2.2. Structural identification of th

2.2. Structural identification of the compounds and HPLCconditions
Nuclear magnetic resonance (NMR) spectra of the compound in CDCl3 were obtained in a Bruker Avance 2 (500 MHz) spectrometer, operating at 500.13 MHz for 1H and 125.13 MHz for 13C. TMS was employed as internal standard. Two-dimensional experiments (COSY, HSQC, HMBC, and ROESY) were applied using standard sequences. ESI-HRMS spectra were recorded on a BrukermicrOTOFQ2 mass spectrometer. HPLC separations were carrier out using a Thermo Separations Spectra Series P100 pump, a Thermo Separations Refracto monitor IV RI detector and a Thermo Separations Spectra Series UV100 detector, with simultaneous UV(220 nm) and RI detection. An YMC RP-18 (5 mm, 20 mm × 250 mm)column working at a flow rate of 5 ml/min was used for separations.
2.3. Plant material
A. cryptantha (Clos) Reiche (Apiaceae) collected in two locations belong to the Iglesia district in the Central Andes area, SanJuan province, Argentina: Bauchaceta (2700 m.a.s.l., n.v. “yerbadel soldado”, A. cryptantha-BAU, voucher number CORD 1193) and Agua Negra (4500 m.a.s.l., n.v. “cuerno de cabra”, A. cryptantha-AN, voucher number, CORD 1188) during flowering period (April2010), were identified by Dr. L. Ariza Espinar in Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal (IMBIV-CONICET-Universidad Nacionalde Córdoba). The vouchers have been saved into Museo Botánicode Córdoba (Argentina).
2.4. Preparation of extracts from A. cryptantha
Extracts were obtained from the air-dried leaves and stems(250 g finely grinded of each collection), by successive extractionswith petroleum ether (PE), dichloromethane (DCM) and methanol (MeOH) under reflux. to afford PEE, DCME, and MeOHE extracts. Table 1, show percentual yield of crude extracts (%, w/w, of drystarting material), voucher number, botanical, and vernacular name of each sample.
2.5. Bioassay-guided fractionation of PEE
According to the results of antimicrobial activity, the petroleum ether extract (PEE, 20 g) was successively permeated through a Sephadex LH-20 column (column length 35 cm, diameter 4 cm) previously equilibrated with petroleum ether–methanol–chloroform (2:1:1). Some eleven fractions of 50 ml each were obtained.After TLC comparison using ethyl acetate–petroleum ether, 2:8 as mobile phase (detection under UV light and after spraying withp-anisaldehyde), fractions with similar TLC patterns were combined and tested in antibacterial activity (Table 2): 1 (220 mg); 2(1467 mg); 3 (1400 mg); 4 (1052 mg); 5 (2410 mg); 6 (4813 mg); 7(5608 mg); 8 (1992 mg); 9 (750 mg); 10 (176 mg).Fractions 6 and 7 (9600 mg) were applied to a silica column chromatography (column length 70 cm, diameter 5 cm, containing 300 gsilica gel, 0.063–0.2 mesh, Merck 60). Ten fractions were obtained (A–J) based on TLC profiles (mobile phase PE:EtOAc, 8:2). FractionB showed the highest antibacterial effect and fractions C–E was moderate active.