The generation of H2O2 in thylakoid

The generation of H2O2 in thylakoids isolated from secondary
barley leaves was measured indirectly by employing a POBN spin
trap. POBN reacts with the secondary radicals which are generated
by the interaction of OH• with ethanol, and hydroxyl radicals
are formed via the Fenton reaction. The secondary radicals formed
are relatively stable -hydroxyethyl-POBN adducts, which can be determined by EPR spectroscopy. Fig. 5a shows the EPR spectrum
of the H2O2-derived carbon-centred radicals trapped by POBN
obtained from isolated thylakoids exposed to 500 mol quantam−2
s−1 of white light for 3 min. No signal was obtained in the dark
(Fig. 5b) and in the illuminated sample in the absence of FeEDTA
(Fig. 5c), which indicates that OH• radicals originate from the H2O2
generated during the illumination. Fig. 6 shows the production of
H2O2-derived radicals during the development of barley secondary
leaves between 18 and 35 DAS with (+) and without (−) NaN3.
It is apparent that the production of H2O2 increases during the
development of barley reaching the highest value 25 DAS. Thereafter,
production of H2O2 was temporally decreased and increased again in the late stages of senescence when chl levels had already
diminished substantially. Comparison of H2O2 production in samples
illuminated with and without NaN3 showed a strong increase
in hydrogen peroxide production when NaN3 was present in the
reaction medium. The effect of uncoupling was more pronounced
in younger thylakoids. Expressed in numbers, production of H2O2
was 2.48 times higher for day 18; 2.46 for day 21; 2.14 for day 25;
1.81 for day 29; 1.78 for day 32 and 1.78 for day 35. In parallel, the
production of H2O2 was determined by using Amplex Red which
reacts with H2O2 creating a product that can be detected with a
fluorimeter. The determination of H2O2 with Amplex Red showed
similar results (Fig. 7), H2O2 increases during the development of
barley reaching the highest value 29 DAS. Thereafter, the production
of H2O2 decreases and finally increases at the late stages of
senescence. Moreover, these results further confirm that OH• radicals
measured with EPR spectroscopy indeed originate from the
