2.4. Species identification using s

2.4. Species identification using shortened primers
As a possible strategy to lower LOD of the multiplex PCR method,
severalnucleotides in the 50 endof the primerswere deleted to design
the truncated primers, which were 18e20 bp in length (Fig. 1). The
shortened primer sequences were as follows: forward common
primer SIM2 (50-AACATCTCATCATGATGAAA-30), mutton primer M2
(50-TGCTGTGGCTATTGTCGC-30), chicken primer C2 (50-GATGAA
GAAGAATGAGGCG-30), beef primer B2 (50-GTGTAAGACCCGTAATA
TAAG-30), and pork primer P2 (50-GTAGATTTGTGATGACCGTA-30).
Firstly, the PCR reactionwas run under the sameconditions as Section
2.3, and the products were electrophoresed on 2% agarose gel with
0.5 mg/ml ethidium bromide. Then, the optimal conditions of multiplex
PCR were investigated by adjusting the annealing temperature
and ratio of primers. The expected size of the amplified fragments for
chicken, beef, mutton and pork were 201 bp, 248 bp, 306 bp and
373 bp, respectively.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การระบุชนิดโดยใช้ไพรเมอร์สั้นลง
เป็นกลยุทธ์ที่เป็นไปได้เพื่อลด LOD ของวิธี PCR multiplex
severalnucleotides ใน 50 endof primerswere ลบในการออกแบบ
ไพรเมอร์ถูกตัดทอนซึ่งเป็น 18e20 bp ยาว (รูปที่ 1)
สั้นลำดับไพรเมอร์มีดังนี้ร่วมกันไปข้างหน้า
ไพรเมอร์ซิม 2 (50 aacatctcatcatgatgaaa-30), เนื้อแกะไพรเมอร์ m2
(50 tgctgtggctattgtcgc-30)ไพรเมอร์ไก่ c2 (50 gatgaa
gaagaatgaggcg-30), ไพรเมอร์เนื้อ b2 (50 gtgtaagacccgtaata
TAAG-30) และไพรเมอร์เนื้อหมู p2 (50 gtagatttgtgatgaccgta-30).
แรก reactionwas pcr ทำงานภายใต้ sameconditions เป็นส่วน
2.3 และผลิตภัณฑ์ที่ถูก electrophoresed บนเจล agarose 2% ด้วย
0.5 mg / ml ethidium โบรไมด์ แล้วเงื่อนไขที่ดีที่สุดของหลาย
PCR จากการตรวจสอบโดยการปรับอุณหภูมิการหลอม
และอัตราการใช้ไพรเมอร์ ขนาดที่คาดหวังของชิ้นส่วนเพื่อขยาย
ไก่, เนื้อวัวเนื้อแกะและเนื้อหมูได้ 201 bp, 248 bp, 306 bp และ 373 bp
ตามลำดับ.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 ใช้ระบุชนิดลดลงไพรเมอร์
เป็นกลยุทธ์ได้ลงลอดของวิธีการ multiplex PCR,
severalnucleotides ใน endof 50 primerswere ลบออกแบบ
สังกะสี การตัดวัสดุ bp 18e20 ยาว (Fig. 1) ซึ่ง ใน
พื้นย่อลำดับได้ดังนี้: ไปข้างหน้าร่วม
พื้น SIM2 (50-AACATCTCATCATGATGAAA-30), mutton รองพื้น M2
(50-TGCTGTGGCTATTGTCGC-30) ไก่รองพื้น C2 (50-GATGAA
GAAGAATGAGGCG-30), เนื้อรองพื้น B2 (50-GTGTAAGACCCGTAATA
taag บิน-30), และหมูพื้น p 2 (50-GTAGATTTGTGATGACCGTA-30) .
แรก ที่ PCR reactionwas รันภายใต้ sameconditions เป็นส่วน
2.3 และผลิตภัณฑ์ถูก electrophoresed ในเจ 2% agarose กับ
0.5 mg/ml โบรไมด์ ethidium แล้ว เงื่อนไขดีที่สุดของล็ก
PCR ถูกตรวจสอบ โดยการปรับอุณหภูมิหลอม
และอัตราส่วนของไพรเมอร์ ขนาดที่คาดไว้ของชิ้นส่วนเอาต์สำหรับ
ไก่ เนื้อ mutton และหมู 201 bp, 248 bp, 306 bp และ
373 bp ตามลำดับ.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การระบุสายพันธุ์โดยใช้ primers สั้นลง
ซึ่งจะช่วยเป็นกลยุทธ์ที่เป็นไปได้ในการลดวิธีการ pcr ลอดของแบบมัลติเพล็กซ์
severalnucleotides ใน 50 endof ที่ primerswere ที่ถูกลบออกจากการออกแบบ
primers ถูกตัดให้สั้นลงซึ่งมี 18 E 20 BP ในความยาว(รูปที่ 1 ) ซีเควนซ์
ซึ่งจะช่วยให้สั้นเชื้อปะทุได้ดังนี้ทั่วไปส่งต่อ
เชื้อปะทุซิมการ์ด 2 ( 50 - aacatctcatcatgatgaaa 30 )เนื้อแกะเชื้อปะทุม. 2
( 50 - tgctgtggctattgtcgc 30 )ไก่เชื้อปะทุ C 2 ( 50 - gatgaa
gaagaatgaggcg 30 ),เนื้อเชื้อปะทุ B 2 ( 50 - gtgtaagacccgtaata
taag 30 ),หมูและเชื้อปะทุ P 2 ( 50 - gtagatttgtgatgaccgta 30 )..
อันดับแรก,ที่ pcr reactionwas วิ่งตาม sameconditions มาตรา
2.3 ,และ ผลิตภัณฑ์ electrophoresed บน 2% agarose เจลพร้อมด้วย
0.5 มก./ ML ethidium ไม่น่าทึ่ง. จากนั้นจึงจะได้ผลดีที่สุดของ
ตามมาตรฐานแบบมัลติเพล็กซ์pcr เป็นการสอบสวนโดยการปรับ อุณหภูมิ annealing ที่
และอัตราของ primers คาดว่าจะมีขนาดของเศษแอมพลิฟายสำหรับ
เนื้อหมูและเนื้อแกะเนื้อไก่เนื้อวัวเป็น 201 BP 248 BP 306 BP และ
373 BP ตามลำดับ.