2.3. Enzyme hydrolysis.Cellic CTec

2.3. Enzyme hydrolysis.
Cellic CTec 2 cellulase blend was used for all enzymatic hydrolysis studies and loads are quoted as FPU (Filter Paper Units)/g dry material (DM). Generally, enzymatic hydrolysis of solid substrates was performed in 50 mM citrate buffer pH 5.0 containing 0.02% sodium azide with a substrate loading of 10% (w/v) and incubated for up to 96 h at 50 ํC. To identity significant pretreatment variables and interactive effects, enzymatic hydrolysis of pretreated fibres were conducted under controlled isodosing conditions using a fixed Cellic CTec 2 cellulase loading of 20 FPU/g DM. This cellulase loading was selected based on results from preliminary experiments in which CGT fibres pretreated under midpoint conditions for temperature, time and acid concentration were subjected to an enzyme dose response using cellulase loadings of 5.0, 12.5, 20 and 30 FPU/g DM. To evaluate maximum glucose release, pretreated materials were subject to higher enzyme dose response condition using Cellic CTec 2 cellulase loading of 30, 40, 60 and 80 FPU/g DM. For enzymatic hydrolysis of whole pretreated slurries (including both insoluble fibre and soluble
fractions), the entire slurry was adjusted to pH 5.0 with NaOH prior to addition of 0.02% sodium azide and appropriately diluted enzyme. No buffering agents were used in enzymatic hydrolysis of whole pretreated slurries. Hydrolysates were sampled at time points specified in the text, boiled for 10 min and centrifuged at 8000g for 5 min, syringe filtered with a 0.45 lm Minisart (Sartorius, Germany) and stored at -20 ํC for further HPLC analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. เอนไซม์ไฮโตรไลซ์ใช้ผสม cellulase CTec 2 cellic ศึกษาไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบทั้งหมด และปริมาณที่แสดงมีหน่วยเป็น FPU (กระดาษกรองหน่วย) /g แห้งวัสดุ (DM) ทั่วไป ไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของพื้นผิวของแข็งถูกดำเนินการใน 50 มม.ซิเตรตบัฟเฟอร์ pH 5.0 มี 0.02% โซเดียม azide กับการโหลดพื้นผิว 10% (w/v) และ incubated สำหรับถึง 96 h ที่ 50 ํC รหัสประจำตัวตัวแปร pretreatment อย่างมีนัยสำคัญและผลแบบโต้ตอบ ไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของเส้นใย pretreated ได้ดำเนินภายใต้เงื่อนไขการควบคุม isodosing ที่ใช้โหลด cellulase Cellic CTec 2 ที่ถาวรของ FPU 20 g DM โหลด cellulase นี้ถูกเลือกตามผลลัพธ์จากการทดลองเบื้องต้นใน CGT ที่ใย pretreated ภายใต้เงื่อนไขที่จุดกึ่งกลางสำหรับอุณหภูมิ เวลา และความเข้มข้นกรดถูกต้องการการตอบสนองยาเอนไซม์ cellulase loadings ของ 5.0, 12.5, 20 และ 30 FPU/g DM โดยใช้ เพื่อประเมินการปล่อยกลูโคสสูงสุด pretreated วัสดุถูกต้องสูงเอนไซม์ยาตอบสนองเงื่อนไขใช้การโหลด cellulase Cellic CTec 2 ของ 30, 40, 60 และ 80 FPU/g DM สำหรับไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของ slurries pretreated ทั้งหมด (รวมทั้งเส้นใยที่ไม่ละลายน้ำ และละลายน้ำได้เศษส่วน), สารละลายทั้งหมดถูกปรับ pH 5.0 มี NaOH ก่อนเพิ่ม 0.02% โซเดียม azide และเอนไซม์แตกออกอย่างเหมาะสม ตัวแทนไม่มีบัฟเฟอร์ที่ใช้ในไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของ slurries pretreated ทั้งหมด Hydrolysates มีตัวอย่างที่เวลาจุดระบุไว้ในข้อความ ต้มสำหรับ 10 นาที และ centrifuged ที่ 8000g สำหรับ 5 นาที เข็มกรอง ด้วย 0.45 เป็น lm Minisart (บริษัทซาร์โทเรียส เยอรมนี) และจัดเก็บที่-20 ํC สำหรับวิเคราะห์ HPLC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การย่อยสลายด้วยเอนไซม์เซลลูเลส ctec 2
cellic ผสมใช้สำหรับเอนไซม์ การศึกษาและโหลดจะยกมาเป็น FPU ( หน่วยกรองกระดาษ ) / กรัมวัสดุแห้ง ( DM ) โดยทั่วไปการย่อยเอนไซม์ของพื้นผิวของแข็งในการปฏิบัติ 50 มิลลิซิเตรทบัฟเฟอร์ pH 5.0 ประกอบด้วย 0.02% โซเดียมไซด์กับพื้นผิวโหลด 10% ( w / v ) และบ่มนานถึง 96 ชั่วโมง 50 ํ Cระบุตัวแปรที่สำคัญและผลการปฏิสัมพันธ์ผ่านการย่อยเอนไซม์ของเส้นใยได้ดำเนินการควบคุม isodosing สภาพใช้แบบถาวร cellic ctec 2 เซลลูเลส โหลด 20 FPU / g DM . นี้เลือกเซลโหลดขึ้นอยู่กับผลลัพธ์จากการทดลองเบื้องต้นที่ CGT เส้นใยที่ได้รับภายใต้เงื่อนไขที่จุดกึ่งกลางสำหรับอุณหภูมิเวลาและความเข้มข้นของกรดจะถูกเอนไซม์เซลลูเลส ขนาดการใช้ครอบคลุมของ 5.0 , 15 , 20 และ 30 FPU / g DM . เพื่อประเมินการปล่อยกลูโคสสูงสุดที่ได้รับวัสดุที่ต้องสูงกว่าปริมาณการใช้เอนไซม์เซลลูเลส ctec 2 เงื่อนไข cellic โหลด 30 , 40 , 60 และ 80 FPU / g DM .สำหรับเอนไซม์ทั้งผ่าน slurries ( รวมทั้งเส้นใยไม่ละลายและละลาย (
) , เสียทั้งค่า pH 5.0 กับ NaOH ก่อนเพิ่ม 0.02% โซเดียม ไซด์ และเหมาะสม ซึ่งเอนไซม์ ไม่มีบัฟเฟอร์ถูกใช้ในการย่อยด้วยเอนไซม์ของตัวแทนทั้งหมดที่ได้รับ slurries . จำนวนของเวลาที่จุดที่ระบุไว้ในข้อความต้มประมาณ 10 นาที และระดับที่ 8000g เป็นเวลา 5 นาที เข็มกรองด้วย 0.45 minisart LM ( sartorius , เยอรมนี ) และเก็บไว้ที่ - 20 องศาเซลเซียส สำหรับการวิเคราะห์ HPLC ต่อไป