Chemical constituents and biologica

Chemical constituents and biological investigations of the aerial parts of Egyptian Clerodendrum inerme
Sabrin R.M. Ibrahima, , , Khalid Z. Alshalib, Mostafa A. Fouadc, Ehab S. Elkhayatd, Rwaida A. Al Haidarie, Gamal A. Mohamedd
Show more
doi:10.1016/j.bfopcu.2014.05.002
Get rights and content
Open Access funded by Faculty of Pharmacy, Cairo University
Under a Creative Commons license
Abstract
B-friedoolean-5-ene-3-β-ol (1), β-sitosterol (2), stigmasta-5,22,25-trien-3-β-ol (3), betulinic acid (4), and 5-hydroxy-6,7,4′-trimethoxyflavone (5) were isolated from the aerial parts of Clerodendrum inerme L. (Verbenaceae). Their structures were established based on analyses of physical and spectroscopic data. Compounds 1, 4, and 5 were isolated for the first time from the plant. C. inerme L. was known as a rich source of terpenes, sterols, and phenolic compounds, so the antioxidant and anti-inflammatory activities were evaluated. The total methanolic extract (TME) and compound 5 showed scavenging activity with maximum inhibition of 61.84% for TME (100 μg/mL) and 37.19% for 5 (20 μM), respectively, using DPPH assay. In addition, the TME exhibited anti-inflammatory activity more than indomethacin at dose 200 mg/kg using the formalin induced hind paw edema method.

Keywords
Clerodendrum inerme; Verbenaceae; Triterpenes; Antioxidant; Anti-inflammatory
1. Introduction
The genus Clerodendrum (Family: Verbenaceae) is very widely distributed in tropical and subtropical regions of the world. More than five hundred species of the genus were identified. 1 They include small trees, shrubs, and herbs. 1C. inerme is a shrub distributed in South and South-east Asia, Australia, and Pacific islands. The plant is used in the treatment of scrofulous and venereal infections, and also as an antidote for poisoning from fish, crabs, and toadstools. 2 The fresh leaf juice is used externally for treating skin diseases. Moreover, the roots are boiled in oil and used in rheumatic affections. 3 and 4 The plant had been shown to possess antimicrobial, anti-coagulants, uterine stimulant, hypertensive, and laxative effects. 3 and 4 Previous phytochemical studies of this plant lead to the isolation of sterols, 5 and 6 flavones, 7 clerodane diterpenes, 8 and 9 neolignans, 10 iridoid glycosides, 11 and 12 and triterpenes. 13 As part of our ongoing study on Egyptian plants, we investigated the constituents of C. inerme L. (Verbenaceae). The present study reports the isolation and structural elucidation of five compounds: B-friedoolean-5-ene-3-β-ol (1), 14β-sitosterol (2), 15 stigmasta-5,22,25-trien-3-β-ol (3), 16 and 17 betulinic acid (4), 18 and 19 and 5-hydroxy-6,7,4′-trimethoxyflavone (5). 20 The anti-inflammatory activity of the TME at different doses using the formalin induced hind paw edema method and indomethacin as standard was evaluated. Also, the TME and compound 5 were tested for their antioxidant activity using DPPH assay compared with propyl gallate (standard synthetic antioxidant).

2. Experimental
2.1. General procedures
Melting points were carried out using an Electrothermal 9100 Digital Melting Point apparatus (Electrothermal Engineering Ltd, Essex, England). The UV spectrum was determined using a Perkin Elmer double beam spectrophotometer Model 550S, attached to a Hitachi recorder Model 561, using a 1 cm quartz cell. The IR spectra were measured on a Shimadzu Infrared-400 spectrophotometer (Kyoto, Japan). EIMS were recorded on a Finnigan MAT TSQ 7000 mass spectrometer. 1D and 2D NMR spectra (chemical shifts in ppm, coupling constants in Hz) were recorded on a Bruker BioSpin GmbH 400 MHz Ultrashield spectrometer using CDCl3 as solvent, with TMS as the internal reference. Solvents were distilled prior to spectroscopic measurements. Column chromatographic separations were performed on SiO2 60 (0.04–0.063 mm, Merck). TLC was performed on pre-coated TLC plates with SiO2 60 F254 (0.2 mm, Merck). The solvent systems used for TLC analyses were n-hexane:EtOAc (90:10, S1), n-hexane:EtOAc (85:15, S2), and CHCl3:MeOH (95:5, S3). The compounds were detected by UV absorption at λmax 255 and 366 nm followed by spraying with anisaldehyde:H2SO4 reagent and heating at 110 °C for 1–2 min.

2.2. Plant material
Clerodendron inerme L. aerial parts were collected in March 2009 from the botanical garden, Faculty of Agriculture, Assiut University and were authenticated by Dr. Abdulaziz. A. Fayed, Prof. of Plant Taxonomy, Faculty of Science, Assiut University, Assiut, Egypt. A voucher specimen was deposited at the Department of Pharmacognosy, Faculty of Pharmacy, Minia University, Minia, Egypt (Registration code CIS-2009).

2.3. Extraction and isolation
The air-dried powdered aerial parts of C. inerme (400 g) were extracted with 70% MeOH (4 × 1.5 L) at room temperature. The combined methanol extract was concentrated under reduced pressure to afford a dark green residue (27.5 g). The TME (2.5 g) was kept for biological study. The TME (25.0 g) was subjected to vacuum liquid chromatography (VLC) using n-hexane:EtOAc and EtOAc:MeOH gradients to afford six fractions: CI-1 (5.4 g; n-hexane, 100%), CI-2 (3.4 g; n-hexane:CHCl3, 50:50), CI-3 (3.1 g; CHCl3, 100%), CI-4 (2.9 g; CHCl3:EtOAc, 50:50), CI-5 (2.1 g; EtOAc, 100%), and CI-6 (6.5 g; MeOH, 100%). CI-2 (3.4 g) was subjected to SiO2 column chromatography (160 g × 50 cm × 2 cm) using n-hexane:EtOAc gradient to afford compounds 1 (8.7 mg, white crystals) and 2 (11.2 mg, colorless needles). Fraction CI-3 (3.1 g) was chromatographed over SiO2 column (140 g × 50 cm × 2 cm) using n-hexane:EtOAc gradient to obtain compounds 3 (5.4 mg, colorless needles) and 4 (5.6 mg, colorless needles). SiO2 column chromatography (120 g × 50 cm × 2 cm) of fraction CI-4 (2.9 g) using n-hexane:EtOAc as an eluent gave 5 (14 mg, yellow crystals). Other fractions were kept for further investigations.

D:B-friedoolean-5-ene-3-β-ol (1): It was obtained as white crystals (8.7 mg, MeOH); Rf 0.79 (S1). m.p. 211–212 °C. EIMS: m/z 426 [M]+. IR (KBr): γmax 3440, 2890, 1040 cm−1. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δH 1.48 (2H, m, H-1), 1.85 (1H, m, H-2A), 1.72 (1H, m, H-2B), 3.48 (1H, t, J = 2.9 Hz, H-3), 5.64 (1H, d, J = 6.0 Hz, H-6), 2.02 (1H, m, H-7A), 1.68 (1H, m, H-7B), 1.55 (1H, m, H-8), 0.90 (1H, m, H-10), 1.38 (2H, m, H-11), 1.35 (1H, m, H-12A), 1.27 (1H, m, H-12B), 1.52 (1H, m, H-15A), 0.93 (1H, m, H-15B), 1.40 (1H, m, H-16A), 1.23 (1H, m, H-16B), 1.59 (1H, m, H-18), 1.53 (2H, m, H-19), 1.60 (2H, m, H-21), 1.39 (2H, m, H-22), 1.04 (3H, s, H-23), 1.14 (3H, s, H-24), 0.85 (3H, s, H-25), 1.09 (3H, s, H-26), 1.00 (3H, s, H-27), 1.16 (3H, s, H-28), 0.95 (3H, s, H-29), 0.99 (3H, s, H-30). 13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δC 18.2 (C-1), 27.8 (C-2), 76.5 (C-3), 40.5 (C-4), 141.8 (C-5), 122.5 (C-6), 23.5 (C-7), 47.5 (C-8), 34.6 (C-9), 50.1 (C-10), 34.4 (C-11), 30.5 (C-12), 39.3 (C-13), 37.8 (C-14), 32.0 (C-15), 36.0 (C-16), 30.1 (C-17), 43.2 (C-18), 35.0 (C-19), 28.5 (C-20), 33.2 (C-21), 38.9 (C-22), 28.5 (C-23), 25.6 (C-24), 16.2 (C-25), 19.5 (C-26), 18.4 (C-27), 32.2 (C-28), 34.6 (C-29), 32.2 (C-30). 14

