungi (Department of Biology, Federal University of Lavras, Lavras, MG, Brazil) were previously selected due to their ability to produce tannase in tannic acid agar. The submerged fermentations for tannase production were conducted using 25 mL of Khanna [8], Czapeck [9], M5 [10], Adams [11] or Vogel [12] media in 125 mL Erlenmeyer flasks containing 2% (w/v) tannic acid as the main carbon source, pH 6.0. The media were previously autoclaved at 120˚C and 1.5 atm for 20 min and were inoculated with a spore suspension at 1 × 105 conidia/mL of medium. Erlenmeyer flasks containing the media were incubated at 30˚C for 72 h on a rotary shaker (100 rpm). Then, the biomass was separated by vacuum filtration through Whatman N˚ 1 filter paper, and the cell-free cul- ture broth was used to measure the extracellular tannase activity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ 2.1.เลือกจุลินทรีย์และสื่อวัฒนธรรม สายพันธุ์ Aspergillus สาม (A. japonicus 246A, tamarii อ. 3 และ Aspergillus sp. GM4) คอลัมน์-lection วัฒนธรรมปฏิบัติ Prospection และพันธุศาสตร์ของเชื้อรา (ภาควิชาชีววิทยา มหาวิทยาลัยของรัฐบาลกลาง Lavras, Lavras, MG บราซิล) ที่เป็นสมาชิกที่เลือกเนื่องจากความสามารถในการผลิต tannase ในกรด tannic agar หมักแหนมน้ำท่วมสำหรับผลิต tannase ได้ดำเนินการใช้ 25 mL คันนา [8] M5, Czapeck [9] [10], Adams [11] หรือสื่อโวเกล [12] ในน้ำ Erlenmeyer 125 mL ประกอบด้วยกรด tannic 2% (w/v) เป็นคาร์บอนหลักแหล่ง pH 6.0 สื่อถูก autoclaved ก่อนหน้านี้ที่ 120˚C และ 1.5 atm สำหรับ 20 นาที และมี inoculated กับระงับสปอร์ conidia 1 × 105/mL ของกลางที่ ประกอบด้วยสื่อนำ Erlenmeyer ถูก incubated ที่ 30˚C สำหรับ h 72 ในเชคเกอร์โรตารี่ (100 รอบต่อนาที) แล้ว ชีวมวลถูกคั่น ด้วยเครื่องกรองสุญญากาศโดยใช้กระดาษกรอง Whatman N˚ 1 และซุปฟรีเซลล์ cul-ture ใช้วัดกิจกรรม extracellular tannase

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเลือกของจุลินทรีย์และวัฒนธรรมกลางสามสายพันธุ์เชื้อรา Aspergillus (ก japonicus 246A ก tamarii ที่ 3 และ Aspergillus sp. จำนวน GM4) ที่เป็นวัฒนธรรมที่จะเก็บรวบรวม Lection ของห้องปฏิบัติการ Prospection และพันธุศาสตร์ของเชื้อรา (ภาควิชาชีววิทยามหาวิทยาลัยสหพันธ์ ของ Lavras, Lavras, MG, บราซิล) ได้รับการคัดเลือกก่อนหน้านี้เนื่องจากความสามารถในการผลิต tannase ในอาหารเลี้ยงเชื้อกรดแทนนิค
หมักแหนมจมอยู่ใต้น้ำสำหรับการผลิต tannase ถูกดำเนินการโดยใช้ 25 มิลลิลิตรคันนา [8], Czapeck [9], M5 [10] อดัมส์ [11] หรือ Vogel [12] สื่อใน 125 มิลลิลิตรขวด Erlenmeyer มี 2% (w / v) กรดแทนนิคเป็นแหล่งคาร์บอนหลัก pH 6.0 สื่อถูกเบาก่อนหน้านี้ที่ 1.5 120C และตู้เอทีเอ็มเป็นเวลา 20 นาทีและเชื้อด้วยสปอร์แขวนลอยที่ 1 × 105 สปอร์ / มลกลาง ขวด Erlenmeyer มีสื่อที่ถูกบ่มที่ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมงในเครื่องปั่นหมุน (100 รอบต่อนาที) จากนั้นชีวมวลถูกแยกออกโดยการกรองสูญญากาศผ่านเบอร์ 1 n กระดาษกรองและน้ำซุป ture cul- มือถือฟรีที่ใช้ในการวัดกิจกรรม tannase extracellular

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . การเลือกของจุลินทรีย์และสื่อวัฒนธรรม
3 สปีชีส์ Aspergillus ( A . japonicus 246a อ. tamarii 3 และ Aspergillus sp . gm4 ) ของวัฒนธรรม COG - lection ของห้องปฏิบัติการของ prospection และพันธุศาสตร์ของเชื้อรา ( ภาควิชาชีววิทยา มหาวิทยาลัยสหพันธ์ Lavras Lavras ต่อ , , ,บราซิล ) ถูกเลือกไว้ก่อนหน้านี้ เนื่องจากความสามารถในการผลิตกรดแทนนิคแทนเนสในอาหารเลี้ยงเชื้อ การ fermentations ในการผลิตแทนเนสจำนวน 25 มิลลิลิตร ใช้ czapeck กานน [ 8 ] , [ 9 ] , M5 [ 10 ] อดัมส์ [ 11 ] หรือ โวเกล [ 12 ] สื่อใน 125 มล. เออร์เลนเมเยอร์ขวดที่มี 2 เปอร์เซ็นต์ ( น้ำหนัก / ปริมาตร ) เป็นแหล่งคาร์บอน กรดแทนนิค , หลักที่ pH 6.0 . สื่อก่อนหน้านี้สังเคราะห์ที่ 120 ˚ C และ 15 ตู้ สำหรับ 20 นาทีและปลูกเชื้อด้วยสปอร์แขวนลอย 1 × 105 conidia / ml ) เออร์เลนเมเยอร์ขวดที่มีสื่อที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 72 ชั่วโมง˚บนเครื่องปั่น Rotary ( 100 รอบต่อนาที ) แล้วสามารถทำการแยกโดยการกรองสูญญากาศผ่าน whatman N ˚ 1 กระดาษกรอง และการสังเคราะห์ CUL - ซุป ture ก็ใช้วัดกิจกรรมแทนเนสและ .