2.1. Plant material
17.5 kg Greek oranges (Citrus sinensis), variety: Navel,
provenance: Leonidi–Tripoleos (Pelloponisos,
South Greece), season: Nov–Jan were bought from a local
supermarket.
The oranges were examined for their anatomy and
the variety was checked in the Laboratory of Arboriculture,
Department of Agriculture, Aristotle University of
Thessaloniki, Greece.
2.2. Sample preparation
Oranges were washed with tap water, peeled off sharply
in order to collect only the flavedo part of the peel
and air dried at room temperature (18–20 C) and darkness
for 12 days. The dried peels were crushed in a mixer
and 277.4 g of them were put into a cartridge made of
filter paper. The above amount of crushed peels was
large enough to be used for the isolation procedure later
on.
2.3. Chemicals and reagents
The solvents used in the present work were purchased
from Merck (Germany), Riedel-deHaen (Germany) and
Baker (Holland). Folin–Ciocalteu reagent, sodium carbonate,
CoCl2 Æ 6H2O and perhydrol 30% H2O2 were
purchased from Merck (Germany). Gallic acid 1-
hydrate was purchased from Panreac (Spain). DPPH
(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl 90%), EDTA, Luminol
(3-aminophtahydrazine) and boric acid were from
Sigma (Germany). Hesperidin was from Biochemika,
Fluka (Germany). All solvents and reagents were of
analytical grade.
Bradford cuvettes (22 · 22 mm) were used in the
Folin–Ciocalteu and CL tests. Disposable cuvettes
(1 cm · 1 cm· 4.5 cm) from Kartel (Italy) were used
for visible absorbance measurements in the DPPH
test.
2.4. Extraction procedure
The procedure followed was according to Mellidis,
Papageorgiou, and Kokkalou (1993). The cartridge
was put in a Soxhlet apparatus (1 l) and extracted successively
with three solvents of increasing polarity ((a)
toluene, (b) dichloromethane, (c) methanol) until
decoloration (3 times). The three extracts obtained
were evaporated under vacuum to dryness. Their
weights were 2.82 g for toluene extract, 2.80 g for
dichloromethane extract and 136.41 g for methanol
extract.
108 g of the methanol dry extract was dissolved in 2 l
hot water. The water solution was filtered (residue 1:
2.68 g) and partitioned with diethyl ether, ethyl acetate
and n-butanol (6 · 150 ml). Organic layers of each of
the three solvents were dried with sodium sulphate
anhydrous (Merck p.a.), filtered and evaporated under
vacuum to dryness to give 1.02 g ether fraction, 1.39 g
ethyl acetate fraction, 9.65 g butanol fraction and 71.0
g of the remaining water fraction. The insoluble white
part of the aqueous methanolic extract after partition
between the above three solvents was carefully collected,
filtered, air-dried, weighed (residue 2: 0.53 g) and kept in
the fridge (0 C) together with the other extracts, under
nitrogen atmosphere, until use
2.1. Plant material
17.5 kg Greek oranges (Citrus sinensis), variety: Navel,
provenance: Leonidi–Tripoleos (Pelloponisos,
South Greece), season: Nov–Jan were bought from a local
supermarket.
The oranges were examined for their anatomy and
the variety was checked in the Laboratory of Arboriculture,
Department of Agriculture, Aristotle University of
Thessaloniki, Greece.
2.2. Sample preparation
Oranges were washed with tap water, peeled off sharply
in order to collect only the flavedo part of the peel
and air dried at room temperature (18–20 C) and darkness
for 12 days. The dried peels were crushed in a mixer
and 277.4 g of them were put into a cartridge made of
filter paper. The above amount of crushed peels was
large enough to be used for the isolation procedure later
on.
2.3. Chemicals and reagents
The solvents used in the present work were purchased
from Merck (Germany), Riedel-deHaen (Germany) and
Baker (Holland). Folin–Ciocalteu reagent, sodium carbonate,
CoCl2 Æ 6H2O and perhydrol 30% H2O2 were
purchased from Merck (Germany). Gallic acid 1-
hydrate was purchased from Panreac (Spain). DPPH
(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl 90%), EDTA, Luminol
(3-aminophtahydrazine) and boric acid were from
Sigma (Germany). Hesperidin was from Biochemika,
Fluka (Germany). All solvents and reagents were of
analytical grade.
Bradford cuvettes (22 · 22 mm) were used in the
Folin–Ciocalteu and CL tests. Disposable cuvettes
(1 cm · 1 cm· 4.5 cm) from Kartel (Italy) were used
for visible absorbance measurements in the DPPH
test.
2.4. Extraction procedure
The procedure followed was according to Mellidis,
Papageorgiou, and Kokkalou (1993). The cartridge
was put in a Soxhlet apparatus (1 l) and extracted successively
with three solvents of increasing polarity ((a)
toluene, (b) dichloromethane, (c) methanol) until
decoloration (3 times). The three extracts obtained
were evaporated under vacuum to dryness. Their
weights were 2.82 g for toluene extract, 2.80 g for
dichloromethane extract and 136.41 g for methanol
extract.
