Plant material. Castanea sativa lea

Plant material. Castanea sativa leaves were collected during July 2003 in Mirandela, northern Portugal, and dried at room temperature for 3 weeks. A voucher specimen is preserved in our laboratory for further reference.
Preparation of the extracts. The dried leaves (2 g) were grounded (500 μm) and extracted three times (20 min., 500 r.p.m.) with each of the following solvents (50 ml) water, ethanol:water (4:6), ethanol:water (7:3) and absolute ethanol. The extracts were gathered, ethanol was evaporated at 40° under vacuum and then the resulting aqueous mixtures were lyophilized (Labconco, FreeZone 4.5, Kansas City, MO, USA).
Optimisation of the extraction procedure. The powdered leaves (4 g) were extracted 12 times (10 min., 500 r.p.m.) with 100 ml of the chosen solvent. Extract absorbance (280 and 350 nm) was measured after each extraction step. The cumulative absorbance was considered as 100% of extraction.
For studying the effect of time, one extraction (500 r.p.m.) was carried out, with samples being withdrawn at 5, 10 and 15 min., followed by two more extractions with samples collected at 5, 10, 15, 30, 45, 60 and 90 min. Absorbance (280 and 350 nm) was measured at each time interval.
After selecting the number and duration of the extractions, the influence of temperature was assessed by performing the extractions at 40°.
Determination of total phenolics. The amount of total phenolics in the extract was determined using the Folin Ciocalteu colorimetric method, according to a described procedure [11]. Briefly, 1 ml of Folin Ciocalteu reagent was added to 300 μl of extract dissolved in ethanol:water (7:3) (500 μg/ml), followed by the addition of 5 ml of 20% sodium carbonate solution. The mixture was made up to 10 ml with water and thorough shaking, and the absorbance was read after 20 min., at 735 nm (V 530, UV-VIS Spectrophotometer; Jasco Corporation, Tokyo, Japan). The contents were expressed as milligrams of gallic acid equivalents (GAE) per gram of dry extract. The measurements were performed in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พืชวัสดุ ใบซาเกาลัดถูกรวบรวมไว้ระหว่างเดือน 2003 กรกฎาคมใน Mirandela โปรตุเกสเหนือ และอบแห้งที่อุณหภูมิห้อง 3 สัปดาห์ ตัวอย่างสำคัญที่ยังคงอยู่ในห้องปฏิบัติการของเราสำหรับการอ้างอิงต่อไปการเตรียมสารสกัดจากใบ ใบไม้แห้ง (2 กรัม) มีสูตร (500 μm) และแยกสามครั้ง (20 นาที 500 รอบต่อนาที) ด้วยน้ำหรือสารทำละลาย (50 ml) ต่อไปนี้ เอทานอล: น้ำ (4:6), เอทานอล: น้ำ (7:3) และเอทานอลแน่นอน สารสกัดได้รวบรวม เอทานอลหายไปที่ 40 องศาภายใต้สุญญากาศแล้ว น้ำยาผสมอควีผลลัพธ์ถูก lyophilized (Labconco, FreeZone 4.5 แคนซัสซิตี้ MO สหรัฐอเมริกา)เพิ่มประสิทธิภาพของกระบวนการแยก ใบไม้ผง (4 กรัม) มีแยก 12 ครั้ง (10 นาที 500 รอบต่อนาที) กับ 100 ml ของตัวทำละลายท่าน สารสกัด absorbance (280 และ 350 nm) ที่วัดหลังจากแต่ละขั้นตอนแยก Absorbance สะสมถูกถือว่าเป็น 100% ของสกัดสำหรับการศึกษาผลของเวลา ทำสกัดหนึ่ง (500 รอบต่อนาที.) มีตัวอย่างการถอนที่ลด 5, 10 และ 15 ตาม ด้วยการสกัดมากกว่าสองกับตัวอย่างที่เก็บรวบรวมไว้ที่ 5, 10, 15, 30, 45, 60 และ 90 นาที Absorbance (280 และ 350 nm) เป็นวัดในแต่ละช่วงเวลาหลังจากเลือกเลขและระยะเวลาของการสกัด อิทธิพลของอุณหภูมิถูกประเมิน โดยทำการสกัดที่ 40°กำหนดรวม phenolics จำนวนรวม phenolics ในการดึงข้อมูลที่ถูกกำหนดโดยใช้วิธีเทียบเคียง Folin Ciocalteu ตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ [11] สั้น ๆ 1 ml ของรีเอเจนต์ Folin Ciocalteu ถูกเพิ่มเข้าไป μl 300 ของสารสกัดที่ละลายในเอทานอล: น้ำ (7:3) (500 μg/ml), ตาม ด้วยการเพิ่ม 5 ml ของ 20% โซเดียมคาร์บอเนต ส่วนผสมทำถึง 10 ml กับน้ำและสั่นอย่างละเอียด และ absorbance ที่ถูกอ่านหลังจาก 20 นาที ที่ 735 nm (V 530 เครื่องทดสอบกรดด่าง UV-VIS Jasco Corporation โตเกียว ญี่ปุ่น) เนื้อหาที่แสดงเป็น milligrams เทียบเท่ากรด gallic (GAE) ต่อกรัมของสารสกัดแห้ง วัดได้ดำเนินการใน triplicate

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุพืช Castanea sativa ใบถูกเก็บรวบรวมในระหว่างเดือนกรกฎาคม 2546 ในด้านของโปรตุเกสและแห้งที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 สัปดาห์ คูปองตัวอย่างจะถูกเก็บรักษาไว้ในห้องปฏิบัติการของเราสำหรับการอ้างอิง .
การเตรียมสารสกัด . ใบแห้ง ( 2 กรัม ) มีสายดิน ( 500 μ M ) และครั้งที่สาม ( 20 นาที ) 500 r.p.m. ) กับแต่ละของสารละลายต่อไปนี้ ( 50 มล. ) ในน้ำเอทานอล : น้ำ ( 4 : 6 ) , เอทานอล : น้ำ ( 7 : 3 ) และแน่นอนที่เพิ่มขึ้น สารสกัดที่ได้มาอยู่ที่ 40 องศา เอทานอลระเหยภายใต้สุญญากาศ แล้วส่งผลให้สารละลายผสมแห้ง ( แล็บคอนโก้ freezone ) , 4.5 , Kansas City , โม , USA ) .
เพิ่มประสิทธิภาพของกระบวนการสกัด ใบผง ( 4 กรัม ) จำนวน 12 ครั้ง สกัด ( 10 นาที 500 r.p.m. ) 100 ml ของตัวทำละลายที่เลือกสารสกัดจากการดูดกลืนแสง ( 280 และ 350 nm ) จะถูกวัดหลังจากการสกัดแต่ละขั้นตอน นสะสมเป็น 100 % สกัด
มาศึกษาผลของเวลา หนึ่งการสกัด ( 500 r.p.m. ) ได้ดำเนินการกับตัวอย่างถูกถอนที่ 5 , 10 และ 15 นาที ตามด้วยอีกสองทีมที่มีจำนวน 5 , 10 , 15 , 30 , 45 , 60 และ 90 นาทีการดูดกลืนแสง ( 280 และ 350 nm ) คือวัดที่แต่ละช่วงเวลา .
หลังจากเลือกจำนวนและระยะเวลาการสกัด อิทธิพลของอุณหภูมิคือการประเมินโดยการสกัดที่ 40 ° .
ปริมาณโพลีฟีนอลทั้งหมด ปริมาณของปริมาณ total phenolics ในแยก ตัดสินใจใช้ folin ciocalteu วิธี Colorimetric , ตามการอธิบายขั้นตอน [ 11 ] สั้น ๆ1 มิลลิลิตร folin ciocalteu สารเคมีเพิ่ม 300 μลิตรสารสกัดละลายในเอทานอล : น้ำ ( 7 : 3 ) ( 500 μ g / ml ) แล้วตามด้วยนอกเหนือจาก 5 มล. 20 % โซเดียมคาร์บอเนตโซลูชั่น ส่วนผสมจะถูกสร้างขึ้นเพื่อ 10 มิลลิลิตร กับน้ำและเขย่าอย่างละเอียดและการดูดกลืนแสงได้อ่านหลังจาก 20 นาที ที่ 735 nm ( V 530 , เครื่องไอออน ; jasco Corporation , โตเกียว , ญี่ปุ่น )เนื้อหาถูกแสดงเป็นมิลลิกรัมของกรดแกลลิคเทียบเท่า ( เก ) ต่อกรัมสารสกัดแห้ง การวัดจำนวน
ทั้งสามใบ