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2 การ identification โครงสร้างของสารประกอบและ HPLCconditionsการสั่นพ้องแม่เหล็กนิวเคลียร์ (NMR) แรมสเป็คตราของสารประกอบใน CDCl3 ได้รับในการ Bruker Avance 2 (500 MHz) สเปกโตรมิเตอร์ ปฏิบัติที่ 500.13 MHz 1 H และ 125.13 MHz สำหรับค. 13 TMS ถูกจ้างเป็นมาตรฐานภายใน ทดลองแบบสองมิติ (โคซี่ HSQC, HMBC และ ROESY) ถูกนำไปใช้การใช้ลำดับมาตรฐาน สาขา ESI แรมสเป็คตราถูกบันทึกไว้ในแบบ BrukermicrOTOFQ2 โดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ ผู้ขนส่งออกใช้ปั๊มเทอร์โมประโยชน์แรมสเป็คตราชุด P100 จับจอ IV RI เป็นเทอร์โมประโยชน์ Refracto และตัวเทอร์โมประโยชน์แรมสเป็คตราชุด UV100 จับ ตรวจจับ UV(220 nm) และ RI พร้อมประโยชน์ HPLC ได้ มีใช้คอลัมน์ YMC RP-18 (5 มม. 20 มม. × 250 มม.) การทำงานในอัตรา 5 ml/min flow หา2.3. พืชวัสดุA. cryptantha (อื่น) Reiche (Apiaceae) รวบรวม 2 ที่ตั้งอยู่ในอำเภอ Iglesia บริเวณกลางอังเดส SanJuan จังหวัด อาร์เจนติน่า: Bauchaceta (2700 m.a.s.l., n.v. "yerbadel soldado", A. ที่ cryptantha- บัว ใบสำคัญหมายเลข 1193 สาย) และเอกัว Negra (4500 m.a.s.l., n.v. "cuerno de cabra", A. cryptantha อัน หมายเลขใบสำคัญ สาย 1188) ช่วง flowering (April2010), มี identified โดยดร. L. Ariza Espinar ใน Vegetal Instituto Multidisciplinario เด Biología (IMBIV-CONICET-Universidad Nacionalde กอร์โดบา) ใบสำคัญที่ได้รับการบันทึกในทุก Botánicode กอร์โดบา (อาร์เจนตินา)2.4. Preparation of extracts from A. cryptanthaExtracts were obtained from the air-dried leaves and stems(250 g finely grinded of each collection), by successive extractionswith petroleum ether (PE), dichloromethane (DCM) and methanol (MeOH) under reflux. to afford PEE, DCME, and MeOHE extracts. Table 1, show percentual yield of crude extracts (%, w/w, of drystarting material), voucher number, botanical, and vernacular name of each sample.2.5. Bioassay-guided fractionation of PEEAccording to the results of antimicrobial activity, the petroleum ether extract (PEE, 20 g) was successively permeated through a Sephadex LH-20 column (column length 35 cm, diameter 4 cm) previously equilibrated with petroleum ether–methanol–chloroform (2:1:1). Some eleven fractions of 50 ml each were obtained.After TLC comparison using ethyl acetate–petroleum ether, 2:8 as mobile phase (detection under UV light and after spraying withp-anisaldehyde), fractions with similar TLC patterns were combined and tested in antibacterial activity (Table 2): 1 (220 mg); 2(1467 mg); 3 (1400 mg); 4 (1052 mg); 5 (2410 mg); 6 (4813 mg); 7(5608 mg); 8 (1992 mg); 9 (750 mg); 10 (176 mg).Fractions 6 and 7 (9600 mg) were applied to a silica column chromatography (column length 70 cm, diameter 5 cm, containing 300 gsilica gel, 0.063–0.2 mesh, Merck 60). Ten fractions were obtained (A–J) based on TLC profiles (mobile phase PE:EtOAc, 8:2). FractionB showed the highest antibacterial effect and fractions C–E was moderate active.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 โครงสร้างไอออนบวกสายระบุของสารและ HPLCconditions
นิวเคลียร์ด้วยคลื่นสนามแม่เหล็ก (NMR) สเปกตรัมของสารประกอบใน CDCl3 ที่ได้รับใน Bruker Avance 2 (500 MHz) สเปกโตรมิเตอร์, การดำเนินงานที่ 500.13 MHz สำหรับ 1H และ 125.13 MHz สำหรับ 13C TMS ถูกจ้างมาเป็นมาตรฐานภายใน การทดลองสองมิติ (โคซี่, HSQC, HMBC และ ROESY) ถูกนำไปใช้โดยใช้ลำดับมาตรฐาน สเปกตรัม ESI-HRMS ถูกบันทึกไว้ในสเปกโตรมิเตอร์มวล BrukermicrOTOFQ2 แยก HPLC เป็นผู้ให้บริการโดยใช้แบบเทอร์โม Spectra แยกปั๊ม P100, เทอร์โมในการตรวจสอบเครื่องตรวจจับแยก Refracto IV RI และเทอร์โมแยก Spectra ชุดตรวจจับ UV100 กับรังสียูวีพร้อมกัน (220 นาโนเมตร) และการตรวจสอบของโรตารีสากล YMC RP-18 (5 มิลลิเมตร 20 มิลลิเมตร× 250 มิลลิเมตร) คอลัมน์ทำงานในอัตราโอ๊ยชั้น 5 มล. / นาทีถูกนำมาใช้สำหรับการแยก.