β-Sitosterol (2): It was isolated as colorless needles (11.2 mg, acetone); Rf = 0.73 (S1). m.p. 139–140 °C. IR (KBr): γmax 3455, 2940, 1617, 1454, 1385, 1062 cm−1. EIMS: m/z 414 [M]+. NMR data (400 and 100 MHz, CDCl3) are in good agreement with the published data. 15

Stigmasta-5,22,25-trien-3-β-ol (3): It was obtained as colorless needles (5.4 mg, acetone); Rf 0.61 (S1). m.p. 158–160 °C. IR (KBr): γmax 3340, 2940, 1640, 1060 cm−1. EIMS: m/z 410 [M]+. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δH 1.80 (1H, m, H-1A), 1.10 (1H, m, H-1B), 1.79 (1H, m, H-2A), 1.36 (1H, m, H-2B), 3.55 (1H, m, H-3), 1.70 (1H, m, H-4A), 1.26 (1H, m, H-4B), 5.35 (1H, d, J = 5.0 Hz, H-6), 1.62 (1H, m, H-7A), 1.28 (1H, m, H-7B), 1.55 (1H, m, H-8), 1.65 (1H, m, H-9), 1.72 (1H, m, H-11A), 1.49 (1H, m, H-11B), 2.04 (2H, m, H-12), 1.80 (1H, m, H-14), 1.52 (1H, m, H-15A), 1.40 (1H, m, H-15B), 1.66 (1H, m, H-16A), 1.25 (1H, m, H-16B), 1.24 (1H, m, H-17), 0.55 (3H, s, H-18), 0.80 (3H, s, H-19), 2.01 (1H, m, H-20), 1.02 (3H, d, J = 6.5 Hz, H-21), 5.25 (1H, dd, J = 15.5, 7.8 Hz, H-22), 5.21 (1H, dd, J = 15.5, 7.8 Hz, H-23), 2.42 (1H, m, H-24), 1.65 (3H, s, H-26), 4.69 (1H, s, H-27A), 4.67 (1H, s, H-27B), 0.84 (3H, t, J = 7.5 Hz, H-29). 13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δC 37.2 (C-1), 38.1 (C-2), 71.1 (C-3), 39.5 (C-4), 140.7 (C-5), 121.6 (C-6), 31.6 (C-7), 40.5 (C-8), 49.5 (C-9), 34.2 (C-10), 21.5 (C-11), 29.6 (C-12), 43.5 (C-13), 55.1 (C-14), 23.0 (C-15), 28.5 (C-16), 55.9 (C-17), 12.0 (C-18), 13.1 (C-19), 40.3 (C-20), 20.9 (C-21), 138.3 (C-22), 129.2 (C-23), 52.1 (C-24), 148.5 (C-25), 20.2 (C-26), 109.5 (C-27), 25.6 (C-28), 12.2 (C-29). 16 and 17

Betulinic acid (4): It was obtained as colorless needles (5.6 mg, acetone); Rf 0.41 (S2), m.p. 292–293 °C. EIMS: m/z 456 [M]+. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δH 1.19 (2H, m, H-1), 1.56 (2H, m, H-2), 3.19 (1H, m, H-3), 0.65 (1H, m, H-5), 1.42 (2H, m, H-6), 1.47 (2H, m, H-7), 1.25 (1H, m, H-9), 1.23 (2H, m, H-11), 1.68 (1H, m, H-12A), 1.30 (1H, m, H-12B), 2.20 (1H, dd, J = 9.5, 3.6, H-13), 2.27 (1H, m, H-15A), 1.54 (1H, m, H-15B), 2.37 (1H, m, H-16A), 1.50 (1H, m, H-16B), 1.61 (1H, m, H-18), 3.01 (1H, dt, J = 8.5, 4.0 Hz, H-19), 1.96 (1H, m, H-21A), 1.42 (1H, m, H-21B), 1.97 (2H, m, H-22), 0.96 (3H, s, H-23), 0.75 (3H, s, H-24), 0.82 (3H, s, H-25), 0.93 (3H, s, H-26), 0.97 (3H, s, H-27), 4.74 (1H, s, H-29A), 4.51 (1H, s, H-29B), 1.69 (3H, s, H-30). 13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δC 38.7 (C-1), 27.4 (C-2), 78.9 (C-3), 38.8 (C-4), 55.3 (C-5), 18.2 (C-6), 34.3 (C-7), 40.7 (C-8), 50.5 (C-9), 37.2 (C-10), 20.8 (C-11), 25.5 (C-12), 38.3 (C-13), 42.4 (C-14), 30.5 (C-15), 32.1 (C-16), 56.3 (C-17), 46.9 (C-18), 49.2 (C-19), 150.4 (C-20), 29.7 (C-21), 37.0 (C-22), 28.0 (C-23), 15.3 (C-24), 16.0 (C-25), 16.1 (C-26), 14.7 (C-27), 180.1 (C-28), 110.0 (C-29), 19.3 (C-30). 18 and 19

5-Hydroxy-6,7,4′-trimethoxyflavone (5): It was obtained as yellow crystals (14 mg, MeOH); R

