The overproductionof aromatic amino

The overproduction
of aromatic amino acids and related compounds with
E. coli as well as strategies for improved supply of precursors were
reviewed in the past (see, for example, Gosset, 2009; Sprenger,
2007). Draths and co-workers increased the synthesis of DHS
by using an E. coli strain lacking shikimate dehydrogenase and
having elevated activities of plasmid-encoded transketolase, 2-
dehydro-3-deoxy-d-arabino-heptonate 7-phosphate synthase, and
3-dehydroquinate synthase. The conversion of DHS to cis, cismuconic
acid involved three enzymatic steps (Fig. 4), i.e. the
dehydration of DHS to protocatechuate by DHS dehydratase
(encoded by aroZ from Klebsiella pneumoniae), the decarboxylation
of protocatechuate to catechol by protocatechuate decarboxylase
(encoded by aroY from K. pneumoniae) and the conversion of catechol
to cis, cis-muconic acid by catechol 1,2-dioxygenase (encoded
by catA from Acinetobacter calcoaceticus). The heterologous genes
aroZ, aroY, and catA were expressed from two additional plasmids
(Draths and Frost, 1994). During batch cultivation of this E. coli
strain, about 17 mM cis, cis-muconic acid were accumulated in the
culture superanant with a yield of 0.3 mol/mol glucose (Draths and
Frost, 1994). In a follow-up work, two copies of the aroZ gene were
inserted into the E. coli chromosome and aroY and catA gene were
again expressed from a plasmid. With this strain up to 260 mM cis,
cis-muconic acid were accumulated after 48 h of culturing under
fed-batch conditions resulting in a yield of 0.2 mol/mol glucose (Niu
et al., 2002). After removing cells and soluble proteins, the hydrogenation
of cis, cis-muconic acid with 10% Pt on carbon at 3400 kPa
of hydrogen pressure for 2.5 h at ambient temperature afforded a
97% (mol/mol) conversion of cis, cis-muconic acid into adipic acid
(Niu et al., 2002).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การ overproductionกรดอะมิโนหอมและสารที่เกี่ยวข้องกับE. coli เป็นกลยุทธ์สำหรับการจัดหาปรับปรุง precursors ได้ตรวจทานในอดีต (ดู เช่น Gosset, 2009 Sprenger2007) . Draths และเพื่อนร่วมงานเพิ่มสังเคราะห์ของ DHSโดยต้องใช้ E. coli ขาด shikimate dehydrogenase และมีการยกระดับกิจกรรมของ plasmid เข้ารหัส transketolase, 2-dehydro-3-deoxy-d-arabino-heptonate synthase 7 ฟอสเฟต และ3 dehydroquinate synthase การแปลงของ DHS cis, cismuconicกรดที่เกี่ยวข้องกับเอนไซม์ในระบบสามขั้นตอน (Fig. 4), เช่นการคายน้ำของ DHS จะ protocatechuate โดย DHS dehydratase(การเข้ารหัส ด้วย aroZ จาก Klebsiella pneumoniae), การ decarboxylationของ protocatechuate กับ catechol โดย protocatechuate decarboxylase(การเข้ารหัส โดย aroY จากคุณ pneumoniae) และการแปลง catecholการ cis กรด cis muconic โดย 1, 2 catechol- (เข้ารหัส dioxygenaseโดย catA จาก Acinetobacter calcoaceticus) ยีน heterologousaroZ, aroY และ catA ถูกแสดงจาก plasmids สองเพิ่มเติม(Draths และ Frost, 1994) ในระหว่างการเพาะปลูกชุดของ E. coli นี้ต้องใช้ เกี่ยวกับ 17 มม. cis, cis muconic กรดถูกสะสมในการsuperanant วัฒนธรรมกับผลผลิตของน้ำตาลกลูโคส 0.3 โมล/โมล (Draths และน้ำแข็ง 1994) ในการทำงานการติดตามผล มีสำเนาของยีน aroZแทรก coli E. ที่มียีนโครโมโซม และ aroY และ catAอีก แสดงเป็น plasmid นี้สายพันธุ์ถึง 260 มม. cisมีสะสมกรด cis muconic หลัง h 48 ของ culturing ภายใต้เกิดผลตอบแทนของ 0.2 โมล/โมลกลูโคส (นิวเงื่อนไขชุดงานเลี้ยงและ al., 2002) หลังจากเอาออกเซลล์ และโปรตีนที่ละลายน้ำ การไฮโดรจีเนชันของ cis, cis muconic กรด 10% Pt บนคาร์บอนที่ 3400 kPaของไฮโดรเจน h 2.5 ที่อุณหภูมินี่กดดันการแปลง cis, cis muconic กรดเป็นกรด adipic 97% (โมล/โมล)(นิวและ al., 