108 g of the methanol dry extract was dissolved in 2 l
hot water. The water solution was filtered (residue 1:
2.68 g) and partitioned with diethyl ether, ethyl acetate
and n-butanol (6 · 150 ml). Organic layers of each of
the three solvents were dried with sodium sulphate
anhydrous (Merck p.a.), filtered and evaporated under
vacuum to dryness to give 1.02 g ether fraction, 1.39 g
ethyl acetate fraction, 9.65 g butanol fraction and 71.0
g of the remaining water fraction. The insoluble white
part of the aqueous methanolic extract after partition
between the above three solvents was carefully collected,
filtered, air-dried, weighed (residue 2: 0.53 g) and kept in
the fridge (0 C) together with the other extracts, under
nitrogen atmosphere, until use
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.1 . วัสดุปลูก
17.5 กก. ส้มกรีก ( ส้มเช้ง ) ต่าง ๆ : สะดือ
ที่มา : leonidi – tripoleos ( pelloponisos
ใต้ , กรีซ ) ฤดูกาล : พ.ย. - ม.ค. ซื้อจากซุปเปอร์มาร์เก็ตท้องถิ่น
.
ส้มตรวจร่างกายของกายวิภาคศาสตร์และ
หลากหลายนำไปตรวจสอบในห้องปฏิบัติการรุกขกรรม
, กรมวิชาการเกษตร , อริสโตเติล มหาวิทยาลัย
Thessaloniki , กรีซ .
2.2 .
ตัวอย่างการเตรียมส้มถูกล้างด้วยน้ำประปา ปอกเปลือกออกอย่างรวดเร็ว
เพื่อรวบรวมเฉพาะฟลาเวโด ส่วนของเปลือก
และอากาศแห้งที่อุณหภูมิห้อง ( 18 – 20 C ) และความมืด
12 วัน เปลือกแห้งถูกบดในเครื่องปั่นและ G
277.4 ของพวกเขาถูกใส่เข้าไปในตลับหมึกที่ทำจาก
กระดาษกรอง จำนวนเงินข้างต้นของเปลือกบดคือ
มากพอที่จะใช้สำหรับขั้นตอนการแยกทีหลัง
.
2.3เคมีและสารเคมี
ละลายใช้ในงานปัจจุบันถูกซื้อ
จากเมอร์ค ( เยอรมนี ) , เดล dehaen ( เยอรมนี )
เบเกอร์ ( ฮอลแลนด์ ) folin – ciocalteu รีเอเจนต์ , โซเดียมคาร์บอเนต ,
cocl2 กู้ 6h2o perhydrol 30% และ H2O2 ได้
ซื้อจากเมอร์ค ( เยอรมนี ) เพิ่มขึ้น 1 -
hydrate ซื้อมาจาก panreac ( สเปน ) dpph
( 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl 90% ) , EDTA , ลูมินอล
( 3-aminophtahydrazine ) และกรดจาก
Sigma ( เยอรมนี ) จาก biochemika hesperidin , fluka
( เยอรมนี ) ตัวทำละลายและสารเคมีเกรดวิเคราะห์ถูก
.
แบรดฟอร์ดคิวเวทท ( 22 ด้วย 22 มม. ) จำนวน
folin – ciocalteu และการทดสอบ CL . ทิ้งคิวเวทท
( 1 ซม. ด้วย 1 ซม. ด้วย 4.5 ซม. ) จาก kartel ( อิตาลี ) ใช้สำหรับวัดค่าการดูดกลืนแสงในช่วงที่มองเห็นได้
dpph ทดสอบ 2.4 . ขั้นตอนการสกัด
ขั้นตอนที่ตามมาคือตาม mellidis
papageorgiou , และ kokkalou ( 1993 ) ตลับ
ถูกวางใน 1 เครื่อง ( 1 ลิตร ) และสกัดด้วยตัวทำละลายเพิ่มอย่างต่อเนื่อง
3 ขั้ว ( A )
โทลูอีน ( ข ) ไดคลอโรมีเทน ( C )
( เมทานอล ) จนกระทั่งขจัดสีออกไป 3 ครั้ง ) 3 สารสกัดจากที่ได้ระเหยภายใต้สุญญากาศ
เป็นแห้ง . น้ำหนักของพวกเขา
2 .82 กรัมสารสกัด , 2.80 g
สิ่งสกัด 136.41 กรัมสารสกัดเมทานอลและ
.
108 กรัมสารสกัดแห้งละลายในน้ำร้อน 2 ลิตร
. น้ำในสารละลายที่กรอง ( กาก 1 :
2.68 กรัม และโดยเฉพาะกับอีเทอร์เอทิลอะซีเตท และ n-butanol
, ( 6 ด้วย 150 ml ) อินทรีย์ของแต่ละชั้นแห้งด้วยตัวทำละลาย
3
( โซเดียมซัลเฟตรัสเมอร์ค จำกัด )กรองและระเหยภายใต้สุญญากาศแห้ง
ให้ 1.02 กรัมเศษ อีเทอร์ , 1.39 กรัม
เอทิลอะซิเตท เศษส่วน , 9.59 G บิวทานอลเศษส่วนและ 71.0
G ที่เหลือน้ำเศษส่วน น้ำสีขาว
ส่วนสารสกัดเมทานอลน้ำหลังจากที่พาร์ทิชัน
ระหว่างทั้งสามข้างต้นตัวทำละลายคือการเก็บรวบรวมอย่างระมัดระวัง
กรองอากาศแห้ง ชั่งน้ำหนัก ( กาก 2 : 0.53 กรัม ) และเก็บไว้ใน
ตู้เย็น ( 0 C ) ร่วมกับสารสกัดอื่นๆ ภายใต้บรรยากาศไนโตรเจนจนใช้
,
การแปล กรุณารอสักครู่..