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Constituents เคมีและชีวภาพสืบสวนส่วนทางอากาศของอียิปต์มังกร inermeSabrin R.M. Ibrahima ,, คาลิด Alshalib z. Mostafa A. Fouadc, Ehab S. Elkhayatd, Rwaida A. Al Haidarie, Gamal A. Mohamedd ดูเพิ่มเติมdoi:10.1016/j.bfopcu.2014.05.002ได้รับสิทธิและเนื้อหาเปิดเข้าได้รับการสนับสนุน โดยคณะเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัยไคโรภายใต้ใบอนุญาตครีเอทีฟคอมมอนส์บทคัดย่อB-friedoolean-5-ene-3-β-ol (1), β-sitosterol (2), stigmasta-5,22,25-trien-3-β-ol (3), betulinic กรด (4), และ 5-hydroxy 6,7, 4′-trimethoxyflavone (5) ถูกแยกจากส่วนทางอากาศของมังกร inerme L. (Verbenaceae) โครงสร้างของพวกเขาได้ก่อตั้งตามการวิเคราะห์ข้อมูลทางกายภาพ และด้าน สาร 1, 4 และ 5 ถูกแยกเป็นครั้งแรกจากโรงงาน C. inerme L. ถูกเรียกว่าเป็นแหล่งอุดม ของ terpenes สเตอรอลส์ ม่อฮ่อม เพื่อที่สารต้านอนุมูลอิสระ และมีประเมินกิจกรรมแก้อักเสบ รวม methanolic แยก (แต่งตั้ง) และผสม 5 แสดงกิจกรรม scavenging กับ 61.84% ยับยั้งสูงสุดในการแต่งตั้ง (100 μg/mL) 37.19% สำหรับ 5 (20 μM), และ ตามลำดับโดยใช้ DPPH วิเคราะห์ นอกจากนี้ การแต่งตั้งจัดแสดงกิจกรรมแก้อักเสบมากกว่า 200 มิลลิกรัม/กก.โดยใช้วิธี formalin เกิดตีนหลังได้แก่ยา indomethacin ในคำสำคัญมังกร inerme Verbenaceae หม่อน สารต้านอนุมูลอิสระ ต้านการอักเสบ1. บทนำตระกูลนี้มังกร (ครอบครัว: Verbenaceae) กระจายในภาค ร้อนของโลกอย่างกว้างขวางมากขึ้น กว่าห้าร้อยพันธุ์ตระกูลนี้ได้ระบุ 1 จะมีต้นไม้ขนาดเล็ก สนุกสนาน และสมุนไพร 1C. inerme เป็นพุ่มไม้ที่แจกจ่ายในหมู่เกาะใต้ และเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ ออสเตรเลีย แปซิฟิก และ โรงงานใช้ในการบำบัดรักษา ของการติดเชื้อ scrofulous และ venereal และยัง เป็นยาแก้การเป็นพิษจากปลา ปู และ toadstools น้ำ 2 ใบสดใช้ภายนอกสำหรับรักษาโรคผิวหนัง นอกจากนี้ รากที่ต้มในน้ำมัน และใช้ใน rheumatic affections 3 และ 4 โรงงานมีการแสดงให้มีจุลินทรีย์ coagulants ป้องกัน กระตุ้นมดลูก hypertensive และผล laxative 3 และ 4 ก่อนหน้าสารพฤกษเคมีศึกษานี้นำไปสู่การแยกสเตอรอลส์ 5 และ 6 flavones, 7 clerodane diterpenes, 8 และ 9 neolignans, 10 iridoid glycosides, 11 และ 12 และหม่อน 13 เป็นส่วนหนึ่งของพืชอียิปต์ศึกษาอย่างต่อเนื่องของเรา เราสอบสวน constituents ของ C. inerme L. (Verbenaceae) การศึกษานำเสนอรายงาน elucidation แยกและโครงสร้างของสาร 5: B-friedoolean-5-ene-3-β-ol (1), 14β-sitosterol (2), (3) stigmasta-5,22,25-trien-3-β-ol 15, 16 และ 17 betulinic กรด (4), 18 และ 19 และ 5-hydroxy-6,7, 4′-trimethoxyflavone (5) 20 แก้อักเสบกิจกรรมของแต่งตั้งที่ใช้ formalin ในปริมาณแตกต่างกันทำให้เกิดวิธีได้แก่ตีนหลัง และ indomethacin เป็นมาตรฐานที่ประเมิน ยัง การแต่งตั้งและ 5 ผสมถูกทดสอบสำหรับกิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระโดยใช้ DPPH วิเคราะห์เปรียบเทียบกับ propyl gallate (มาตรฐานสังเคราะห์สารต้านอนุมูลอิสระ)2. ทดลอง2.1 การขั้นตอนที่ทั่วไปจุดหลอมเหลวถูกนำออกใช้เครื่องมือ Electrothermal 9100 ดิจิตอลจุดหลอมเหลว (Electrothermal วิศวกรรม จำกัด เอสเซ็กซ์ อังกฤษ) กำหนดคลื่น UV ใช้เป็นเพอร์เอลเมอคานคู่เครื่องทดสอบกรดด่างรุ่น 550S แนบบันทึกฮิตาชิรุ่น 561 ใช้เซลล์ควอตซ์ 1 ซ.ม. แรมสเป็คตรา IR ได้วัดบนเป็นอินฟราเรด Shimadzu 400 เครื่องทดสอบกรดด่าง (เกียวโต ญี่ปุ่น) EIMS ได้บันทึกไว้ในสเปกโตรมิเตอร์มวล 7000 TSQ พรม Finnigan 1D และ 2D NMR แรมสเป็คตรา (เคมีกะใน ppm ค่าคงที่ใน Hz coupling) ถูกบันทึกไว้ในสเปกโตรมิเตอร์ Bruker BioSpin GmbH 400 MHz Ultrashield ที่ใช้ CDCl3 เป็นตัวทำละลาย กับ TMS เป็นการอ้างอิงภายใน หรือสารทำละลายได้กลั่นก่อนประเมินด้าน คอลัมน์ chromatographic ประโยชน์ดำเนินบน SiO2 60 (0.04-0.063 มม. เมอร์ค) TLC ที่ดำเนินการบนแผ่น TLC ก่อนเคลือบด้วย SiO2 60 F254 (0.2 mm เมอร์ค) ระบบตัวทำละลายที่ใช้สำหรับวิเคราะห์ TLC มีเอ็น-เฮกเซน: EtOAc (90:10, S1), n-เฮกเซน: EtOAc (85:15, S2), และ CHCl3:MeOH (95:5, S3) สารที่พบ โดยการดูดซึม UV ใน λmax 255 และ 366 nm ตาม ด้วยพ่น ด้วยรีเอเจนต์ anisaldehyde:H2SO4 และความร้อนที่ 110 ° C สำหรับ 1 – 2 นาที2.2. พืชวัสดุClerodendron inerme L. ส่วนทางอากาศถูกเก็บรวบรวมในเดือน 2552 มีนาคมจากสวนพฤกษศาสตร์ คณะเกษตร มหาวิทยาลัย Assiut และมีการรับรองความถูกต้อง โดยดร.อับดุล A. fayed รศ.อนุกรมวิธานพืช คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัย Assiut, Assiut อียิปต์ ตัวอย่างสำคัญถูกฝากที่ภาควิชาเภสัชเวท คณะเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัย Minia, Minia อียิปต์ (รหัสลงทะเบียน CIS-2009)2.3 การสกัดและแยกAir-dried ส่วนทางอากาศผงของ C. inerme (400 กรัม) ถูกสกัด ด้วย 70% ทานอ (4 × 1.5 L) ที่อุณหภูมิห้อง สารสกัดเมทานอลรวมเข้มข้นภายใต้ความดันลดความเข้มสีเขียวตกค้าง (27.5 กรัม) ซื้อได้ แต่งตั้ง (2.5 g) เก็บไว้ศึกษาชีวภาพ แต่งตั้ง (25.0 g) ถูกต้องดูดของเหลว chromatography (VLC) โดยใช้เอ็น-เฮกเซน: EtOAc และ EtOAc:MeOH ไล่ระดับสีซื้อได้เศษ 6: CI-1 (5.4 g เอ็นเฮกเซน 100%), CI-2 (3.4 g; n-เฮกเซน: CHCl3 คนละครึ่ง), CI-3 (3.1 g CHCl3, 100%), CI-4 (2.9 g CHCl3:EtOAc คนละครึ่ง), CI-5 (2.1 g EtOAc, 100%), และ CI-6 (6.5 g ทานอ 100%) CI-2 (3.4 กรัม) ถูกต้อง SiO2 คอลัมน์ chromatography (160 g × 50 ซม.