An alkaline trypsin was purified fr

An alkaline trypsin was purified from the viscera of zebra blenny (Salaria basilisca) by ammonium sulphate
(4080% saturation) precipitation, Sephadex G-100, Mono Q-Sepharose and ultrafiltration. A yield of 12% with a purification-fold of 4.2 was obtained. The trypsin had an apparent molecular weight of 27 kDa. Soybean trypsin inhibitor and phenylmethylsulfonyl fluoride showed a strong inhibitory effect on the purified trypsin. Trypsin had maximal activity at pH 9.5 and 60 C for the hydrolysis of Na-benzoyl-DL-arginine-pnitroanilide (BAPNA). It was stable at low temperatures and in the pH range of 7.012.0. The N-terminal amino acid sequence of the first 12 amino acids of the purified protease wasIVGGRECTEPSQ. S. basilisca trypsin, which showed high homology with other fish trypsins, had a charged Arg residue at position 5, where Tyr iscommon in marine vertebrates and mammalian trypsins. The trypsin kinetic constants, Kmand kcat for BAPNA, were 0.6 mM and 1.38 s1, respectively.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทริปซินเป็นด่างที่บริสุทธิ์จากศพของตั๊กแตนหินม้าลาย (Salaria basilisca) โดยแอมโมเนียมซัลเฟตฝน (40 80% เข้ม) Sephadex G-100, Mono Q Sepharose ก ultrafiltration ผลตอบแทน 12% กับฟอกพับของ 4.2 ได้รับ ทริปซินที่มีน้ำหนักโมเลกุลชัดเจนของ 27 kDa ทริปซินถั่วเหลืองสารยับยั้งและ phenylmethylsulfonyl ฟลูออไรด์พบทริปซินบริสุทธิ์ผลลิปกลอสไขเป็นแข็งแกร่ง ทริปซินมีกิจกรรมสูงสุดที่ pH 9.5 และ 60 C สำหรับไฮโตรไลซ์นาเบนโซอิล-DL-อาร์จินีน-pnitroanilide (BAPNA) มันมีเสถียรภาพ ที่อุณหภูมิต่ำ และช่วง pH ของ 7.0 12.0 ลำดับกรดอะมิโนเอ็นเทอร์มินัลของกรดอะมิโนก่อน 12 ของ wasIVGGRECTEPSQ รติเอสบริสุทธิ์ S. basilisca ทริปซิน ซึ่งแสดงให้เห็นว่า homology สูง ด้วย trypsins ปลาอื่น ๆ มีสารตกค้างอาร์กิวเมนต์ของค่าการคิดค่าธรรมเนียมที่ตำแหน่ง 5 ที่ iscommon Tyr ในทะเล vertebrates mammalian trypsins ทริปซินเดิม ๆ ค่าคงที่ kcat Kmand ใน BAPNA, 0.6 mM และ 1.38 s 1 ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

trypsin ด่างบริสุทธิ์จากอวัยวะภายในของตีนม้าลาย (Salaria basilisca) โดยแอมโมเนียมซัลเฟต
(40? 80% อิ่มตัว) ฝน Sephadex G-100, Mono Q-Sepharose และกรอง ผลผลิต 12% ที่มีความบริสุทธิ์เท่า 4.2 ที่ได้รับ trypsin มีน้ำหนักโมเลกุล 27 กิโลดาลตันของ ถั่วเหลืองยับยั้ง trypsin และฟลูออไร phenylmethylsulfonyl พบว่ามีฤทธิ์ในการยับยั้งที่แข็งแกร่งใน trypsin บริสุทธิ์ trypsin มีกิจกรรมสูงสุดที่ pH 9.5 และ 60 องศาเซลเซียสสำหรับการย่อยสลายของนาออกไซด์-DL-arginine-pnitroanilide (BAPNA) มันเป็นมีเสถียรภาพที่อุณหภูมิต่ำและอยู่ในช่วงพีเอช 7.0? 12.0 N-ขั้วลำดับกรดอะมิโนในครั้งแรก 12 กรดอะมิโนของโปรติเอส wasIVGGRECTEPSQ บริสุทธิ์ เอส trypsin basilisca ซึ่งแสดงให้เห็นคล้ายคลึงกันสูงด้วย trypsins ปลาอื่น ๆ มีสารตกค้าง Arg คิดค่าบริการ 5 ตำแหน่งที่เทอร์ iscommon สัตว์มีกระดูกสันหลังในทะเลและ trypsins เลี้ยงลูกด้วยนม ค่าคงที่เกี่ยวกับการเคลื่อนไหว trypsin, Kmand kcat สำหรับ BAPNA เป็น 0.6 มิลลิวินาทีและ 1.38 1 ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็นเอนไซม์อัลคาไลน์ บริสุทธิ์จากอวัยวะภายในของม้าลายตีน ( salaria basilisca ) ด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต
( 40  80 เปอร์เซ็นต์ความอิ่มตัวด้วย Sephadex G-100 ซึ่ง ) , โมโนและกรอง . ผลตอบแทนที่ 12% ด้วยการพับของ 4.2 ได้ . เอนไซม์มีน้ำหนักโมเลกุลที่ชัดเจนของ 27 กิโลดาลตันทริป phenylmethylsulfonyl ฟลูออไรด์และถั่วเหลืองยับยั้งแสดงผลยับยั้งเอนไซม์ที่แข็งแรงในบริสุทธิ์ . เอนไซม์มีกิจกรรมสูงสุดที่พีเอช 9.5 และ 60  C สำหรับการย่อยสลายของ na เบนโซอาร์ pnitroanilide DL ( bapna ) มันมีความคงตัวที่อุณหภูมิต่ำ และในช่วง pH 7.0  12.0 .ที่ถูกลำดับกรดอะมิโนของแรก 12 กรดอะมิโนของโปรตีนและเอนไซม์ wasivggrectepsq . เอส basilisca เอนไซม์ซึ่งมีลำดับสูงกับ trypsins ปลาอื่น ๆมีคิดไม่ดีตกค้างที่ตำแหน่ง 5 ที่ tyr iscommon ในสัตว์มีกระดูกสันหลังสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมและ trypsins . การเปลี่ยนแปลงพลังงานจลน์ค่าคงที่ kmand kcat สำหรับ bapna , 0.6 mm และ 1.38 S  1 ตามลำดับ