2002)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ล้นเกินของกรดอะมิโนที่มีกลิ่นหอมและสารที่เกี่ยวข้องกับอี coli เช่นเดียวกับกลยุทธ์สำหรับการจัดหาที่ดีขึ้นของสารตั้งต้นได้รับการตรวจสอบในอดีตที่ผ่านมา(ดูตัวอย่างเช่น Gosset 2009; Sprenger, 2007) Draths และเพื่อนร่วมงานที่เพิ่มขึ้นการสังเคราะห์ของ DHS โดยใช้สายพันธุ์เชื้อ E. coli ขาด dehydrogenase shikimate และมีกิจกรรมสูงของพลาสมิดtransketolase เข้ารหัส 2- dehydro-3-Deoxy-D-arabino-heptonate เทส 7 ฟอสเฟตและ3 เทส -dehydroquinate การแปลงของ DHS ที่จะถูกต้อง, cismuconic กรดที่เกี่ยวข้องกับสามขั้นตอนของเอนไซม์ (รูปที่ 4.) คือการคายน้ำของ DHS เพื่อ protocatechuate โดย DHS dehydratase (เข้ารหัสโดย aroZ จาก Klebsiella pneumoniae) decarboxylation ของ protocatechuate เพื่อ catechol โดย decarboxylase protocatechuate (เข้ารหัสโดย อร่อยจากเค pneumoniae) และการเปลี่ยนแปลงของ catechol จะถูกต้องกรดถูกต้อง-muconic โดย catechol 1,2-dioxygenase (เข้ารหัสโดยCATA จาก Acinetobacter calcoaceticus) ยีน heterologous aroZ, อร่อยและ CATA ถูกแสดงจากสองพลาสมิดเพิ่มเติม(Draths และฟรอสต์, 1994) การเพาะปลูกในช่วงนี้ชุดของเชื้อ E. coli สายพันธุ์ประมาณ 17 มิลลิถูกต้องกรดถูกต้อง-muconic สะสมในsuperanant วัฒนธรรมที่มีอัตราผลตอบแทน 0.3 mol กลูโคส / mol (ที่ Draths และฟรอสต์, 1994) ในการทำงานที่ติดตามสองชุดของยีน aroZ ถูกใส่เข้าไปในโครโมโซมเชื้อE. coli และอร่อยและยีน CATA ถูกแสดงอีกครั้งจากพลาสมิด กับสายพันธุ์นี้ถึง 260 มิลลิถูกต้อง, กรดซิ-muconic สะสมหลังจาก 48 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงภายใต้เงื่อนไขที่เลี้ยงชุดส่งผลให้อัตราผลตอบแทนที่0.2 mol กลูโคส / mol (ที่ Niu et al., 2002) หลังจากลบเซลล์และโปรตีนที่ละลายน้ำได้ไฮโดรจิของถูกต้องกรดถูกต้อง-muconic 10% Pt คาร์บอนที่ 3400 กิโลปาสคาลของความดันไฮโดรเจน2.5 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องอึด97% (โมล / mol) แปลงถูกต้อง, ถูกต้อง-muconic กรดเป็นกรด adipic (Niu et al., 2002)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดย overproduction
หอมกรดอะมิโนและสารประกอบที่เกี่ยวข้องกับกับ
E . coli รวมทั้งกลยุทธ์สำหรับการปรับปรุงการจัดหาสารตั้งต้นคือ
ดูในอดีต ( ดูตัวอย่างเช่นกอเซิต , 2009 ; sprenger
, 2550 ) draths และเพื่อนร่วมงานเพิ่มการสังเคราะห์ของ DHS
โดยใช้เอนไซม์และ Escherichia coli สายพันธุ์ขาดชิคิเมต
มีกิจกรรมยกระดับของพลาสมิดที่ transketolase 2 -
dehydro-3-deoxy-d-arabino-heptonate 7-phosphate synthase และ
3-dehydroquinate เทส . การแปลงของ DHS ที่จะ CIS , cismuconic
กรดที่เกี่ยวข้อง 3 ขั้นตอน ( รูปที่ 4 ) ด้วยเอนไซม์ เช่น
dehydration ของ DHS ที่จะ protocatechuate โดย DHS การ
( เข้ารหัสโดย Klebsiella pneumoniae aroz จาก ) , เงือก
ของ protocatechuate กับแคติคอลโดย protocatechuate ดีคาร์บอกซิเลส
( เข้ารหัสโดย อร่ จาก K .ประเทศ ) และการแปลงแคติคอล
ให้ CIS , CIS muconic กรดแคติคอล 1,2-dioxygenase ( เข้ารหัส
โดย CATA จาก Accipitriformes ) ส่วนชนิดยีน
aroz อร่ , และลงแสดงออกจากสองเพิ่มเติม )
( draths และฟรอสท์ , 1994 ) ในระหว่างการผลิตชุดของ E . coli
เมื่อย CIS เกี่ยวกับ 17 mm , CIS muconic กรดสะสมใน
วัฒนธรรม superanant กับผลผลิตของ 0.3 โมล / โมลกลูโคส ( draths และ
ฟรอสต์ , 1994 ) ในการติดตามผลการทำงาน สองสำเนาของยีนเป็น aroz
แทรกลงใน E . coli โครโมโซมและยีน และอร่ ลงอยู่
อีกครั้งแสดงจากพลาสมิด กับสายพันธุ์นี้ขึ้นเพื่อ CIS 260 มม.
CIS muconic กรดสะสมหลังจาก 48 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงภายใต้สภาวะที่เลี้ยงรุ่น
ส่งผลให้ผลผลิตของ 02 โมล / โมลกลูโคส ( Niu
et al . , 2002 ) หลังจากเอาเซลล์และโปรตีนที่ละลายน้ำได้ , ไฮโดรจิเนชัน
ของ CIS , CIS muconic acid 10% PT บนคาร์บอนที่ 3400 กิโลปาสคาล
ความดันไฮโดรเจนสำหรับ 2.5 H ที่อุณหภูมิห้องช่วย
97% ( โมล / โมล ) การแปลงของ CIS , CIS muconic กรดเป็นกรด adipic
( Niu et al . , 2002 ) .