× 2 เซนติเมตร) โดยใช้เอ็น-เฮกเซน: EtOAc ไล่ระดับการจ่ายสาร 1 (8.7 มิลลิกรัม ขาวผลึก) และ 2 (11.2 มก. เข็มไม่มีสี) เศษส่วน CI-3 (3.1 กรัม) มี chromatographed ผ่านคอลัมน์ SiO2 (140 g × 50 ซม.× 2 เซนติเมตร) โดยใช้เอ็น-เฮกเซน: EtOAc ไล่ระดับสีได้รับสารประกอบ 3 (5.4 มิลลิกรัม เข็มไม่มีสี) และ 4 (5.6 มิลลิกรัม เข็มไม่มีสี) SiO2 คอลัมน์ chromatography (120 g × 50 cm × 2 cm) ของเศษส่วน CI-4 (2.9 g) โดยใช้เอ็น-เฮกเซน: EtOAc เป็น eluent 5 (14 มิลลิกรัม เหลืองผลึก) ให้ ส่วนอื่น ๆ ที่ถูกเก็บไว้สำหรับตรวจสอบเพิ่มเติมD:B-friedoolean-5-ene-3-β-ol (1): มันถูกรับเป็นผลึกสีขาว (8.7 มิลลิกรัม ทานอ); Rf 0.79 (S1) m.p. 211-212 องศาเซลเซียส EIMS: m/z 426 [M] + (KBr) IR: γmax 3440, 2890, 1040 cm−1 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): 1.48 (2H, m, H-1), δH 1.85 (1H, m, H-2A), 1.72 (1H, m, H-2B), 3.48 (1H, t, J = 2.9 Hz, H-3), 5.64 (1H, d, J = 6.0 Hz, H-6), 2.02 (1H, m, H-7A), 1.68 (1H, m, H-7B), 1.55 (1H, m, H-8), 0.90 (1H, m, H 10), 1.38 (2H, m, H-11), 1.35 (1H, m, H-12A), 1.27 (1H, m, H-12B), 1.52 (1H, m, H-15A), 0.93 (1H, m, H-15B), 1.40 (1H, m, H-16A), 1.23 (1H, m, H-16B), 1.59 (1H, m, H-18), 1.53 (2H, m, H-19), 1.60 (2H, m, H-21), 1.39 (2H, m, H-22), 1.04 (3H, s, H-23), 1.14 (3H, s, H-24), 0.85 (3H, s, H-25), 1.09 (3H, s, H-26), 1.00 (3H, s, H-27), 1.16 (3H, s, H-28), 0.95 (3H, s, H-29), 0.99 (3H, s, H-30) 13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δC 18.2 (C-1), 27.8 (C-2), 76.5 (C-3), 40.5 (C-4), 141.8 (C-5), 122.5 (C-6), 23.5 (C-7), 47.5 (C-8), 34.6 (C-9), 50.1 (C-10), 34.4 (C-11), 30.5 (C-12), 39.3 (C-13), 37.8 (C-14), 32.0 (C-15), 36.0 (C-16), 30.1 (C-17), 43.2 (C-18), 35.0 (C-19), 28.5 (C-20), 33.2 (C-21), 38.9 (C-22), 28.5 (C-23), 25.6 (C-24), 16.2 (C-25), 19.5 (C-26), 18.4 (C-27), 32.2 (C-28), 34.6 32.2 (C-29), (C-30) 14Β-Sitosterol (2): ก็แยกเป็นเข็มไม่มีสี (11.2 มก. อะซิโตน); Rf = 0.73 (S1) m.p. 139 – 140 องศาเซลเซียส IR (KBr): γmax 3455, 2940, 1617, 1454, 1385, 1062 cm−1 EIMS: m/z 414 [M] + ข้อมูล NMR (400 และ 100 MHz, CDCl3) อยู่ในข้อตกลงที่ดีกับการเผยแพร่ข้อมูล 15Stigmasta-5,22,25-trien-3-β-ol (3): จะได้รับเป็นเข็มไม่มีสี (5.4 มิลลิกรัม อะซิโตน); Rf 0.61 (S1) m.p. 158-160 องศาเซลเซียส (KBr) IR: γmax 3340, 2940, 1640, 1060 cm−1 EIMS: m/z 410 [M] + 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δH 1.80 (1H, m, H-1A), 1.10 (1H, m, H-1B), 1.79 (1H, m, H-2A), 1.36 (1H, m, H-2B), 3.55 (1H, m, H-3), 1.70 (1H, m, H-4A), 1.26 (1H, m, H-4B), 5.35 (1H, d, J = 5.0 Hz, H-6), 1.62 (1H, m, H-7A), ถึง 1.28 (1H, m, H-7B), 1.55 (1H, m, H-8), 1.65 (1H, m, H-9), 1.72 (1H, m, H-11A), 1.49 (1H, m, H-11B), 2.04 (2H, m, H 12), 1.80 (1H, m, H-14), 1.52 (1H, m, H-15A), 1.40 (1H, m, H-15B), 1.66 (1H, m, H-16A), 1.25 (1H, m, H-16B), 1.24 (1H, m, H-17), 0.55 (3H, s, H-18), 0.80 (3H, s, H-19), 2.01 (1H, m, H-20), 1.02 (3H, d, J = 6.5 Hz, H-21), 5.25 (1H, dd, J = 15.5 ล้านคน 7.8 Hz, H-22), 5.21 (1H, dd, J = 15.5 ล้านคน 7.8 Hz, H-23), 2.42 (1 H, m, H-24), 1.65 (3 H, s, H-26), 4.69 (1 H, s, H-27a ตรัง), 4.67 (1 H, s, H-27B), 0.84 (3 H, t, J = 7.5 Hz, H-29) 13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δC 37.2 (C-1), 38.1 (C-2), 71.1 (C-3), 39.5 (C-4), 140.7 (C-5), 121.6 (C-6), 31.6 (C-7), 40.5 (C-8), 49.5 (C-9), 34.2 (C-10), 21.5 (C-11), 29.6 (C-12), 43.5 (C-13), 55.1 (C-14), 23.0 (C-15), 28.5 (C-16), 55.9 (C-17), 12.0 (C-18), 13.1 (C-19), 40.3 (C-20), 20.9 (C-21), 138.3 (C-22), 129.2 (C-23), 52.1 (C-24), 148.5 (C-25), 20.2 (C-26), 109.5 (C-27), 25.6 (C-28), 12.2 (C-29) 16 และ 17Betulinic กรด (4): จะได้รับเป็นเข็มไม่มีสี (5.6 มิลลิกรัม อะซิโตน); Rf 0.41 (S2), m.p. 292-293 องศาเซลเซียส EIMS: m/z 456 [M] + 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δH 1.19 (2H, m, H-1), 1.56 (2H, m, H-2), 3.19 (1H, m, H-3), 0.65 (1H, m, H 5), 1.42 (2H, m, H-6), 1.47 (2H, m, H-7), 1.25 (1H, m, H-9), 1.23 (2H, m, H-11), 1.68 (1H, m, H-12A), 1.30 (1H, m, H-12B), 2.20 (1H, dd, J = 9.5, 3.6, H-13), 2.27 (1H, m, H-15A), 1.54 (1H, m, H-15B), 2.37 (1H, m, H-16A), 1.50 (1H, m, H-16B), 1.61 (1H, m, H-18), 3.01 (1H, dt, J = 8.5, 4.0 Hz, H-19), 1.96 (1H, m, H-21A), 1.42 (1H, m, H-21B), 1.97 (2H, m, H-22), 0.96 (3H, s, H-23), 0.75 (3H, s, H-24), 0.82 (3H, s, H-25), 0.93 (3H, s, H-26), 0.97 (3H, s, H-27), 4.74 (1H, s, H-29A), 4.51 (1H, s, H-29B), 1.69 (3H, s, H-30) 13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δC 38.7 (C-1), 27.4 (C-2), 78.9 (C-3), 38.8 (C-4), 55.3 (C-5), 18.2 (C-6), 34.3 (C-7), 40.7 (C-8), 50.5 (C-9), 37.2 (C-10), 20.8 (C-11), 25.5 (C-12), 38.3 (C-13), 42.4 (C-14), 30.5 (C-15), 32.1 (C-16), 56.3 (C-17), 46.9 (C-18), 49.2 (C-19), 150.4 (C-20), 29.7 (C-21), 37.0 (C-22), 28.0 (C-23), 15.3 (C-24), 16.0 (C-25), 16.1 (C-26), 14.7 (C-27), 180.1 (C-28), 110.0 19.3 (C-29), (C-30) 18 และ 195-hydroxy-6,7, 4′-trimethoxyflavone (5): มันถูกรับเป็นผลึกสีเหลือง (14 มิลลิกรัม ทานอ); R

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

องค์ประกอบทางเคมีและการตรวจสอบทางชีวภาพของชิ้นส่วนทางอากาศของอียิปต์ Clerodendrum inerme
Sabrin RM ฮี, คาลิด Z. Alshalib, Mostafa A. Fouadc, Ehab S. Elkhayatd, Rwaida A. Al Haidarie, กาเอ Mohamedd
แสดงเพิ่มเติม
ดอย: 10.1016 / j.bfopcu.2014.05.002
รับสิทธิและเนื้อหา
Open Access รับการสนับสนุนจากคณะเภสัชศาสตร์มหาวิทยาลัยไคโร
ภายใต้สัญญาอนุญาตครีเอทีฟคอมมอนส์
บทคัดย่อ
B-friedoolean-5-ene-3-β-OL (1), β-sitosterol (2) , stigmasta-5,22,25-Trien-3-β-OL (3), กรด betulinic (4) และ 5-hydroxy-6,7,4'-trimethoxyflavone (5) ที่แยกได้จากส่วนทางอากาศของ Clerodendrum inerme ลิตร (Verbenaceae) โครงสร้างของพวกเขาได้รับการก่อตั้งขึ้นบนพื้นฐานของการวิเคราะห์ข้อมูลทางกายภาพและทางสเปกโทรสโก สารประกอบที่ 1, 4 และ 5 ที่แยกได้เป็นครั้งแรกจากโรงงาน C. inerme ลิตรเป็นที่รู้จักกันเป็นแหล่งที่อุดมไปด้วย terpenes, sterols และสารประกอบฟีนอลเพื่อให้สารต้านอนุมูลอิสระและกิจกรรมต้านการอักเสบได้รับการประเมิน สารสกัดจากเมทานอลรวม (TME) และสารประกอบที่ 5 แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมการขับที่มีการยับยั้งสูงสุด 61.84% สำหรับ TME (100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) และ 37.19% เป็นเวลา 5 (20 ไมครอน) ตามลำดับโดยใช้การทดสอบ DPPH นอกจากนี้ TME แสดงฤทธิ์ต้านการอักเสบมากกว่า indomethacin ในขนาด 200 มิลลิกรัม / กิโลกรัมโดยใช้ตีนหลังเหนี่ยวนำฟอร์มาลินวิธีการบวมน้ำ. คำสำคัญClerodendrum inerme; Verbenaceae; triterpenes; สารต้านอนุมูลอิสระ; ต้านการอักเสบ1 บทนำสกุล Clerodendrum (ครอบครัว: Verbenaceae) มีการกระจายอย่างกว้างขวางมากในเขตร้อนและกึ่งเขตร้อนของโลก มากกว่าห้าร้อยสายพันธุ์ของพืชและสัตว์ที่ถูกระบุ 1 พวกเขารวมถึงต้นไม้ขนาดเล็ก, พุ่มไม้และสมุนไพร 1C inerme เป็นไม้พุ่มกระจายในภาคใต้และเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ออสเตรเลียและหมู่เกาะแปซิฟิก พืชที่ใช้ในการรักษาโรคติดเชื้อเกี่ยวกับโรคซครอฟิวเลอร์และกามโรคและยังเป็นยาแก้พิษจากปลาปูและเห็ด 2 น้ำใบสดใช้ภายนอกสำหรับการรักษาโรคผิวหนัง นอกจากนี้รากต้มในน้ำมันและใช้ในความรักของรูมาติก 3 และ 4 โรงงานที่ได้รับการแสดงที่จะมียาต้านจุลชีพ, ป้องกัน coagulants กระตุ้นมดลูกความดันโลหิตสูงและผลกระทบเป็นยาระบาย 3 และ 4 การศึกษาก่อนหน้าพฤกษเคมีของพืชชนิดนี้นำไปสู่การแยกของ sterols, 5 และ 6 flavones, 7 clerodane diterpenes, 8 และ 9 neolignans, 10 glycosides iridoid, 11 และ 12 และ triterpenes 13 ในฐานะที่เป็นส่วนหนึ่งของการศึกษาต่อเนื่องของเราในพืชอียิปต์เราตรวจสอบองค์ประกอบของซี inerme ลิตร (Verbenaceae) การศึกษาครั้งนี้รายงานแยกและชี้แจงโครงสร้างของสารประกอบที่ห้า: B-friedoolean-5-ene-3-β-OL (1), 14β-sitosterol (2), 15 stigmasta-5,22,25-Trien-3 β-OL (3), 16 และ 17 กรด betulinic (4), 18 และ 19 และ 5-hydroxy-6,7,4'-trimethoxyflavone (5) 20 กิจกรรมต้านการอักเสบของ TME ในปริมาณที่แตกต่างกันโดยใช้ฟอร์มาลินที่เกิดวิธีการบวมน้ำตีนหลังและ indomethacin เป็นมาตรฐานได้รับการประเมิน นอกจากนี้ TME และสารประกอบ 5 ได้ถูกทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของตนโดยใช้การทดสอบ DPPH เมื่อเทียบกับโพรพิ gallate (สารต้านอนุมูลอิสระสังเคราะห์มาตรฐาน). 2 การทดลอง2.1 ขั้นตอนทั่วไปละลายจุดได้ดำเนินการโดยใช้ Electrothermal 9100 อุปกรณ์ดิจิตอลจุดหลอมเหลว (Electrothermal วิศวกรรม จำกัด , เอสเซ็กซ์อังกฤษ) สเปกตรัมรังสียูวีได้รับการพิจารณาโดยใช้สเปกคาน Perkin Elmer สองรุ่น 550S ติดบันทึก Hitachi รุ่น 561 ใช้ 1 ซมเซลล์ผลึก IR สเปกตรัมถูกวัดใน Shimadzu อินฟราเรดสเปก-400 (เกียวโต, ญี่ปุ่น) EIMS ถูกบันทึกไว้ในฟินนิกัน MAT TSQ 7000 สเปกโตรมิเตอร์มวล 1D และ 2D NMR สเปกตรัม (กะเคมีใน ppm มีค่าคงที่การมีเพศสัมพันธ์ในเฮิร์ตซ์) ได้รับการบันทึกไว้ใน Bruker BIOSPIN GmbH 400 MHz สเปกโตรมิเตอร์ Ultrashield CDCl3 ใช้เป็นตัวทำละลายด้วย TMS เป็นอ้างอิงภายใน ตัวทำละลายได้ถูกกลั่นกรองก่อนที่จะมีการวัดสเปกโทรสโก คอลัมน์โครมาแยกได้ดำเนินการใน SiO2 60 (0.04-0.063 มมเมอร์) TLC ได้ดำเนินการบนแผ่น TLC ก่อนเคลือบด้วย SiO2 60 F254 (0.2 มมเมอร์) ระบบตัวทำละลายที่ใช้ในการวิเคราะห์ TLC เป็นเฮกเซน: EtOAc (90:10, S1), เฮกเซน: EtOAc (85:15, S2) และ CHCl3: เมธานอล (95: 5, S3) สารประกอบที่ถูกตรวจพบโดยการดูดซึมรังสียูวีที่λmax 255 และ 366 นาโนเมตรตามด้วยการฉีดพ่นด้วย anisaldehyde. น้ำยา H2SO4 และความร้อนที่อุณหภูมิ 110 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1-2 นาที2.2 โรงงานวัสดุClerodendron inerme ลิตรส่วนทางอากาศได้ถูกเก็บรวบรวมมีนาคม 2009 จากสวนพฤกษศาสตร์, คณะเกษตรมหาวิทยาลัย Assiut และได้รับการรับรองความถูกต้องโดยดร. อับดุลอาซิ A. ฟาเยดศพืชอนุกรมวิธานคณะวิทยาศาสตร์, Assiut มหาวิทยาลัย Assiut, อียิปต์ ตัวอย่างบัตรกำนัลถูกวางที่ภาควิชาเภสัชเวทคณะเภสัชศาสตร์, Minia มหาวิทยาลัย Minia, อียิปต์ (รหัสลงทะเบียน CIS 2009). 