MethodsOrganisms and chemicalsIn th

Methods
Organisms and chemicals

In this study, the antibacterial activity of TQ was tested on 11 Human pathogenic strains including Gram negative bacilli: Escherichi coli ATCC 35218, Salmonella enterica serovar Typhimurium ATCC 14028, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Vibrio alginolyticus ATCC 33787, Vibrio paraheamolyticus ATCC 17802; Gram positive bacilli: Bacillus cereus ATCC 14579, Listeria monocytogene ATCC 19115 and Gram positive cocci: Enterococcus faecalis ATCC 29212, Micrococcus luteus NCIMB 8166, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis CIP 106510 (Table ​(Table11).

Table 1
Table 1
Antibacterial activity of thymoquinone against Human pathogenics strains
TQ, gentamycin and erythromycin was purchased from Sigma (Sigma-Aldrich, Switzerland).

Minimum inhibitory concentration determination

The broth microdilution method was used to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of TQ (0 to 512 μg/ml), gentamycin (0 to 256 μg/ml) and erythromycin (0 to 256 μg/ml) as recommended by the National Committee for Clinical Laboratory Standards Institute [25].

An overnight culture (37°C) of the tested strains were diluted 10-fold in fresh tryptic soy broth (TSB) and incubated (37°C) until they reached exponential growth phase. Serial two-fold dilutions of TQ in Mueller Hinton (MH) Broth (Biorad, France) were prepared in a 96-wells plate (190 μL per well).

The inocula (10 μL) containing 5. 106 cfu/ml of each reference strain were added to each well and the tested compound. A number of wells were reserved in each plate to test the sterility control of the medium (no inoculum added) and inoculum viability (no compound added).

After incubation for 24 h at 37°C, bacterial growth was evaluated by the presence of turbidity and a pellet on the well bottom. The MIC was defined as the concentration that completely inhibited visible cell growth during a 24-h incubation period at 37°C

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีการสิ่งมีชีวิตและสารเคมีในการศึกษานี้ ทดสอบกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรียของ TQ ใน 11 มนุษย์อุบัติสายพันธุ์รวมถึงกรัมลบ bacilli: Escherichi coli ATCC 35218 ซัล enterica serovar Typhimurium ATCC 14028, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ผล alginolyticus ATCC 33787, paraheamolyticus ต่อ ATCC 17802 กรัมบวก bacilli: คัด cereus ATCC 14579 กรัมบวก cocci และออลิ monocytogene ATCC 19115: Enterococcus faecalis ATCC 29212 รำ luteus NCIMB 8166 หมอเทศข้างลาย Staphylococcus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis CIP 106510 (ตาราง (Table11)ตารางที่ 1ตารางที่ 1กิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรียของ thymoquinone กับสายพันธุ์มนุษย์ pathogenicsTQ, gentamycin และ erythromycin ถูกซื้อจากซิก (Aldrich ซิก สวิตเซอร์แลนด์)ลิปกลอสไขสมาธิขั้นต่ำกำหนดวิธีซุป microdilution ถูกใช้เพื่อกำหนดความเข้มข้นลิปกลอสไขต่ำสุด (MIC) และต่ำสุด bactericidal เข้มข้น (ช่อง MBC) TQ (0 ถึง 512 μg/ml), gentamycin (0-256 μg/ml) และ erythromycin (μg 0-256 มล.) แนะนำ โดยคณะกรรมการแห่งชาติสำหรับ สถาบันมาตรฐานห้องปฏิบัติการทางคลินิก [25]วัฒนธรรมการค้างคืน (37° C) ของสายพันธุ์ทดสอบได้แตกออก 10-fold ในซอย tryptic สดซุป (TSB) และ incubated (37° C) จนกว่าจะถึงระยะเติบโตเนน อนุกรมสองพับ dilutions ของ TQ ในซุป Mueller Hinton (MH) (Biorad ฝรั่งเศส) ได้เตรียมจาน 96 บ่อ (190 μL ต่อดี)การ inocula (10 μL) ประกอบด้วย 5 106 cfu/ml ของแต่ละต้องใช้อ้างอิงได้เพิ่มดีแต่ละและบริเวณทดสอบ จำนวนบ่อถูกสำรองในแต่ละแผ่นเพื่อทดสอบการควบคุม sterility ปานกลาง (inoculum ไม่เพิ่ม) และชีวิต inoculum (สารประกอบไม่เพิ่ม)หลังจากฟักตัวใน 24 ชมที่ 37° C เจริญเติบโตของแบคทีเรียถูกประเมิน โดยสถานะของความขุ่นของน้ำและเม็ดล่างดี MIC ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นที่สมบูรณ์ห้ามเห็นเซลล์เจริญเติบโตช่วง 24 h บ่มที่ 37° C

