1.8. Indirect immunofluorescence as

1.8. Indirect immunofluorescence assays
MDCK cells were mock-infected or infected (MOI 1.0) with WT or fluorescent-expressing IBVs. At 18 hpi, cells were fixed with 4% PFA and permeabilized with 0.5% Triton X-l 00 in PBS for 15 min at room temperature. The staining was performed as described pre¬viously (Nogales et al„ 2014a), using primary IBV NP (MAb B017; Abeam) or NS1 (PAb) (Dauber et al„ 2006) antibodies, and FITC- conjugated anti-mouse (NP) or anti-rabbit (NS1) antibodies (Dako). The cell nucleus were stained with 4',6'-diamidino-2-phenylindole (DAPI, Research Organics). Images were captured using a fluores¬cence microscope (Nikon Eclipse TE2000) at X20 magnification, and pictures were processed using Adobe Photoshop CS4 (vll.0) software.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1.8. อ้อม immunofluorescence assaysเซลล์ MDCK ได้จำลองการติดเชื้อ หรือติดเชื้อ (MOI 1.0) WT หรือแสดงเรือง IBVs ที่ 18 hpi เซลล์ได้คงที่ 4% PFA และ permeabilized กับ 0.5% Triton X l 00 ใน PBS 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง การย้อมสีทำเป็น pre¬viously อธิบายไว้ (Nogales et al " 2014a), ใช้หลัก IBV NP (มาบ B017 Abeam) หรือ NS1 แอนตี้ (PAb) (Dauber et al " 2006) และ FITC - รวมกันต่อต้านเมาส์ (NP) หรือแอนตี้ต่อต้านกระต่าย (NS1) (Dako) นิวเคลียสเซลล์ถูกย้อม ด้วย 4', 6'-diamidino-2-phenylindole (DAPI วิจัยอินทรีย์) ภาพที่ถ่ายโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ fluores¬cence (Nikon คราส TE2000) X 20 ขยาย และรูปภาพที่ถูกประมวลผลโดยใช้ Adobe Photoshop CS4 ซอฟต์แวร์ (vll.0)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1.8 อิมมูโนตรวจอ้อม
เซลล์ MDCK ถูกเยาะเย้ยที่ติดเชื้อหรือติดเชื้อ (MOI 1.0) กับ IBVs WT-หรือเรืองแสงการแสดง ณ วันที่ 18 HPI เซลล์ได้รับการแก้ไขด้วย 4% PFA และ permeabilized 0.5% Triton Xl 00 ในพีบีเอสเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ย้อมสีได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้pre¬viously (Nogales et al, "2014a) โดยใช้หลักหลอดลมอักเสบติดต่อ NP (แอนติบอดี B017; ABeam) หรือ NS1 (PAB) (แต้มสี et al," 2006) แอนติบอดีและ FITC- ผันป้องกันเมาส์ (NP ) หรือป้องกันกระต่าย (NS1) แอนติบอดี (Dako) นิวเคลียสของเซลล์ที่ถูกย้อมด้วยสี 4 ', 6'-diamidino-2-phenylindole (DAPI, Organics) การวิจัย ภาพที่ถูกจับโดยใช้กล้องจุลทรรศน์fluores¬cence (Nikon คราส TE2000) ที่ X20 ขยายและภาพที่ถูกประมวลผลโดยใช้ Adobe Photoshop CS4 (vll.0) ซอฟแวร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1.8 ใช้วิธีทางอ้อมmdck เซลล์ถูกเยาะเย้ยที่ติดเชื้อหรือติดเชื้อ ( มัว 1.0 ) กับ WT หรือเรืองแสงแสดง ibvs . ที่ 18 ชั่วโมง เซลล์ถูกกำหนดด้วยพีเอฟเอ 4 % และ permeabilized กับ 0.5% Triton x-l 00 ใน PBS 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ย้อมได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อน¬ viously ( โนกาเลส et al „ 2014a ) , การใช้ NP IBV หลัก ( มาบ b017 ; บีม ) หรือ 1 ( PAB ) ( แต้มสี et al „ 2006 ) แอนติบอดีและ fitc - ผลิตภัณฑ์ป้องกันเมาส์ ( NP ) หรือป้องกันกระต่าย ( 1 ) ภูมิคุ้มกัน ( ทางหนึ่ง ) เซลล์นิวเคลียสถูกย้อมด้วย 4 ' , 6 ' - diamidino-2-phenylindole ( Organics วิจัย dapi ) ภาพถูกจับโดยใช้ fluores ¬ cence กล้องจุลทรรศน์ ( Nikon คราส te2000 ) แว่นตากันแดดขยายและภาพที่ถูกประมวลผลโดยใช้โปรแกรม Adobe Photoshop CS4 ( 7 0 ) ซอฟต์แวร์