2.3 การสกัดและการแยกอากาศแห้งส่วนทางอากาศผงซี inerme (400 กรัม) ถูกสกัดด้วยเมธานอล 70% (4 × 1.5 ลิตร) ที่อุณหภูมิห้อง สารสกัดจากเมทานอลรวมเข้มข้นภายใต้ความกดดันที่ลดลงจะจ่ายสารตกค้างสีเขียวเข้ม (27.5 กรัม) TME (2.5 กรัม) ถูกเก็บไว้สำหรับการศึกษาทางชีวภาพ TME (25.0 กรัม) ก็ยังถูกดูดของเหลว chromatography (VLC) โดยใช้เฮกเซน: EtOAc และ EtOAc: การไล่ระดับสีเมธานอลที่จะจ่ายหกเศษส่วน: CI-1 (5.4 กรัมเฮกเซน, 100%), CI-2 ( 3.4 กรัมเฮกเซน: CHCl3, 50:50) CI-3 (3.1 กรัม CHCl3 100%), CI-4 (2.9 กรัม; CHCl3: EtOAc, 50:50) CI-5 (2.1 กรัม EtOAc 100%) และ CI-6 (6.5 กรัมเมธานอล 100%) CI-2 (3.4 กรัม) ถูกยัดเยียดให้คอลัมน์ SiO2 (160 กรัม× 50 ซม. × 2 ​​ซม.) โดยใช้เฮกเซน: ลาด EtOAc ที่จะจ่ายสารประกอบที่ 1 (8.7 มิลลิกรัมผลึกสีขาว) และ 2 (11.2 มก. เข็มไม่มีสี) . ส่วน CI-3 (3.1 กรัม) ถูก chromatographed กว่าคอลัมน์ SiO2 (140 กรัม× 50 ซม. × 2 ​​ซม.) โดยใช้เฮกเซน: ลาด EtOAc ที่จะได้รับสาร 3 (5.4 มิลลิกรัมเข็มไม่มีสี) และ 4 (5.6 มิลลิกรัมเข็มไม่มีสี) . คอลัมน์ SiO2 (120 กรัม× 50 ซม. × 2 ​​เซนติเมตร) ส่วน CI-4 (2.9 กรัม) โดยใช้เฮกเซน: EtOAc เป็นตัวชะให้ 5 (14 มิลลิกรัมผลึกสีเหลือง) เศษส่วนอื่น ๆ ที่ถูกเก็บไว้สำหรับการตรวจสอบต่อไป. D: B-friedoolean-5-ene-3-β-OL (1): มันได้รับเป็นผลึกสีขาว (8.7 มิลลิกรัม, เมธานอล); Rf 0.79 (S1) mp 211-212 ° C EIMS: m / Z 426 [M] + IR (KBr): γmax 3440, 2890, 1040 เซนติเมตร-1 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δH 1.48 (2H, M, H-1), 1.85 (1H, M, H-2A) 1.72 (1H, M, H-2B) 3.48 (1H, T, J = 2.9 Hz, H-3), 5.64 (1H, D, J = 6.0 Hz, H-6), 2.02 (1H, M, H-7A), 1.68 (1H, M, H-7B) 1.55 (1H , M, H-8), 0.90 (1H, M, H-10), 1.38 (2H, M, H-11), 1.35 (1H, M, H-12A), 1.27 (1H, M, H-12B ) 1.52 (1H, M, H-15A), 0.93 (1H, M, H-15B), 1.40 (1H, M, H-16A), 1.23 (1H, M, H-16B), 1.59 (1H, ม., H-18), 1.53 (2H, M, H-19), 1.60 (2H, M, H-21), 1.39 (2H, M, H-22), 1.04 (3H, S, H-23) , 1.14 (3H, S, H-24), 0.85 (3H, S, H-25), 1.09 (3H, S, H-26), 1.00 (3H, S, H-27), 1.16 (3H, S , H-28), 0.95 (3H, S, H-29), 0.99 (3H, S, H-30) 13C NMR (CDCl3 100 MHz): δC 18.2 (C-1), 27.8 (C-2), 76.5 (C-3), 40.5 (C-4), 141.8 (C-5), 122.5 (C-6 ), 23.5 (C-7), 47.5 (C-8), 34.6 (C-9), 50.1 (C-10), 34.4 (C-11), 30.5 (C-12), 39.3 (C-13) , 37.8 (C-14), 32.0 (C-15), 36.0 (C-16), 30.1 (C-17), 43.2 (C-18), 35.0 (C-19), 28.5 (C-20), 33.2 (C-21), 38.9 (C-22), 28.5 (C-23), 25.6 (C-24), 16.2 (C-25), 19.5 (C-26), 18.4 (C-27), 32.2 (C-28), 34.6 (C-29), 32.2 (C-30) 14 β-Sitosterol (2): มันถูกแยกออกเป็นเข็มไม่มีสี (11.2 มก., อะซิโตน); Rf = 0.73 (S1) mp 139-140 ° C IR (KBr): γmax 3455, 2940, 1617, 1454, 1385, 1062 เซนติเมตร-1 EIMS: m / Z 414 [M] + ข้อมูล NMR (400 และ 100 MHz, CDCl3) อยู่ในข้อตกลงที่ดีกับข้อมูลที่เผยแพร่ 15 Stigmasta-5,22,25-Trien-3-β-OL (3): มันได้รับเข็มไม่มีสี (5.4 มิลลิกรัม, อะซิโตน); Rf 0.61 (S1) mp 158-160 ° C IR (KBr): γmax 3340, 2940, 1640, 1060 เซนติเมตร-1 EIMS: m / Z 410 [M] + 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δH 1.80 (1H, M, H-1A) 1.10 (1H, M, H-1B) 1.79 (1H, M, H-2A) 1.36 (1H, M, H -2B) 3.55 (1H, M, H-3), 1.70 (1H, M, H-4A) 1.26 (1H, M, H-4B) 5.35 (1H, D, J = 5.0 เฮิรตซ์ H- 6), 1.62 (1H, M, H-7A), 1.28 (1H, M, H-7B) 1.55 (1H, M, H-8), 1.65 (1H, M, H-9), 1.72 (1H , M, H-11A), 1.49 (1H, M, H-11B), 2.04 (2H, M, H-12), 1.80 (1H, M, H-14), 1.52 (1H, M, H-15A ) 1.40 (1H, M, H-15B), 1.66 (1H, M, H-16A), 1.25 (1H, M, H-16B), 1.24 (1H, M, H-17), 0.55 (3H, วินาที, H-18), 0.80 (3H, S, H-19), 2.01 (1H, M, H-20), 1.02 (3H, D, J = 6.5 Hz, H-21), 5.25 (1H, DD , J = 15.5, 7.8 Hz, H-22), 5.21 (1H, วัน, J = 15.5, 7.8 Hz, H-23), 2.42 (1H, M, H-24), 1.65 (3H, S, H- 26), 4.69 (1H, S, H-27A), 4.67 (1H, S, H-27B), 0.84 (3H, T, J = 7.5 Hz, H-29) 13C NMR (CDCl3 100 MHz): δC 37.2 (C-1), 38.1 (C-2), 71.1 (C-3), 39.5 (C-4), 140.7 (C-5), 121.6 (C-6 ), 31.6 (C-7), 40.5 (C-8), 49.5 (C-9), 34.2 (C-10), 21.5 (C-11), 29.6 (C-12), 43.5 (C-13) 55.1 (C-14), 23.0 (C-15), 28.5 (C-16), 55.9 (C-17), 12.0 (C-18), 13.1 (C-19), 40.3 (C-20), 20.9 (C-21), 138.3 (C-22), 129.2 (C-23), 52.1 (C-24), 148.5 (C-25), 20.2 (C-26) 109.5 (C-27), 25.6 (C-28), 12.2 (C-29) 16 และ 17 กรด Betulinic (4): มันได้รับเข็มไม่มีสี (5.6 มิลลิกรัม, อะซิโตน); Rf 0.41 (S2) mp 292-293 ° C EIMS: m / Z 456 [M] + 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δH 1.19 (2H, M, H-1), 1.56 (2H, M, H-2), 3.19 (1H, M, H-3), 0.65 (1H, M, H -5), 1.42 (2H, M, H-6), 1.47 (2H, M, H-7), 1.25 (1H, M, H-9), 1.23 (2H, M, H-11), 1.68 ( 1H, M, H-12A), 1.30 (1H, M, H-12B), 2.20 (1H, วัน, J = 9.5, 3.6, H-13), 2.27 (1H, M, H-15A), 1.54 ( 1H, M, H-15B), 2.37 (1H, M, H-16A), 1.50 (1H, M, H-16B), 1.61 (1H, M, H-18), 3.01 (1H, DT, J = 8.5, 4.0 Hz, H-19), 1.96 (1H, M, H-21A), 1.42 (1H, M, H-21B), 1.97 (2H, M, H-22), 0.96 (3H, S, H -23), 0.75 (3H, S, H-24), 0.82 (3H, S, H-25), 0.93 (3H, S, H-26), 0.97 (3H, S, H-27), 4.74 ( 1H, S, H-29A), 4.51 (1H, S, H-29B), 1.69 (3H, S, H-30) 13C NMR (CDCl3 100 MHz): δC 38.7 (C-1), 27.4 (C-2), 78.9 (C-3), 38.8 (C-4), 55.3 (C-5), 18.2 (C-6 ), 34.3 (C-7), 40.7 (C-8), 50.5 (C-9), 37.2 (C-10), 20.8 (C-11), 25.5 (C-12), 38.3 (C-13) , 42.4 (C-14), 30.5 (C-15), 32.1 (C-16), 56.3 (C-17), 46.9 (C-18), 49.2 (C-19), 150.4 (C-20), 29.7 (C-21), 37.0 (C-22), 28.0 (C-23), 15.3 (C-24), 16.0 (C-25), 16.1 (C-26), 14.7 (C-27), 180.1 (C-28), 110.0 (C-29), 19.3 (C-30) 18 และ 19 5-Hydroxy-6,7,4'-trimethoxyflavone (5): มันได้รับเป็นผลึกสีเหลือง (14 มิลลิกรัมเมธานอล); R

