2.3.2.2. Determination of the activ

2.3.2.2. Determination of the activity of α-amylase. The enzymatic activity of α-amylase was determined according to Morishita, et al. (2000). A reaction mixture consisting of 500 μL of G3 CNP at concentrations ranging from 0.6 to 3.0 mM; 400 μL of 13.1 mg mL
1 bile acid extract (equivalent to 18.7 mM cholic acid in the total mixture), 500 μL of each PP solution at concentrations ranging from 60 to 300 μg mL
1 , and 100 μL of a working solution of α-amylase of 150 U mL
1 (one unit is the amount of enzyme required to convert 1 μmol of G3 CNP) was prepared. All of the solutions were prepared in 20 mM phosphate buffer pH 7.0 containing 10 mM NaCl and 15% (v/v) glycerol. The mixture was incubated at 37 1C and the absorbance of the CNP produced was measured at 405 nm every 5 s throughout 60 s.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3.2.2 การกำหนดกิจกรรมของα-amylase กิจกรรมเอนไซม์ในระบบของα-amylase ได้กำหนดตาม Morishita, et al. (2000) ส่วนผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย μL 500 ของ G3 CNP ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0.6 ถึง 3.0 mM ΜL 400 ของกรดน้ำดี mL 1 13.1 mg สารสกัด (เทียบเท่ากับ 18.7 มม. cholic กรดผสมรวม), ΜL ของแต่ละวิธี PP ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 60 300 μg mL 1 500 และ μL 100 ของโซลูชันที่ทำงานของα-amylase ของ 150 U mL 1 (หนึ่งหน่วยคือ จำนวนของเอนไซม์ที่จำเป็นในการแปลง μmol 1 ของ G3 CNP) ที่เตรียม โซลูชั่นทั้งหมดได้ถูกเตรียมใน 20 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 มม. NaCl 10 และ 15% (v/v) กลีเซอร ส่วนผสมคือ incubated ที่ 37 1C และมีวัด absorbance ของ CNP ผลิตที่ 405 nm ทุก 5 s ตลอด 60 s

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3.2.2 ความมุ่งมั่นของกิจกรรมของα-อะไมเลส เอนไซม์ของα-อะไมเลสได้รับการกำหนดขึ้นมาตาม Morishita, et al (2000) ผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย 500 ไมโครลิตรของ G3 CNP ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0.6-3.0 มิลลิ; 400 ไมโครลิตร 13.1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร? สารสกัดจากกรดน้ำดี 1 (เทียบเท่า 18.7 มิลลิกรดโคลิกในการผสมรวม) 500 ไมโครลิตรของแต่ละโซลูชั่น PP ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 60-300 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร 1 และ 100 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาการทำงานของ α-อะไมเลสจาก 150 U มิลลิลิตร 1 (หนึ่งหน่วยคือปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการแปลง 1 ไมโครโมลของ G3 CNP) ได้รับการจัดทำขึ้น ทั้งหมดของการแก้ปัญหาที่ได้จัดทำขึ้น 20 มิลลิฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ที่มี 10 มิลลิโมลาและ 15% (v / v) กลีเซอรอล ส่วนผสมที่ได้รับการบ่มที่ 37 1C และการดูดกลืนแสงของ CNP ผลิตวัดที่ 405 นาโนเมตรทุก 5 ตลอดทั้ง 60 S

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3.2.2 . การกำหนดกิจกรรมของแอลฟาอะไมเลส . กิจกรรมของเอนไซม์แอลฟาอะไมเลสของถูกกำหนดตาม โมริชิตะ , et al . ( 2000 ) ปฏิกิริยาที่ผสมประกอบด้วย 500 μ l G3 CNP ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0.6 ถึง 3.0 มม. ; 400 μ L 13.1 มิลลิกรัม ml สารสกัดจากกรดน้ำดี
1 ( เทียบเท่า 18.7 มม. กรดโคลิกในส่วนผสมทั้งหมด ) ,500 μ L แต่ละ PP สารละลายที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 60 ถึง 300 μกรัมต่อมิลลิลิตร
1 , 100 μลิตรของการแก้ปัญหาการทำงานของแอลฟาอะไมเลส 150 ml
1 U ( หนึ่งหน่วยคือปริมาณของเอนไซม์ ต้องแปลง 1 μโมลของ G3 CNP ) ที่เตรียมไว้ ทั้งหมดของโซลูชั่นเตรียม 20 มม. ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ที่ประกอบด้วย 10 mM NaCl และ 15 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) กลีเซอรอล .ส่วนผสมจะถูกบ่มที่ 37 1C และการดูดกลืนแสงของ CNP ผลิตถูกวัดที่ 405 nm ทุก 5 วินาที ตลอด 60 s