Analysis of real samples was performed on the LC-ESI-MS/MS system consisting of an AB 3200 QTRAP LC-MS/MS (Applied Biosystems, Foster City, CA) with an electrospray ionization source (Turbo Ionspray) and a Shimadzu LC-20AD HPLC (Tokyo, Japan) with two LC-20AD pumps, a SIL-20A autosampler, a CTO-20AC thermostatted column compartment, and a DGU-20A3 degasser.
Data acquisition and processing were performed using AB SCIEX Analyst 1.5 Software (Applied Biosystems, Foster City, CA).
The HPLC separation was performed on a Hisep C18-T column (150 mm × 2.1 mm i.d., 5 μm, Weltech Co., Ltd., Wuhan, China) with a flow rate of 0.2 mL/min at 35 °C. Five mM ammonium formate (solvent A)
and methanol (solvent B) were employed as mobile phase.
A gradient of 5 min 5% B, 20 min 5−50% B, 5 min 50% B, and 10 min 5% B was used for detection of 2′-deoxynucleosides. A gradient of 15 min 5% B, 5 min 5−15% B, and 10 min 5% B was used for detection of 2′-O-methylated ribonucleosides.
The injection volume was 10 μL.
การวิเคราะห์ตัวอย่างจริงได้รับการดำเนินการในระบบ LC-ESI-MS / MS ประกอบด้วย AB 3200 QTRAP LC-MS / MS (Applied Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี้, CA) มีแหล่งที่มา Electrospray ไอออนไนซ์ (เทอร์โบ Ionspray) และ Shimadzu สินค้า LC- 20AD HPLC (โตเกียวประเทศญี่ปุ่น) โดยมีสองปั๊ม LC-20AD, autosampler SIL-20A, ช่องคอลัมน์ CTO-20AC thermostatted และ DGU-20A3 degasser
เก็บข้อมูลและการประมวลผลได้รับการดำเนินการโดยใช้ AB SCIEX นักวิเคราะห์ 1.5 ซอฟแวร์ (แอพพลายด์ , ฟอสเตอร์ซิตี้, แคลิฟอร์เนีย)
แยก HPLC ได้รับการดำเนินการใน Hisep C18-T คอลัมน์ (150 มิลลิเมตร× 2.1 มม id, 5 ไมโครเมตร Weltech จำกัด หวู่ฮั่น, จีน) ที่มีอัตราการไหล 0.2 มิลลิลิตร / นาที ที่ 35 ° C ห้ามิลลิแอมโมเนียมรูปแบบ (ตัวทำละลาย)
และเมทานอล (B ตัวทำละลาย) ได้รับการว่าจ้างให้เป็นเฟสเคลื่อนที่
ลาด 5 นาที 5% B, 20 นาที 5-50% B, 5 นาที 50% B, และ 10 นาที 5% B เป็น ที่ใช้สำหรับการตรวจสอบของ 2'-deoxynucleosides การไล่ระดับสีของ 15 นาที 5% B, 5 นาที 5-15% B, และ 10 นาที 5% B ถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจหา ribonucleosides 2'-O-methylated
ปริมาณการฉีด 10 ไมโครลิตร
การแปล กรุณารอสักครู่..
การวิเคราะห์ตัวอย่างจริงได้ใน lc-esi-ms / MS ระบบประกอบด้วย AB 3200 qtrap อินซูลิน / MS ( Applied Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย ) ด้วยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ( Turbo อิออนแหล่ง ionspray ) และ Shimadzu lc-20ad HPLC ( โตเกียว , ญี่ปุ่น ) กับสอง lc-20ad ปั๊ม , sil-20a autosampler , cto-20ac thermostatted ช่องคอลัมน์ และ dgu-20a3 degasser .
การเก็บข้อมูลและการประมวลผลการใช้ซอฟต์แวร์ 1.5 AB นักวิเคราะห์ sciex ( Applied Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย )
4 แยกแสดงบน hisep c18-t คอลัมน์ ( 150 มิลลิเมตร× 2.1 มม. บัตร 5 μ M , weltech Co . , Ltd . , หวู่ฮั่น , จีน ) ด้วยอัตราการไหล 2 มล. / นาทีที่ 35 ° C 5 มม. แอมโมเนียมฟอร์เมต ( ตัวทำละลาย )
และเมทานอล ( ตัวทำละลาย B ) ถูกใช้เป็นมือถือ เฟส
ไล่โทนสี 5 นาที 5 % B , 20 นาที 5 − 50 % B , 5 นาที 50 % B , และ 10 นาที 5 % B ใช้สำหรับการตรวจจับ 2 นั้น - deoxynucleosides . การไล่ระดับสี 15 นาที 5 % B , 5 นาที 5 − 15 % B , และ 10 นาที 5 % B ใช้สำหรับการตรวจจับ 2 นั้น - o-methylated ribonucleosides .
ปริมาณฉีด 10 μ L
การแปล กรุณารอสักครู่..