H2O2 generated during the illumination.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รุ่น H2O2 ใน thylakoids แยกต่างหากจากรองใบข้าวบาร์เลย์ถูกวัดโดยทางอ้อม โดยใช้หมุน POBNกับดัก POBN ทำปฏิกิริยากับอนุมูลรองซึ่งสร้างขึ้นโดยการโต้ตอบของ OH• กับเอทานอล อนุมูลไฮดรอกซิลมีรูปแบบที่ผ่านปฏิกิริยา Fenton อนุมูลรองที่เกิดขึ้นจะค่อนข้างมีเสถียรภาพ - hydroxyethyl POBN adducts ซึ่งสามารถถูกกำหนด โดยชนิด epr ที่ทุก ๆ ก Fig. ของ 5a แสดงสเปกตรัมชนิด epr ที่ทุก ๆของที่มา H2O2 ศูนย์กลางคาร์บอนอนุมูลติดอยู่ โดย POBNรับจาก thylakoids แยกตาก 500 โมล quantam−2s−1 ของแสงขาวใน 3 นาที ไม่มีสัญญาณไม่ได้ในมืด(Fig. 5b) ในตัวอย่างของ FeEDTA สว่างกินซี 5), ซึ่งบ่งชี้ว่า อนุมูล OH• มาจาก H2O2สร้างขึ้นระหว่างแสงสว่าง Fig. 6 แสดงการผลิตอนุมูล H2O2 ได้มาในระหว่างการพัฒนาข้าวบาร์เลย์รองใบระหว่าง 18 และ 35 DAS กับ (+) และไม่ มี (−) NaN3เห็นได้ชัดเจนว่า การผลิต H2O2 เพิ่มในระหว่างการการพัฒนาของข้าวบาร์เลย์ถึงค่าสูงสุด 25 DAS หลังจากนั้นผลิต H2O2 temporally ลดลง และเพิ่มขึ้นอีกในระยะปลายของ senescence เมื่อ chl ระดับได้แล้วลดลงมาก เปรียบเทียบการผลิต H2O2 ในตัวอย่างสว่างมี และไม่ มี NaN3 พบการเพิ่มขึ้นแข็งแกร่งในการผลิตไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เมื่อ NaN3 ในการปฏิกิริยาปานกลาง ผลของ uncoupling ได้ชัดเจนยิ่งขึ้นใน thylakoids อายุ แสดงตัวเลข ผลิต H2O2มี 2.48 เท่าวัน 18 2.46 วัน 21 2.14 วัน 251.81 วัน 29 1.78 วัน 32 และ 1.78 วัน 35 พร้อมกัน การกำหนดโดย Amplex แดงผลิต H2O2 ซึ่งทำปฏิกิริยากับ H2O2 สร้างผลิตภัณฑ์ที่สามารถตรวจพบได้ด้วยการfluorimeter แสดงให้เห็นความมุ่งมั่นของ H2O2 กับ Amplex แดงผลคล้ายกัน (Fig. 7), H2O2 เพิ่มในระหว่างการพัฒนาข้าวบาร์เลย์ถึงค่าสูงสุด 29 DAS หลังจากนั้น การผลิตของ H2O2 ลด และในที่สุด เพิ่มขึ้นในระยะปลายของsenescence นอกจากนี้ ยืนยันผลลัพธ์เหล่านี้เพิ่มเติมว่าอนุมูล OH•วัดกับชนิด epr ที่ทุกๆ กแน่นอนมาจากการH2O2 ที่สร้างขึ้นระหว่างแสงสว่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รุ่นของ H2O2 ใน thylakoids
รองที่แยกได้จากใบข้าวบาร์เลย์วัดทางอ้อมโดยการหมุนPOBN
กับดัก POBN
ทำปฏิกิริยากับอนุมูลรองที่สร้างโดยการทำงานร่วมกันของโอ•ที่มีเอทานอลและอนุมูลไฮดรอกจะเกิดขึ้นผ่านทางปฏิกิริยาเฟนตัน
อนุมูลรองที่เกิดขึ้นมีความเสถียรค่อนข้าง adducts -hydroxyethyl-POBN ซึ่งจะถูกกำหนดโดยสเปคโทร EPR
รูป 5a แสดงให้เห็นถึงคลื่นความถี่ EPR
ของ H2O2 ที่ได้มาจากอนุมูลคาร์บอนศูนย์กลางติด POBN
ที่ได้รับจาก thylakoids แยกสัมผัสกับ 500 mol quantam-2
s-1 ของแสงสีขาวเป็นเวลา 3 นาที ไม่มีสัญญาณที่ได้รับในที่มืด
(รูป. 5b) และกลุ่มตัวอย่างที่ส่องสว่างในตัวตนของ FeEDTA
(รูป. 5c) ซึ่งแสดงให้เห็นว่าโอ•อนุมูลมาจาก H2O2
สร้างขึ้นในระหว่างการส่องสว่าง รูป 6
แสดงให้เห็นถึงการผลิตของอนุมูลH2O2
ที่ได้มาในระหว่างการพัฒนารองข้าวบาร์เลย์ใบระหว่างวันที่18 และ 35 DAS กับ (+) และโดยไม่ (-) NaN3.
มันเห็นได้ชัดว่าการผลิตเพิ่มขึ้น H2O2
