MRC-5, human fetal lung fibroblast

MRC-5, human fetal lung fibroblast cell line was obtained from the American Type Culture Collection (Manassas, VA 20108, USA). All cultures were maintained in a phenol red free culture medium DMEM/F12 (Dulbecco’s modified essential medium/Ham’s 12 nutrient mixture, Gibco), supplemented with 5% (vol/vol) fetal calf serum (JS Bioscience, Australia), and 1% (vol/vol) antibiotic (2 mM l-glutamine, 100 U/mL Penicillin and 100 μg/mL Streptomycin; Gibco). Cultured cells were kept at 37 °C in a humidified 5% carbon dioxide (CO2) incubator. Once the cells reached confluence, the culture medium was removed from the flask and the cells were rinsed three times with sterile HBSS (Hank’s Balanced Salt Solution, Gibco). The confluent cell layers were enzymatically removed, using Trypsin/EDTA (Gibco, USA), and resuspended in culture medium. Cell viability was assessed by vital staining with trypan blue (0.4% (wt/vol); Sigma, USA), and cell numbers were determined using a light microscope (Leitz Wetzlar, Germany).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

MRC-5 สายเซลล์ fibroblast ของปอดทารกในครรภ์ของมนุษย์ได้รับจากอเมริกาชนิดลเล็ก (มานาสซาส VA 20108., สหรัฐอเมริกา) ทุกวัฒนธรรมถูกเก็บรักษาไว้ในฟีนอลที่แดงฟรีมีสาร DMEM/F12 (ของ Dulbecco แก้ไขสำคัญปานกลาง/แฮมของ 12 สารอาหารผสม Gibco), เสริม ด้วยเซรั่ม 5% (vol/vol) ทารกวัว (JS วิทยาศาสตร์ชีวภาพ ออสเตรเลีย), และยาปฏิชีวนะ 1% (vol/vol) (l-กลูตา 2 มม. 100 U/mL ยาเพนนิซิลลิน และ 100 μ/mL Streptomycin Gibco) เซลล์อ่างถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 37 ° C ในตู้อบก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ (CO2) 5% ณอุณหภูมิที่ เมื่อเซลล์ถึงบรรจบ วัฒนธรรมสื่อที่ถูกเอาออกจากนั้นแตก และเซลล์ถูกล้าง 3 ครั้ง ด้วย HBSS หมัน (แฮงค์ของสมดุลสารละลายเกลือ Gibco) ชั้นเซลล์ confluent ถูก enzymatically ออก ใช้ทริปซิ น/EDTA (Gibco สหรัฐอเมริกา), และ resuspended ในวัฒนธรรม รับการประเมินศักยภาพเซลล์สำคัญเปรอะเปื้อนด้วย trypan blue (0.4% (wt/vol); ซิกม่า สหรัฐอเมริกา), และกำหนดหมายเลขของเซลล์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง (Leitz Wetzlar เยอรมนี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

MRC-5 ของมนุษย์สายพันธุ์ของเซลล์ fibroblast ปอดของทารกในครรภ์ที่ได้รับจากชาวอเมริกันประเภทวัฒนธรรมสะสม (ซาส, VA 20108 สหรัฐอเมริกา) ทุกวัฒนธรรมได้รับการดูแลในฟีนอลวัฒนธรรมสีแดงฟรีกลาง DMEM / F12 (Dulbecco ของการปรับเปลี่ยนขนาดกลางที่สำคัญ / สารผสมของแฮม 12 สารอาหาร Gibco) เสริมด้วย 5% (ปริมาตร / ปริมาตร) ซีรั่มลูกวัวของทารกในครรภ์ (JS ชีววิทยาศาสตร์ออสเตรเลีย) และ 1% (ปริมาตร / ปริมาตร) ยาปฏิชีวนะ (2 mm L-glutamine 100 U / มล Penicillin และ 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรนี้ streptomycin; Gibco) เซลล์เพาะเลี้ยงถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสความชื้นในก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% (CO2) ศูนย์บ่มเพาะ เมื่อเซลล์ถึงจุดบรรจบกลางวัฒนธรรมถูกลบออกจากขวดและเซลล์ที่ถูกล้างสามครั้งที่มีการฆ่าเชื้อ HBSS (แฮงค์สารละลายเกลือสมดุล Gibco) ชั้นเซลล์ไหลมารวมกันที่ถูกถอดออกเอนไซม์ใช้ Trypsin / EDTA (Gibco, USA) และ resuspended ในอาหารเลี้ยงเชื้อ ชีวิตของเซลล์ได้รับการประเมินโดยการย้อมสีที่สำคัญกับสีฟ้า Trypan (0.4% (น้ำหนัก / ปริมาตร); Sigma, USA) และจำนวนเซลล์ได้รับการพิจารณาโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง (Leitz Wetzlar, เยอรมนี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

mrc-5 fibroblast เซลล์ปอดมนุษย์ทารกในครรภ์บรรทัดได้จากชนิดของอเมริกันวัฒนธรรมของสะสม ( 20108 Manassas , VA , USA ) วัฒนธรรมทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ในฟีนอลเรดฟรีสื่อวัฒนธรรม dmem / F12 ( ดัลเบโค่การสรุปกลาง / แฮม 12 ธาตุอาหารที่ผสม gibco ) เสริมด้วย 5 % ( ปริมาตร / ปริมาตร ) ซีรัมลูกโค ( fetal JS วิทยาศาสตร์ชีวภาพ ออสเตรเลีย ) และ 1 % ( ปริมาตร / ปริมาตร ) สารปฏิชีวนะ ( 2 มม. L Glutamine , 100 U / ml เพนนิซิลินและ 100 μ g / ml gibco จัง ; ) การเพาะเลี้ยงเซลล์ไว้ที่ 37 ° C ใน humidified 5% ก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ ( CO2 ) ตู้ฟักไข่ เมื่อเซลล์ถึงบรรจบ วัฒนธรรมอาหารถูกเอาออกจากขวด แล้วเซลล์ก็ล้าง 3 ครั้งกับ hbss เป็นหมัน ( แฮงค์สมดุลเกลือโซลูชั่น gibco ) ชั้นเซลล์กระจู๋กระจี๋คือ enzymatically ลบออกโดยใช้เอนไซม์ / EDTA ( gibco , USA ) และ resuspended ในสื่อวัฒนธรรม เซลล์ถูกประเมิน โดยสำคัญย้อมด้วยไตรแพนสีฟ้า ( 0.4 % ( น้ำหนัก / ปริมาตร ) ; Sigma , USA ) และหมายเลขมือถือวิเคราะห์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง ( leitz Wetzlar เยอรมนี )