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

องค์ประกอบทางเคมีและฤทธิ์ทางชีวภาพของการสืบสวน ส่วนทางอากาศของอียิปต์ clerodendrum inerme
sabrin r.m. ibrahima , , , คาลิด alshalib Z , A . ถ้าคน fouadc ehab elkhayatd , เอส , อัล haidarie rwaida A , A .

แสดงเพิ่มเติม mohamedd กามัล ดอย : 10.1016 / j.bfopcu . 2014.05.002

เปิดการเข้าถึงเนื้อหาที่ได้รับสิทธิและได้รับการสนับสนุนโดยคณะเภสัชศาสตร์ , ไคโรมหาวิทยาลัย
ภายใต้สัญญาอนุญาตครีเอทีฟคอมมอนส์

บทคัดย่อb-friedoolean-5-ene-3 - บีตา - ol ( 1 ) บีตา - sitosterol ( 2 ) stigmasta-5,22,25-trien-3 - บีตา - ol ( 3 ) betulinic กรด ( 4 ) และ ( 5 ) - trimethoxyflavone 5-hydroxy-6,7,4 นั้นแยกจากส่วนทางอากาศของ clerodendrum inerme ลิตร ( เวอร์บีนาซี ) โครงสร้างของพวกเขาก่อตั้งขึ้นบนพื้นฐานของการวิเคราะห์ทางกายภาพและข้อมูลทางสเปกโทรสโกปี สารประกอบ 1 , 4 , และ 5 แยกได้ครั้งแรกจากโรงงาน C .inerme . เป็นที่รู้จักกันเป็นแหล่งอุดมของเทอร์ปีนสเตอรอล , และสารประกอบฟีนอล ดังนั้น กิจกรรมของสารต้านอนุมูลอิสระและต้านการอักเสบ ได้แก่ . สารสกัดเมทานอล ( TME ) และสารประกอบ 5 พบ scavenging กิจกรรมการยับยั้งสูงสุด 61.84 ( TME ( 100 μกรัม / มิลลิลิตร ) และร้อยละ 37.19 5 ( 20 μ M ) ตามลำดับ การใช้ dpph ตามลำดับ นอกจากนี้ใช้ประโยชน์ได้ มีฤทธิ์ต้านการอักเสบมากกว่าอินโดขนาด 200 มิลลิกรัม / กิโลกรัมโดยใช้ฟอร์มาลินและบวมหลังเท้า วิธี

,
clerodendrum inerme ; เวอร์บีนาซี ; ไตรเทอร์ปีน ; สารต้านอนุมูลอิสระ ; ต้านการอักเสบ
1 บทนำ
สกุล clerodendrum ( วงศ์ ) มีการกระจายอย่างกว้างขวางในเขตร้อนและกึ่งเขตร้อนภูมิภาคของโลกมากกว่า 500 ชนิดของพืชมีการระบุ . 1 พวกเขามีต้นไม้ขนาดเล็ก , พุ่มไม้ , และสมุนไพร c . inerme เป็นไม้พุ่มที่กระจายอยู่ในภูมิภาคเอเชียใต้และเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ ออสเตรเลีย และหมู่เกาะแปซิฟิก เป็นพืชที่ใช้ในการรักษาเชื้อ scrofulous และกามโรค และยังเป็นยาแก้พิษจากปลา ปู และ เห็ดมีพิษ2 ใบสดน้ำผลไม้ใช้ภายนอกสำหรับการรักษาโรคผิวหนัง นอกจากนี้ รากต้มในน้ำมันและใช้ความรักทั้งหมด 50 3 และ 4 โรงงานได้ถูกแสดงให้มีจุลชีพ Anti coagulants มดลูกกระตุ้น ความดันโลหิตสูง และเป็นยาระบายที่มีฤทธิ์ 3 และ 4 ก่อนการศึกษาทางพฤกษเคมีของพืชนี้นำไปสู่การแยกสเตอรอล , 5 และ 6 นิลในสูตรชนิด clerodane 7 , 8 และ 9 neolignans ไซด์ริ ดอยด , 10 , 11 และ 12 และ ไตรเทอร์ปีน . 13 เป็นส่วนหนึ่งของการศึกษาอย่างต่อเนื่องของเราในพืชอียิปต์ เราได้ตรวจสอบองค์ประกอบของ inerme ลิตร ( เวอร์บีนาซี ) การศึกษาการแยกและหาสูตรโครงสร้างของรายงาน 5 ชนิด : b-friedoolean-5-ene-3 - บีตา - ol ( 1 ) , 14 ( 2 ) บีตา - sitosterol , 15 stigmasta-5,22,25-trien-3 - บีตา - ol ( 3 )16 และ 17 betulinic กรด ( 4 ) , 18 และ 19 และ 5-hydroxy-6,7,4 ’ - trimethoxyflavone ( 5 ) 20 กิจกรรมต้านการอักเสบของ TME ในขนาดที่แตกต่างกันโดยใช้ฟอร์มาลินและอุ้งเท้าหลังข้างมานวิธีอินโดเป็นมาตรฐานการประเมิน นอกจากนี้ ประโยชน์และสารประกอบ 5 ทดสอบต้านอนุมูลอิสระใช้ใน dpph เทียบกับโพรพิลแกลเลต ( สารต้านอนุมูลอิสระสังเคราะห์ มาตรฐาน

2ทดลอง
2.1 . ทั่วไปวิธีการ
จุดหลอมเหลวทดลองใช้ electrothermal 91000 ดิจิตอลเครื่องวัดจุดหลอมเหลว ( การศึกษาวิศวกรรม จำกัด , Essex , อังกฤษ ) ยูวีเพอร์กินเอลเมอร์สเปกตรัมถูกกำหนดโดยใช้ Spectrophotometer แบบคานคู่ 530 , แนบรูปแบบจัดเก็บบันทึก 561 , ใช้ 1 ซม. ควอทซ์เซลล์อินฟราเรดสเปกตรัม และวัดบน Shimadzu infrared-400 Spectrophotometer ( เกียวโต , ญี่ปุ่น ) eims ที่ถูกบันทึกไว้บนเสื่อ ฟินนิกัน tsq 7000 แมสสเปกโทรมิเตอร์ . 1D และ 2D NMR สเปกตรัม ( เคมีกะใน ppm , coupling ค่าคงที่ในเฮิร์ตซ์ ) ถูกบันทึกไว้ในบรุคเกอร์ biospin 400 MHz ultrashield สเปกโตรมิเตอร์โดยใช้ cdcl3 GmbH เป็นตัวทำละลายกับ TMS เป็นอ้างอิงภายในตัวทำละลายกลั่นก่อนการวัดทางสเปกโทรสโกปี คอลัมน์โครมาโตกราฟีแยกจำนวน SiO2 60 ( 0.04 ) 0.063 มิลลิเมตร เมอร์ค ) TLC คือใช้แผ่นเคลือบก่อน ( SiO2 60 f254 ( 0.2 มิลลิเมตร เมอร์ค ) ตัวทำละลายที่ใช้ระบบวิเคราะห์ข้อมูล ( บีบ : etoac ( รูป S1 ) บีบ : etoac ( 85:15 , S2 ) และ chcl3 : เมทิลแอลกอฮอล์ ( 95:5 S3 )สารประกอบที่ถูกตรวจพบโดยการดูดกลืน UV ที่λแม็กซ์แล้ว 366 nm ตามด้วยการฉีดพ่นด้วยสารเคมีและความร้อน anisaldehyde : กรดซัลฟิวริกที่ 110 องศา C ประมาณ 1 – 2 นาที

2.2 . clerodendron วัสดุพืช inerme L
อากาศเก็บชิ้นส่วนในเดือนมีนาคม 2552 จากสวนพฤษศาสตร์ คณะเกษตรศาสตร์ มหาวิทยาลัย assiut และรับรอง โดย ดร. บดุล . A . ฟาเยด ศ. อนุกรมวิธานพืชคณะวิทยาศาสตร์ assiut มหาวิทยาลัย assiut , อียิปต์ คูปองตัวอย่างที่ถูกฝากไว้ที่ภาควิชาเภสัชเวท คณะเภสัชศาสตร์ minia มหาวิทยาลัย minia , อียิปต์ ( รหัสลงทะเบียน cis-2009 ) .

