เพื่อระบุลำดับของเอนไซม์ฟักใน. callidryas, เราได้สร้างฐานข้อมูลระเบิดของการชุมนุมของการรวมตัวกันของฟัก-มีอำนาจ, 5 วัน-เก่า. callidryas ตัวอ่อน (ข้อมูลที่มีอยู่เมื่อมีการร้องขอ). เราค้นหาฐานข้อมูลด้วยการใช้งานที่มีการออกแบบของเอนไซม์ (' XHE ' หรือ ' UVS. 2 '; GenBank D 89632.1) และพบความเป็นหนึ่งเดียวกัน contig จากนั้นเราใช้ไพรเมอร์เฉพาะยีน (ไพรเมอร์ไปข้างหน้า, 5 ′-acaacatgggcgagaagattta-3 ′; ย้อนกลับ, 5 TGAAGTTTCCTTGTGGTGTGATA-3 ′) เพื่อขยายการถอดเสียงจากดีเอ็นเอจากการฟักไข่ ผลิตภัณฑ์ถูกโคลนลงใน pGEM T ง่าย (Promega) และเปลี่ยนเป็นรุ่น XL ของ Escherichia สำหรับการขยาย พลาสม่าเป็นความบริสุทธิ์สำหรับการจัดลำดับและการสังเคราะห์โพรบโดยใช้ Qiagen miniprep และชุด maxiprep การจัดลำดับเอนไซม์ (' ปวด ', GenBank การขึ้นทะเบียน KY924327) ลำดับและลำดับของกรดอะมิโนมีรายงานโดยโคโค et al. (2018). หลังจากเชิงเส้นกับ SacII, พลาสม่ากลางเป็น<br>ใช้ในการสังเคราะห์ digoxigenin ที่มีป้ายกำกับโพรบอาร์เอ็นเอการป้องกันการใช้ SP6 RNA อเรส หัววัดของเรา encompassed ๑๑๒๔ bp ของลำดับที่เพิ่มเติมเพื่อ mRNA เป้าหมาย. ลำดับโพรบของเราครอบคลุมทั้งเว็บไซต์ metalloprotease ที่ใช้งานอยู่และหนึ่งในโดเมนลูกที่ทำซ้ำทั่วไปในการเก็บเกี่ยวเอนไซม์ในการฟักไข่ (นางาซาวะ et al, ๒๐๑๖) การวิเคราะห์ระเบิด Nucleotide ในลำดับการสอบสวนส่งกลับเฉพาะเอนไซม์ฟักเท่านั้นและไม่มีโปรตีนหรือเอนไซม์อื่นๆ นอกจากนี้การวิเคราะห์ทางพันธุกรรมแสดงให้เห็นว่า A. callidryas การถอดตัวเอนไซม์ที่มีลักษณะคล้ายกับเอนไซม์ฟักจากกบและปลากว่ามันเป็นโปรตีนอื่นๆจาก<br>-เหมือน metalloprotease ครอบครัว M12A (Cohenet al., ๒๐๑๘) ...
การแปล กรุณารอสักครู่..
