Preparation of extractsAfter lyophi

Preparation of extracts
After lyophilization and powdering in liquid nitrogen, samples (1 g) were extracted with 50ml of a solvent mixture comprising methanol/ water/acetic acid (80:20:5) by mechanical agitation for 1 h in the absence of light at 4 °C. The homogenate was filtered through filter paper (Whatman No. 1) and analyzed for total phenolic compounds, total flavanols and antioxidant activity.

To determine the individual phenolic compounds by HPLC, the filtered extracts were evaporated under vacuum at 40 °C and made up to 10 ml with ultrapure water.

An aliquot of 5 ml of the extract was added to a 1 g polyamide SC6 column
(Macherey-Nagel Gmbh and Co, Düren, Germany) preconditionedwith methanol (20 ml) and water (60 ml).

The column was washed with water (20 ml) and further eluted with methanol (50 ml), to elute the neutral flavonoids, andwith methanol/ammonia (99.5:0.5), to elute the
acidic flavonoids.

These fractions were evaporated to dryness under pressure at 40 °C, redissolved in methanol (1 ml), filtered through 0.22 μm PTFE (polytetrafluoroethylene) filters (Millipore Ltd., Bedford, MA, USA) and analyzed by HPLC.

The solvents employed for extraction and HPLC performance were analytical/
HPLC grade and purchased from Merck (Darmstadt, Germany).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การเตรียมสารสกัด
lyophilization และ powdering ในไนโตรเจนเหลว ตัวอย่าง (1 g) ถูกสกัด ด้วย 50ml ผสมระหว่างตัวทำละลายประกอบด้วยเมทานอล / กรดน้ำ/อะซิติก (80:20:5) โดยอาการกังวลต่อกลสำหรับ h 1 ในกรณีที่ไฟที่ 4 องศาเซลเซียส Homogenate การกรองโดยใช้กระดาษกรอง (Whatman หมายเลข 1) และวิเคราะห์ความรวมม่อฮ่อม รวม flavanols กิจกรรมและการต้านอนุมูลอิสระ

กำหนดม่อฮ่อมแต่ละ โดย HPLC สารสกัดจากกรองมีหายไปภายใต้สุญญากาศที่ 40 ° C และทำถึง 10 ml กับน้ำ ultrapure

เป็นส่วนลงตัวของ 5 ml ของการดึงข้อมูลถูกเพิ่มคอลัมน์ใยสังเคราะห์ SC6 1 g
(Macherey Nagel Gmbh และ Co, Düren เยอรมนี) preconditionedwith เมทานอล (20 มล.) และน้ำ (60 มล.)

ล้าง ด้วยน้ำ (20 มล.) และเพิ่มเติม eluted กับเมทานอล (50 มล.), ไปกลาง flavonoids, andwith เมทานอล/แอมโมเนีย (99.5:0.5), การ elute elute คอลัมน์
flavonoids เปรี้ยว

ส่วนเหล่านี้ได้หายไปกับความแห้งกร้านภายใต้ความดันที่ 40 ° C, redissolved ในเมทานอล (1 มล.), กรองผ่าน μm 0.22 PTFE (polytetrafluoroethylene) กรอง (จำกัดมาก กลาสโกว์ MA สหรัฐอเมริกา) และวิเคราะห์ ด้วย HPLC

หรือสารทำละลายสำหรับสกัดและ HPLC ประสิทธิภาพถูกวิเคราะห์ในการว่าจ้าง /
เกรด HPLC และซื้อจากบริษัทเมอร์ค (ดาร์มส เยอรมนี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมสารสกัดเอนไซม์ผง
หลังและในไนโตรเจนเหลวตัวอย่าง ( 1 กรัม ) ถูกสกัดด้วยตัวทำละลายเมทานอล 50ml ของส่วนผสมที่ประกอบด้วย น้ำ / / กรดน้ำส้ม ( 80:20:5 ) โดยกลเขย่าเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในการขาดของแสงที่ 4 ° C อนถูกกรองผ่านกระดาษกรอง ( whatman หมายเลข 1 ) และวิเคราะห์ สารประกอบฟีนอลทั้งหมด ,flavanols ทั้งหมด และต้านอนุมูลอิสระ

หาบุคคลสารประกอบฟีนอลโดยวิธี HPLC , กรองสารระเหยภายใต้สุญญากาศคือที่ 40 ° C และสร้างขึ้นเพื่อ 10 มิลลิลิตร กับน้ำบริสุทธิ์มาก

เป็นส่วนลงตัวของ 5 มิลลิลิตรของสารสกัดเพิ่มไป 1 กรัมใย sc6 คอลัมน์
( macherey นาเกล GmbH และ Co D üเรน , เยอรมนี ) preconditionedwith เมทานอล ( 20 มล. ) และน้ำ ( 60 มิลลิลิตร )

คอลัมน์ที่ถูกล้างด้วยน้ำ ( 20 มิลลิลิตร ) และตัวอย่างเพิ่มเติมกับเมทานอล ( 50 มล. ) เพื่อ elute flavonoids กลางความสงบเงียบเมทานอล / แอมโมเนีย ( 99.5:0.5 ) เพื่อ elute
ฟลาโวนอยด์ที่เป็นกรด

เศษส่วนเหล่านี้ระเหยแห้งภายใต้ความดันที่ 40 ° C , redissolved เมทานอล ( 1 มิลลิลิตร ) กรองผ่าน 0.22 μ M PTFE ( polytetrafluoroethylene ) กรอง ( มิลลิจำกัด เบดฟอร์ด มาสหรัฐอเมริกา ) และวิเคราะห์โดย HPLC

ตัวทำละลายในการสกัดและ HPLC ประสิทธิภาพถูกวิเคราะห์ /
เกรด HPLC และซื้อจากเมอร์ค ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี )