2.3. RNA isolationTotal RNA was iso

2.3. RNA isolation
Total RNA was isolated from boll of uninfected and A. flavus infected
cotton using Spectrum total RNA isolation kit (Sigmae
Aldrich, St. Louis, MO) at different time points after infection. The RNA was independently extracted from cottonseed and pericarp from each infected locules (L1) and three adjacent/distal locules (Adj), respectively. Total RNA was quantified by an ND-1000 spectrophotometer (Nanodrop Technologies, Wilmington, DE). The RNA integritywas also assessed by running 2 ml of total RNA in a 1.2% (w/v) agarose/formaldehyde gel, stained with ethidium bromide, and visualized under UV light. An aliquot of 1 mg RNA extracted from adjacent/distal locules (Adj) of cottonseed or pericarp was pooled for cDNA preparation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 แยก RNA
รวมอาร์เอ็นเอที่แยกได้จาก Boll ของที่ไม่ติดเชื้อและติดเชื้อ A. flavus
ผ้าฝ้ายโดยใช้ชุดแยก RNA รวมสเปกตรัม (Sigmae
ดิช, เซนต์หลุยส์, MO) ที่จุดเวลาที่แตกต่างกันหลังจากการติดเชื้อ อาร์เอ็นเอถูกสกัดเป็นอิสระจากฝ้ายและเปลือกจากแต่ละ locules ติดเชื้อ (L1) และสามที่อยู่ติดกัน / ปลาย locules (Adj) ตามลำดับ รวม RNA ถูกวัดโดย spectrophotometer ND-1000 (Nanodrop Technologies, Wilmington, DE) อาร์เอ็นเอยัง integritywas ประเมินโดยใช้ 2 มิลลิลิตรของอาร์เอ็นเอรวม 1.2% (w / v) agarose / เจลดีไฮด์ย้อมด้วย ethidium bromide และมองเห็นภายใต้แสงยูวี aliquot 1 มิลลิกรัมสกัดจากอาร์เอ็นเอที่อยู่ติดกัน / ปลาย locules (adj) ของฝ้ายหรือเปลือกถูกสำรองสำหรับการเตรียม cDNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 อาร์เอ็นเอแยก
รวม RNA ถูกแยกจาก โบล และ A . flavus ของผู้ที่ไม่ติดเชื้อติดเชื้อ
ฝ้ายใช้คลื่นความถี่รวม RNA แยกชุด ( sigmae
Aldrich St . Louis , MO ) ที่จุดเวลาที่ต่างกันหลังจากการติดเชื้อ ยีนเป็นอิสระแยกจากเปลือกเมล็ดจากแต่ละช่องและติดเชื้อ ( L1 ) และสามช่องปลายติดกัน / ( adj ) ตามลำดับอาร์เอ็นเอทั้งหมดถูก quantified โดย nd-1000 Spectrophotometer ( เทคโนโลยี nanodrop Wilmington , DE ) ยีน integritywas ยังประเมิน โดยวิ่ง 2 ml ของอาร์เอ็นเอทั้งหมดใน 1.2 % ( w / v ) ( / ฟอร์มัลดีไฮด์เจล เปื้อนทิเดียมโบรไมด์ , และการมองเห็นภายใต้แสงยูวี เป็นส่วนลงตัวของ RNA ที่สกัดจาก 1 มิลลิกรัม / โครงสร้าง ( 1 ) ติดกันส่วนปลาย เมล็ดหรือเปลือกคือ pooled ในการเตรียม cDNA .