2.3 การสกัดและการแยกอากาศแห้งอากาศ
ส่วนแป้งของ inerme ( 400 กรัม ) มีปริมาณสารสกัดด้วย 70% ( 4 × 1.5 ลิตร ) ที่อุณหภูมิห้องสารสกัดเมทานอลจากรวมกันภายใต้การลดความดันซื้อกากสีเขียวเข้ม ( 27.5 กรัม ) ใช้ประโยชน์ได้ ( 2.5 กรัม ) ที่ถูกเก็บไว้เพื่อการศึกษาทางชีวภาพ ใช้ประโยชน์ได้ ( 50 กรัม ) ภายใต้สุญญากาศ Liquid Chromatography ( VLC ) ใช้บีบ : etoac etoac : เมทิลแอลกอฮอล์และไล่ซื้อ 6 เศษส่วน : ci-1 ( 5.4 กรัม ; บีบ 100% ) , ci-2 ( 3.4 g ; บีบ : chcl3 50 ) , ci-3 ( 3.1 กรัม ; chcl3 100% )ci-4 ( 2.9 G ; chcl3 : etoac 50 ) , ci-5 ( 2.1 g ; etoac 100% ) และ ci-6 ( 6.5 g ; ปริมาณ 100 % ) ci-2 ( 3.4 g ) ภายใต้ SiO2 คอลัมน์โครมาโตกราฟฟี ( 160 กรัม× 50 × 2 เซนติเมตร ) โดยใช้การบีบ : etoac เท่าใดสารประกอบ 1 ( 0.3 มิลลิกรัม ขาว คริสตัล ) และ 2 ( 600 มิลลิกรัมสีเข็ม ) ส่วน ci-3 ( 3.1 กรัม ) คือ chromatographed กว่า SiO2 คอลัมน์ ( 140 กรัม× 50 × 2 เซนติเมตร ) โดยใช้บีบ :etoac ไล่ระดับเพื่อให้ได้สารประกอบ 3 ( 5.4 มิลลิกรัมสีเข็ม ) และ 4 ( 5.6 มิลลิกรัมสีเข็ม ) ซิลิกาคอลัมน์โครมาโทกราฟี ( 120 กรัม× 50 × 2 ซม. ) ส่วน ci-4 ( 2.9 กรัม ใช้บีบ : etoac เป็นตัวให้ 5 ( 14 มิลลิกรัม , ผลึกสีเหลือง ) ส่วนอื่น ๆถูกเก็บไว้สำหรับการตรวจสอบต่อไป

D : b-friedoolean-5-ene-3 - บีตา - ol ( 1 ) : มันใช้ผลึกสีขาว ( 0.3 มิลลิกรัม ปริมาณ ) ; RF 0.79 ( S1 ) เมตรหน้า 211 และ 212 ° C : M / Z eims 426 [ M ] IR ( KBR ) : γแม็กซ์ 1 2890 , IBM , cm − 1 1H NMR ( cdcl3 400 MHz ) : δ 1.48 ( 2H H , M ( 1 ส่วน ) 1.85 ม. h-2a ) 1.72 ( 1 h , M , h-2b ) TTW ( 1 h , T , J = 2.9 Hz h-3 ) 5.64 ( 1 h , D , J = 6.0 เฮิร์ตซ์ , H-6 ( 1 ) 2.02 ม. h-7a ) 1.68 ( 1 h , M , h-7b ) 1.55 ( 1 h , M , h-8 ) 0.90 ( 1 h , M , h-10 ) 1.38 ( 2H , M , h-11 ) 1.35 ( 1 h , M , h-12a ) 1.27 ( 1 h , M , h-12b ) 1.52 ( 1 h , M , h-15a 0.93 ( 1 ) ,เมตร h-15b ) 1.40 ( 1 h , M , h-16a ) 1.23 ( 1 h , M , h-16b ) 1.59 ( 1 h , M , h-18 ) 1.53 ( 2H , M , h-19 ( 2H ) 1.60 ม. ฝูง ) 1.39 ( 2H , M , h-22 ) 1.04 ( Thickness ) ของ h-23 ) , 1 ( 3 H , S , h-24 ) 0.85 ( 3 H , S , h-25 ) 1.09 ( 3 H , S , h-26 ) , 1.00 ( 3 H , S , h-27 ) 1.16 ( 3 H , S , h-28 ) 0.95 ( 3 H , S , h-29 ) 0.99 ( 3 H , S , h-30 ) 13C NMR ( cdcl3 100 MHz ) : δ C 18.2 ( c-1 ) 27.8 ( C-2 ) 76.5 ( c-3 ) เพิ่ม ( C-4 ) 141.8 ( C - ) , 122.5 ( c-6 )23.5 ( เป็น C-7 ) 47.5 ( c-8 ) ร้อยละ 34.6 ( c-9 ) 50.1 ( c-10 ) ( c-11 34.4 ) 30.5 ( ซี 12 ) , 39.3 ( c-13 ) 37.8 ( C-14 ) 32.0 ( c-15 ) , 36.0 ( c-16 ) 30.1 ( c-17 ) วันที่ ( - ) , 35.0 ( c-19 ) 28.5 ( , c-20 ) , 33.2 ( c-21 ) , 38.9 ( c-22 ) 28.5 ( c-23 ) , 25.6 ( ซี 24 ) 16.2 ( c-25 ) 19.5 ( c-26 ) ค่าบริการ ( c-27 ) ) ( c-28 ) ร้อยละ 34.6 ( c-29 ) ) ( c-30 ) 14

บีตา - sitosterol ( 2 ) : มันถูกแยกเป็นสีเข็ม ( 11.2 mg , อะซิโตน ) ; RF = 073 ( S1 ) M.P . 139 140 องศา และ IR ( KBR ) : γแม็กซ์ 3455 681 1 ตัว , , , 821 , 931 , cm − 1 eims : M / Z 414 [ M ] โดยข้อมูล ( 400 และ 100 MHz cdcl3 ) อยู่ในข้อตกลงกับการเผยแพร่ข้อมูล 15

stigmasta-5,22,25-trien-3 - บีตา - ol ( 3 ) : จะได้เป็นสีเข็ม ( 5.4 มิลลิกรัม , อะซิโตน ) ; RF 0.61 ( S1 ) 158 - 160 องศา และ MP ( KBR ) : γแม็กซ์ 3340 681 , 1640 , 1060 cm − 1 eims : M / Z 410 [ M ] ( cdcl3 1H NMR ,400 MHz ) : δ H 1.80 ( 1 h , M , h-1a ) 1.10 ( 1 h , M , H-1B ) 1.79 ( 1 h , M , h-2a ) 1.36 ( 1 h , M , h-2b ) 3.55 ( 1 h , M , h-3 ) 1.70 ( 1 h , M , h-4a 1.26 ( 1 ) , เมตร h-4b ) 5.35 ( 1 h , D , J = 5.0 Hz H-6 ) 1.62 ( 1 h , M , h-7a ) 1.28 ( 1 h , M , h-7b ) 1.55 ( 1 h , M , h-8 ) 1.65 ( 1 h , M , h-9 ) 1.72 ( 1 h , M , h-11a ) 1.49 ( 1 h , M , h-11b ) 2.04 ( 2H , M , h-12 ) 1.80 ( 1 h , M , h-14 ) 1.52 ( 1 h , M , h-15a ) 1.40 ( 1 h , M , h-15b ) 1.66 ( 1 ม.h-16a ) 1.25 ( 1 h , M , h-16b ) 1.24 ( 1 h , M , h-17 ) 0.55 ( 3 H , S , h-18 ) 0.80 ( 3 H , S , h-19 ) 2.01 ( 1 h , M , h-20 ) 1.02 ( 3 H , D , J = 6.5 Hz 5.25 ( ฝูง ) 1 , DD , J = 15.5 , 7.8 Hz h-22 5.21 ( 1 ) DD , J = 15.5 , 7.8 Hz h-23 ) 2.42 ( 1 h , M , h-24 ) 1.65 ( 3 H , S , h-26 ) 4.69 ( 1 h , S , h-27a ) 4.67 ( 1 h , S , h-27b ( 3 ) , E , T , J = 7.5 Hz h-29 ) 13C NMR ( cdcl3 100 MHz ) : δ C 37.2 ( c-1 ) , 38.1 ( C-2 ) หกล้ม ( c-3 )39.5 ( C-4 ) 140.7 ( C - ) , 121.6 ( c-6 ) 31.6 ( เป็น C-7 ) เพิ่ม ( c-8 ) , 49.5 ( c-9 ) 34.2 ( c-10 ) 21.5 ( c-11 ) ราว ( ซี 12 ) 43.5 ( c-13 ) 55.1 ( C-14 ) 23.0 ( c-15 ) 28.5 ( c-16 ) ปริญญาตรี ( c-17 ) 12.0 ( - ) , ดี ( c-19 ) 40.3 ( c-20 ) 20.9% ( c-21 ) 138.3 ( c-22 ) 129.2 ( c-23 ) + ( ซี 24 ) , 148.5 ( c-25 ) , ครอบครัว ( c-26 ) 109.5 ( c-27 ) , 25.6 ( c-28 ) , 12.2 ( c-29 ) 16 และ 17

betulinic กรด ( 4 ) :