2.3 โรงงานวัสดุ
A. cryptantha (Clos) Reiche (Apiaceae) เก็บรวบรวมไว้ในสองสถานที่อยู่ในอำเภอโบสถ์ในพื้นที่ภาคกลางเทือกเขาแอนดีจังหวัด Sanjuan อาร์เจนตินา: Bauchaceta (2700 masl, เนวาด้า "yerbadel เบร์โต้" เอ cryptantha บัว, บัตรกำนัลจำนวนสาย 1193) และ Agua Negra (4500 masl, เนวาด้า "Cuerno เด Cabra" เอ cryptantha-จำนวนคูปอง CORD 1188) ในระหว่างชั้น owering ระยะเวลา (April2010) เป็นสายระบุ ed โดยดร. แอล Ariza Espinar ใน Instituto de Multidisciplinario Biologia Vegetal (IMBIV -CONICET-Universidad Nacionalde กอร์โดบา) บัตรกำนัลที่ได้รับการบันทึกลงในพิพิธภัณฑ์Botánicodeกอร์โดบา (อาร์เจนตินา).
2.4 การเตรียมสารสกัดจาก cryptantha เอ
ที่ได้รับสารสกัดจากใบอากาศแห้งและลำต้น (250 กรัมบด Nely สายของแต่ละคอลเลกชัน) โดยปิโตรเลียมอีเทอร์ extractionswith เนื่อง (PE), ไดคลอโรมีเทน (DCM) และเมทานอล (เมธานอล) ภายใต้ UX อีกชั้น ที่จะจ่ายฉี่ DCME และสารสกัดจาก MeOHE ตารางที่ 1 แสดงผลผลิต percentual ของสารสกัด (% w / W, วัสดุ drystarting) หมายเลขคูปอง, พฤกษศาสตร์และชื่อภาษาของแต่ละตัวอย่าง.
2.5 แยกชีวภาพแนะนำของพี่
ตามผลของฤทธิ์ต้านจุลชีพ, สารสกัดปิโตรเลียมอีเทอร์ (พี่ 20 กรัม) ถูกแทรกซึมเนื่องผ่าน Sephadex LH-20 คอลัมน์ (ความยาว 35 ซมคอลัมน์ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 4 ซม.) equilibrated ก่อนหน้านี้กับปิโตรเลียม ether- เมทานอล-คลอโรฟอร์ม (2: 1: 1) บางสิบเอ็ดเศษของ 50 มลแต่ละมีการเปรียบเทียบ obtained.After TLC โดยใช้อีเธอร์อะซิเตปิโตรเลียมเอทิล 2: 8 เฟสเคลื่อนที่ (การตรวจสอบภายใต้แสงยูวีและหลังการฉีดพ่น withp-anisaldehyde) เศษส่วนที่มีรูปแบบที่คล้ายกัน TLC มารวมกันและผ่านการทดสอบในการต้านเชื้อแบคทีเรีย กิจกรรม (ตารางที่ 2): 1 (220 มก.); 2 (1,467 มก.); 3 (1,400 มก.); 4 (1,052 มก.); 5 (2,410 มก.); 6 (4813 มก.); 7 (5608 มก.); 8 (1992 มก.); 9 (750 มก.); 10 (176 มก.) .Fractions 6 และ 7 (9600 มก.) ถูกนำไปใช้กับคอลัมน์ซิลิกา (ความยาว 70 ซม. คอลัมน์ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 5 ซม. ที่มีเจล 300 gsilica, 0.063-0.2 ตาข่ายเมอร์ค 60) สิบเศษที่ได้รับ (เจ) ตาม TLC โปรไฟ les (เฟสเคลื่อนที่ PE: EtOAc 8: 2) FractionB แสดงให้เห็นผลต้านเชื้อแบคทีเรียที่สูงที่สุดและเศษส่วน C-E ที่ใช้งานอยู่ในระดับปานกลาง