Tissue culture and reagents. The hu

Tissue culture and reagents. The human bronchial epithelial cells Calu-3
were cultured in Dulbecco’s modified Eagle’s medium/F12 supplemented with
10% (vol/vol) bovine growth serum and penicillin/streptomycin and grown at 37C
(5% CO2). Experiments were performed using Calu-3 cells between passages 25
and 50. Transformed human bronchial epithelial cells 16HBE, kindly donated by
Dr Gruenert, were grown in minimum essential media (InVitrogen) containing
10% fetal bovine serum, 2mM L-glutamine (InVitrogen), and penicillin/
streptomycin (InVitrogen) on collagen-coated (BD Biosciences) and fibronectin-coated (BD Biosciences) dishes. Primary HAEC were isolated after enzymatic
dissociation from trachea, bronchi, and bronchioles of adult donor lungs, seeded
onto collagen-coated semipermeable membranes (0.6 cm
2
, Millicell-HA;
Millipore, Bedford, MA), and grown at an air-liquid interface as previously
described (Baoet al., 2005;Karpet al., 2002). Human lungs were collected with
approval from The Ohio State University Institutional Review Board.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เนื้อเยื่อและ reagents มนุษย์ bronchial epithelial เซลล์ Calu-3มีอ่างในกลางของดุลเบกโกแก้ไขอีเกิลของ/เสริมด้วย F12เซรั่ม 10% (vol/vol) เจริญเติบโตของวัวและ streptomycin/ยา เพนนิซิลลิน และเติบโตที่ 37 C(5% CO2) ดำเนินการทดลองใช้เซลล์ทางเดิน 25 Calu-3และ 50 แปรรูปมนุษย์เซลล์ epithelial bronchial 16HBE กรุณาบริจาคโดยดร. Gruenert ถูกปลูกในต่ำสุดจำเป็นสื่อ (InVitrogen) ประกอบด้วย10% ครรภ์วัวซีรั่ม 2 มม. L glutamine (InVitrogen), และยาเพนนิซิลลิน /streptomycin (InVitrogen) เคลือบคอลลาเจน (BD เวลาออก) และอาหาร (เวลาออก BD) เคลือบ fibronectin หลัก HAEC ได้แยกหลังจากเอนไซม์ในระบบseeded dissociation จากหลอดลม หลอดลม และ bronchioles ผู้ใหญ่บริจาคปอดบนเคลือบคอลลาเจน semipermeable เยื่อหุ้ม (0.6 ซม.2, Millicell-ฮามาก กลาสโกว์ MA), และเติบโตที่อินเทอร์เฟซของเหลวอากาศเป็นก่อนหน้านี้อธิบาย (Baoet al., 2005 Karpet al., 2002) ปอดมนุษย์ถูกเก็บรวบรวมด้วยอนุมัติจากโอไฮโอรัฐมหาวิทยาลัยสถาบันคณะกรรมการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อและสารเคมี เซลล์เยื่อบุผิวหลอดลมมนุษย์ Calu-3
มาเลี้ยงใน Dulbecco ของการปรับเปลี่ยนขนาดกลางอินทรี / F12 เสริมด้วย
10% (ฉบับ / ปริมาตร) ซีรั่มการเติบโตของวัวและยา streptomycin / และเติบโตขึ้นที่ 37 องศาเซลเซียส
(CO2 5%) การทดลองดำเนินการโดยใช้ Calu-3 เซลล์ระหว่างทางเดิน 25
และ 50 เปลี่ยนเซลล์เยื่อบุผิวหลอดลมมนุษย์ 16HBE บริจาคกรุณา
ดร Gruenert ถูกปลูกในสื่อสิ่งจำเป็นขั้นต่ำ (Invitrogen) ที่มี
ในซีรั่มของทารกในครรภ์วัว 10% 2mm L-glutamine (Invitrogen) และยาปฏิชีวนะ /
streptomycin (Invitrogen) ในคอลลาเจนเคลือบ (BD ชีววิทยาศาสตร์) และ fibronectin เคลือบ (BD ชีววิทยาศาสตร์) อาหาร ประถม HAEC ถูกแยกเอนไซม์หลังจาก
แยกตัวออกจากหลอดลมหลอดลมและปอดหลอดลมของผู้บริจาคผู้ใหญ่เมล็ด
ลงบนคอลลาเจนเคลือบเยื่อ semipermeable (0.6 ซม.
2
, Millicell-HA;
ค, ฟอร์ด, แมสซาชูเซต) และการเติบโตในการติดต่อทางอากาศของเหลว ก่อนหน้านี้เป็น
ที่อธิบาย (Baoet อัล, 2005.. Karpet อัล, 2002) ปอดของมนุษย์ที่ถูกเก็บรวบรวมด้วย
ความเห็นชอบจากมหาวิทยาลัยโอไฮโอสเตสถาบันคณะกรรมการตรวจสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อและ reagents มนุษย์การเพาะเลี้ยงในเซลล์เยื่อ calu-3
ดัลเบโค่การนกอินทรีขนาดกลาง / F12 เสริม
10 % ( ปริมาตร / ปริมาตร ) การเจริญเติบโตของวัวและสเตร็ปโตมัยซิน และโตที่เพนนิซิลลิน / 37  C
( คาร์บอนไดออกไซด์ 5 เปอร์เซ็นต์ ) ทดลองใช้เซลล์ calu-3 ระหว่างหัวข้อและ 25
50 เปลี่ยนมนุษย์เซลล์เยื่อหลอดลม 16hbe กรุณาบริจาคโดยดร. gruenert
,เติบโตในสื่อที่จำเป็นขั้นต่ำ ( Invitrogen ) ที่มีซีรั่มโค
10% fetal 2mm Glutamine ( Invitrogen ) และเพนนิซิลิน /
สเตรปโตมัยซิน ( Invitrogen ) คอลลาเจนเคลือบ ( BD BIOSCIENCES ) และไฟโบรเนกตินเคลือบ ( BD BIOSCIENCES ) จาน หากการแยกเอนไซม์
หลังจากการจากหลอดลมใหญ่หลอดลม และหลอดลมของปอดผู้บริจาคเมล็ด
ผู้ใหญ่บนเยื่อคอลลาเจนเคลือบยา ( 0.6 cm
2
, millicell ฮา ;
มิลลิ , ฟอร์ด , MA ) และเติบโตขึ้นในอากาศ ของเหลว อินเตอร์เฟซที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
( baoet al . , 2005 ; karpet al . , 2002 ) ปอดของมนุษย์ถูกเก็บด้วย
การอนุมัติจากรัฐ มหาวิทยาลัย สถาบัน คณะกรรมการตรวจสอบ .