ในช่วงการพัฒนาของข้าวบาร์เลย์ถึงค่าสูงสุด25 DAS หลังจากนั้นเป็นต้นมาการผลิตของ H2O2 ลดลงชั่วคราวและเพิ่มขึ้นอีกครั้งในช่วงปลายของการเสื่อมสภาพเมื่อระดับ CHL มีอยู่แล้วลดลงอย่างมีนัยสำคัญ การเปรียบเทียบการผลิต H2O2 ในตัวอย่างเรืองแสงที่มีและไม่มีNaN3 พบว่าเพิ่มขึ้นแข็งแกร่งในการผลิตไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เมื่อNaN3 ถูกนำเสนอในสื่อปฏิกิริยา ผลของการ uncoupling เป็นเด่นชัดมากขึ้นในthylakoids ที่อายุน้อยกว่า แสดงในตัวเลขการผลิตของ H2O2 เป็น 2.48 เท่าสูงสำหรับวันที่ 18; 2.46 วันที่ 21; 2.14 วันที่ 25; 1.81 วันที่ 29; 1.78 สำหรับวันที่ 32 และ 1.78 สำหรับวันที่ 35 ในแบบคู่ขนานที่ผลิตH2O2 ถูกกำหนดโดยใช้ Amplex แดงซึ่งทำปฏิกิริยากับH2O2 การสร้างผลิตภัณฑ์ที่สามารถตรวจพบได้ด้วยการเป็นfluorimeter การกำหนด H2O2 กับ Amplex แดงแสดงให้เห็นผลที่คล้ายกัน(รูปที่. 7) การเพิ่มขึ้นของ H2O2 ในระหว่างการพัฒนาข้าวบาร์เลย์ถึงค่าสูงสุด29 DAS หลังจากนั้นเป็นต้นมาการผลิตของ H2O2 ลดลงและในที่สุดก็เพิ่มขึ้นในช่วงปลายของการเสื่อมสภาพ นอกจากนี้ยังมีผลการเหล่านี้ต่อไปยืนยันว่าโอ•อนุมูลวัดที่มีสเปคโทร EPR แน่นอนมาจาก H2O2 สร้างขึ้นในระหว่างการส่องสว่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รุ่นของ H2O2 ในไธลาคอยด์ที่แยกได้จากใบ
ข้าวบาร์เลย์รองวัดทางอ้อม โดยการใช้ pobn ปั่น
กับดัก pobn ทำปฏิกิริยากับสารทุติยภูมิซึ่งถูกสร้างขึ้นจากปฏิกิริยาของโอ -
ด้วยเอทานอล และอนุมูลไฮดรอกซิล
จะเกิดขึ้นผ่านปฏิกิริยาเฟนตัน . ระดับอนุมูลอิสระเกิดขึ้น
ค่อนข้างมั่นคง - adducts hydroxyethyl pobn ,ซึ่งสามารถกำหนดโดยอีพีอาร์สเปกโทรสโกปี รูปที่ 43 แสดงสเปกตรัมของ EPR
H2O2 ได้คาร์บอนเป็นศูนย์กลางอนุมูลติดกับ pobn
ได้รับจากแยกไธลาคอยด์ตาก 500 มลควอนตัม− 2
s − 1 ของแสงสีขาว 3 นาทีไม่มีสัญญาณได้ในที่มืด
( มะเดื่อ 5B ) และตัวอย่างในการขาดของแสง feedta
( ฟิค 5 )ซึ่งบ่งชี้ว่า โอ - อนุมูลอิสระมาจาก H2O2
สร้างขึ้นในระหว่างการส่องสว่าง รูปที่ 6 แสดงการผลิต
H2O2 ได้อนุมูลอิสระระหว่างการพัฒนามัธยมศึกษา
ใบข้าวบาร์เลย์ระหว่าง 18 และ 35 วันหลังปลูก ( ) และไม่มี ( − ) nan3 .
มันแจ้งว่า การผลิตของแบตเตอรี่เพิ่มขึ้นในระหว่างการพัฒนาของข้าวบาร์เลย์ถึงสูงสุด 25 DAS หลังจากนั้น
การผลิตแบตเตอรี่ก็ยังคงลดลงและเพิ่มขึ้นอีกในระยะปลายของชราภาพเมื่อ CHL ระดับได้
ลดลงอย่างมาก การเปรียบเทียบการผลิต H2O2 ในตัวอย่าง
สว่างและไม่พบ nan3
เพิ่มแรงในการผลิตไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เมื่อ nan3 เป็นปัจจุบันใน
ปฏิกิริยาปานกลาง ผลของการพบเด่นชัดมากขึ้น
ในน้องไธลาคอยด์ .แสดงให้เห็นตัวเลขการผลิตของ H2O2
คือ 2.48 เท่าวันที่ 18 ; 2.46 วัน 21 ; 2.14 วัน 25 ;
1.81 วันที่ 29 ; 1.78 วันที่ 32 และ 1.78 วันที่ 35 ในแบบคู่ขนาน
การผลิตถูกกำหนดโดยการใช้ H2O2 amplex สีแดงซึ่ง
ปฏิกิริยากับแบตเตอรี่การสร้างผลิตภัณฑ์ที่สามารถตรวจพบได้ด้วย
fluorimeter . การหาปริมาณ H2O2 กับ amplex สีแดงพบ
ผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกัน ( รูปที่ 7 )เพิ่มแบตเตอรี่ในระหว่างการพัฒนา
ข้าวบาร์เลย์ถึงค่าสูงสุด 29 DAS หลังจากนั้น การผลิตของแบตเตอรี่ลดลงและในที่สุดเพิ่ม

ที่ระยะปลายของชราภาพ นอกจากนี้ ผลต่อไป ยืนยันว่า โอ - อนุมูล
วัด EPR สเปกโทรสโกปีแน่นอนมาจาก
H2O2 ที่สร้างขึ้นในช่วงรัศมี