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการ
มีชีวิตและสารเคมีในการศึกษานี้ฤทธิ์ต้านแบคทีเรียของ TQ ถูกทดสอบเมื่อวันที่ 11 สายพันธุ์ที่ทำให้เกิดโรคของมนุษย์รวมทั้งแกรมแบคทีเรียลบ: Escherichi coli ATCC 35218, Salmonella enterica serovar Typhimurium ATCC 14028, เชื้อ Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Vibrio alginolyticus ATCC 33787, Vibrio paraheamolyticus ATCC 17802; แกรมแบคทีเรียบวกเชื้อ Bacillus cereus ATCC 14579, Listeria monocytogene ATCC 19115 และแกรมบวก Cocci. Enterococcus faecalis ATCC 29212, Micrococcus luteus NCIMB 8166, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis CIP 106510 (ตาราง (Table11) ตารางที่ 1 ตารางที่ 1 ฤทธิ์ต้านแบคทีเรีย ของ thymoquinone กับ pathogenics มนุษย์สายพันธุ์TQ, Gentamycin และ erythromycin ซื้อมาจากซิกม่า (Sigma-Aldrich วิตเซอร์แลนด์). การกำหนดความเข้มข้นขั้นต่ำวิธี microdilution น้ำซุปถูกใช้ในการตรวจสอบความเข้มข้นต่ำสุด (MIC) และต่ำสุดเข้มข้นของเชื้อแบคทีเรีย (MBC) ของ TQ (0-512 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) Gentamycin (0-256 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) และ erythromycin (0-256 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ตามคำแนะนำของคณะกรรมการแห่งชาติเพื่อกำหนดมาตรฐานห้องปฏิบัติการทางคลินิกสถาบัน [25]. วัฒนธรรมในชั่วข้ามคืน (37 องศา C) ของสายพันธุ์ถูกเจือจาง 10 เท่าในน้ำซุปสดถั่วเหลือง tryptic (TSB) และบ่ม (37 ° C) จนกว่าพวกเขาจะมาถึงขั้นตอนการเจริญเติบโต. อนุกรมเจือจางสองเท่าของ TQ ในมูลเลอร์ฮินตัน (MH) น้ำซุป (Biorad, ฝรั่งเศส) ได้จัดทำแผ่น 96 หลุม (190 ไมโครลิตรต่อกัน). inocula (10 ไมโครลิตร) ที่มี 5. 106 cfu / ml ความเครียดอ้างอิงแต่ละถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีและสารประกอบที่ผ่านการทดสอบ จำนวนของหลุมถูกสงวนไว้ในแต่ละจานที่จะทดสอบการควบคุมความแห้งแล้งของกลาง (ไม่มีเชื้อที่เพิ่มขึ้น) และมีศักยภาพในการเพาะเลี้ยงเชื้อ (สารประกอบไม่เพิ่ม). หลังจากการบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเจริญเติบโตของแบคทีเรียได้รับการประเมินโดยการปรากฏตัวของความขุ่น และเม็ดที่ด้านล่างได้ดี MIC ได้รับการกำหนดให้เป็นความเข้มข้นที่สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์อย่างสมบูรณ์มองเห็นได้ในช่วงระยะเวลาการบ่ม 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธี


สิ่งมีชีวิตและสารเคมี ในการศึกษานี้ได้ทำการทดสอบฤทธิ์ต้านแบคทีเรียของ TQ 11 มนุษย์เชื้อโรคสายพันธุ์รวมทั้งเชื้อกรัมลบ : escherichi coli ATCC 35218 Salmonella Typhimurium ATCC enterica ไน 14028 , Pseudomonas aeruginosa ATCC นำน้ำมันระเหย , Vibrio alginolyticus ~ i ATCC 17802 paraheamolyticus 33787 เชื้อแบคทีเรียกรัมบวก ; เชื้อ Bacillus cereus ATCC 14579 : ,monocytogene เชื้อ Listeria 19115 . ที่ไม่สามารถบวก เอ็นเทโรค็อกคัส faecalis และ 29212 , Micrococcus luteus ncimb 8166 Staphylococcus aureus ATCC 25923 , Staphylococcus อาหาร 106510 CIP ( ตาราง​ ( table11 ) . ตารางที่ 1 ตารางที่ 1



ต้านกิจกรรมของ thymoquinone กับมนุษย์ pathogenics สายพันธุ์
TQ , เจนตาไมซินและ erythromycin คือซื้อจาก ซิกม่า ( Sigma ดิชสวิตเซอร์แลนด์ ) .

การแสดงนิทรรศการมุ่งมั่น

ซุป microdilution เป็นวิธีตรวจสอบความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้ง ( MIC ) และความเข้มข้นต่ำสุดที่สามารถฆ่าเชื้อ ( MBC ) พิมพ์ดีด ( 0 512 μ g / ml ) เจนตาไมซิน ( 0 ถึง 256 μกรัม / มิลลิลิตร ) และอีริโทรมัยซิน ( 0 ถึง 256 μ g / ml ) แนะนำโดย แห่งชาติคณะกรรมการมาตรฐานห้องปฏิบัติการคลินิกสถาบัน [ 25 ] .

วัฒนธรรมในชั่วข้ามคืน ( 37 ° C ) ของการทดสอบสายพันธุ์เจือจาง 10 เท่าในซุปถั่วเหลืองอาหารสด ( TSB ) และอุณหภูมิ ( 37 ° C ) จนกว่าจะถึงระยะการเจริญเติบโตที่ชี้แจง อนุกรมทวิวิธีการพิมพ์ดีดในมูลเลอร์ ฮินตัน ( MH ) ซุป ( biorad , ฝรั่งเศส ) เตรียมใน 96 หลุมจาน ( 190 μผมต่อด้วย )

inocula ( 10 μ L ) ประกอบด้วย 5106 cfu / ml ของแต่ละสายพันธุ์อ้างอิงเพิ่มกันและทดสอบสาร หมายเลขของเวลส์จะถูกสงวนไว้ในแต่ละแผ่น เพื่อทดสอบการเป็นหมัน คุมกลาง ( ไม่มีเชื้อเพิ่ม ) และเชื้อความมีชีวิต ( ไม่ผสมเพิ่ม ) .

หลังจากบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศา C , การเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ประเมินโดยการแสดงตนของความขุ่นและเม็ดบนก็ล่างไมค์ก็หมายถึงความเข้มข้นที่ยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ที่มองเห็นได้ในระหว่าง 24-h ระยะเวลาการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาซี