DNA cloning and sequencingThe PCR p

DNA cloning and sequencing
The PCR products were purified from agarose gels and sent for
commercial sequencing (Invitrogen, China). Some PCR products
were also cloned into the Pmd18-T vector for sequencing
according to the manufacture’s protocol (Takara). Briefly, ligation
products were used to transform TOP 10 high efficiency
competent cells and were plated onto LB/ampicillin/IPTG/XGal
plates. Multiple positive (white) colonies were picked randomly
from each cloned sample. DNAs from the colonies were sequenced
after restriction digestion verifying the presence of inserts. The
DNA sequences were initially aligned and edited using BioEd

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การโคลนดีเอ็นเอและการจัดลำดับบริสุทธิ์จากเจ agarose และส่งสำหรับผลิตภัณฑ์ PCRพาณิชย์จัดลำดับ (Invitrogen จีน) บางผลิตภัณฑ์ PCRยังโคลนเป็นเวกเตอร์ Pmd18 T สำหรับลำดับตามการผลิตโพรโทคอ (Takara) สั้น ๆ ไข่ผลิตภัณฑ์ที่ใช้ในการแปลงประสิทธิภาพสูง 10 อันดับแรกเซลล์มีอำนาจ และได้ชุบไปปอนด์/แอมพิซิลลิ น/IPTG/XGalแผ่น หลายบวก (สีขาว) อาณานิคมได้รับเลือกโดยการสุ่มจากตัวอย่างแต่ละโคลน DNAs จากอาณานิคมถูกเรียงลำดับหลังจากการย่อยอาหารจำกัดตรวจสอบสถานะของการแทรก ที่ลำดับดีเอ็นเอได้เริ่มมีจัด และแก้ไขโดยใช้ BioEd

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โคลนดีเอ็นเอและลำดับผลิตภัณฑ์ PCR ถูกบริสุทธิ์จากเจล agarose และส่งสำหรับการจัดลำดับในเชิงพาณิชย์(Invitrogen, จีน) บางผลิตภัณฑ์ PCR ถูกโคลนออกเป็นเวกเตอร์ Pmd18-T สำหรับลำดับตามโปรโตคอลการผลิตของ(Takara) สั้น ๆ , ligation ผลิตภัณฑ์ถูกนำมาใช้ในการแปลง 10 อันดับแรกที่มีประสิทธิภาพสูงเซลล์ที่มีความสามารถและได้รับการชุบบนLB / ampicillin / IPTG / XGal แผ่น หลายบวก (สีขาว) อาณานิคมถูกหยิบสุ่มจากแต่ละตัวอย่างโคลน DNAs จากอาณานิคมมีลำดับขั้นตอนหลังจากการย่อยอาหารข้อจำกัด การตรวจสอบสถานะของการแทรก ลำดับดีเอ็นเอถูกจัดชิดครั้งแรกและแก้ไขการใช้ BioEd

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดีเอ็นเอการโคลนและผลิตภัณฑ์ PCR ลำดับ
มีความบริสุทธิ์จากโรสเจลและส่ง
ลำดับเชิงพาณิชย์ ( Invitrogen , จีน ) บางผลิตภัณฑ์ PCR
ยังโคลนในเวกเตอร์สำหรับการ pmd18-t
ตามขั้นตอนของการผลิต ( ทาการะ ) สั้น ๆ , ผลิตภัณฑ์ Ligation
ถูกใช้เพื่อแปลงด้านบน 10 เซลล์ และมีความสามารถ ประสิทธิภาพสูง
ชุบลงบนปอนด์ / แอมพิซิลลิน / โปรตีน / xgal
แผ่นหลายบวก ( สีขาว ) อาณานิคมถูกเลือกแบบสุ่มจากแต่ละโคลน
ตัวอย่าง แถบจากอาณานิคมเป็นลำดับ
หลังจากการย่อยการจำกัดการแสดงตนของแทรก
ลำดับดีเอ็นเอในขั้นแรกชิดและแก้ไขโดยใช้ bioed