Mosquito immunity studies have focu

Mosquito immunity studies have focused mainly on characterizing immune effector mechanisms elicited against parasites, bacteria and more recently, viruses. However, those elicited against entomopathogenic fungi remain poorly understood, despite the ubiquitous nature of these microorganisms and their unique invasion route that bypasses the midgut epithelium, an important immune tissue and physical barrier. Here, we used the malaria vector Anopheles gambiae as a model to investigate the role of melanization, a potent immune effector mechanism of arthropods, in mosquito defense against the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana, using in vivo functional genetic analysis and confocal microscopy. The temporal monitoring of fungal growth in mosquitoes injected with B. bassiana conidia showed that melanin eventually formed on all stages, including conidia, germ tubes and hyphae, except the single cell hyphal bodies. Nevertheless, melanin rarely aborted the growth of any of these stages and the mycelium continued growing despite being melanized. Silencing TEP1 and CLIPA8, key positive regulators of Plasmodium and bacterial melanization in A. gambiae, abolished completely melanin formation on hyphae but not on germinating conidia or germ tubes. The detection of a layer of hemocytes surrounding germinating conidia but not hyphae suggested that melanization of early fungal stages is cell-mediated while that of late stages is a humoral response dependent on TEP1 and CLIPA8. Microscopic analysis revealed specific association of TEP1 with surfaces of hyphae and the requirement of both, TEP1 and CLIPA8, for recruiting phenoloxidase to these surfaces. Finally, fungal proliferation was more rapid in TEP1 and CLIPA8 knockdown mosquitoes which exhibited increased sensitivity to natural B. bassiana infections than controls. In sum, the mosquito melanization response retards significantly B. bassiana growth and dissemination, a finding that may be exploited to design transgenic fungi with more potent bio-control activities against mosquitoes.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การศึกษาภูมิคุ้มกันยุงได้เน้นหลักในการกำหนดลักษณะของกลไกภูมิคุ้มกัน effector elicited กับปรสิต แบคทีเรีย และอื่น ๆ เมื่อเร็ว ๆ นี้ ไวรัส อย่างไรก็ตาม ผู้ที่ต่อต้านเชื้อรา entomopathogenic elicited ยังคงเข้าใจไม่ดี แม้ มีธรรมชาติสมบูรณ์ของจุลินทรีย์เหล่านี้และเส้นทางของพวกเขาบุกรุกเฉพาะที่แรม midgut epithelium เนื้อเยื่อสำคัญที่ภูมิคุ้มกันและอุปสรรคทางกายภาพ ที่นี่ เราใช้เวกเตอร์มาลาเรีย Anopheles gambiae เป็นการตรวจสอบบทบาทของ melanization กลไก effector ภูมิคุ้มกันที่มีศักยภาพของ arthropods ในยุงป้องกัน entomopathogenic เชื้อรา Beauveria bassiana ใช้วิเคราะห์ทางพันธุกรรมที่ทำในสัตว์ทดลองและ confocal microscopy การตรวจสอบชั่วคราวของเชื้อราเจริญเติบโตในยุงฉีดกับ conidia bassiana เกิดพบเมลานินที่ในที่สุดเกิดขึ้นในขั้นตอนทั้งหมด conidia จมูกหลอด และ hyphae ยกเว้นร่าง hyphal เซลล์เดียว อย่างไรก็ตาม เมลานินไม่ค่อยหยุดการเจริญเติบโตของขั้นตอนเหล่านี้ และ mycelium ที่ยังคงเติบโตแม้จะเป็น melanized Silencing TEP1 และ CLIPA8 เร็คกูเลเตอร์บวกคีย์เดียมและ melanization แบคทีเรียใน A. gambiae ยุติทั้งหมดก่อตัวของเมลานิน hyphae แต่ บน germinating conidia หรือจมูกหลอดไม่ การตรวจพบชั้นของ hemocytes รอบ germinating conidia แต่ hyphae ไม่แนะนำที่ melanization ตั้งแต่ระยะเชื้อราคือเซลล์ mediated ในขณะที่ของสายระยะ ตอบสนอง humoral ขึ้นอยู่กับ TEP1 และ CLIPA8 วิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์เปิดเผยเฉพาะสมาคม TEP1 ของ hyphae ที่พื้นผิวและความต้องการของทั้ง TEP1 และ CLIPA8 การสรรหาบุคลากร phenoloxidase กับพื้นผิวเหล่านี้ ในที่สุด ขยายเชื้อราได้อย่างรวดเร็วมากขึ้นใน TEP1 และ CLIPA8 knockdown ยุงซึ่งจัดแสดงความไวเพิ่มขึ้น bassiana ธรรมชาติเกิดการติดเชื้อมากกว่าการควบคุม ในผลรวม การตอบสนอง melanization ยุง retards เจริญเติบโตอย่างมีนัยสำคัญเกิด bassiana และเผยแพร่ พบว่าอาจสามารถออกแบบถั่วเหลืองเชื้อรากับกิจกรรมที่มีศักยภาพมากขึ้นการควบคุมทางชีวภาพกับยุง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การศึกษาภูมิคุ้มกันยุงได้มุ่งเน้นในการพัฒนาการกลไก effector ภูมิคุ้มกันออกมากับปรสิตแบคทีเรียและเมื่อเร็ว ๆ นี้ไวรัส อย่างไรก็ตามผู้ที่ออกมาต่อต้านเชื้อราแมลงยังคงเข้าใจแม้จะมีธรรมชาติที่แพร่หลายของจุลินทรีย์เหล่านี้และเส้นทางบุกของพวกเขาที่ไม่ซ้ำกันที่ทะลุเยื่อบุผิวกระเพาะ, เนื้อเยื่อของระบบภูมิคุ้มกันที่สำคัญและสิ่งกีดขวางทางกายภาพ ที่นี่เราใช้มาลาเรียเวกเตอร์ยุงก้นปล่อง gambiae เป็นแบบอย่างในการตรวจสอบบทบาทของ melanization กลไก effector ที่มีศักยภาพของระบบภูมิคุ้มกันของรพในการป้องกันยุงกับเชื้อรา Beauveria bassiana แมลงโดยใช้ร่างกายในการวิเคราะห์ทางพันธุกรรมการทำงานและการใช้กล้องจุลทรรศน์ confocal ตรวจสอบเวลาของการเจริญเติบโตของเชื้อราในยุงฉีดด้วยสปอร์ B. bassiana แสดงให้เห็นว่าเมลานินที่เกิดขึ้นในที่สุดในทุกขั้นตอนรวมทั้งสปอร์หลอดเชื้อโรคและ hyphae ยกเว้นเดียวร่างกาย hyphal มือถือ แต่เมลานินไม่ค่อยยกเลิกการเจริญเติบโตใด ๆ ของขั้นตอนเหล่านี้และไมซีเลียมยังคงเติบโตแม้จะมีการ melanized เงียบ TEP1 CLIPA8 และหน่วยงานกำกับดูแลในเชิงบวกที่สำคัญของ Plasmodium และ melanization แบคทีเรียใน A. gambiae ยกเลิกการสร้างเมลานินอย่างสมบูรณ์ใน hyphae แต่ไม่ได้อยู่ในสปอร์งอกหรือท่อเชื้อโรค การตรวจสอบของชั้นของเม็ดเลือดรอบสปอร์งอก แต่ไม่ hyphae แนะนำว่า melanization ของขั้นตอนแรกคือเชื้อรา cell-mediated ในขณะที่ขั้นตอนปลายคือการตอบสนองของร่างกายขึ้นอยู่กับ TEP1 และ CLIPA8 การวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์เผยให้เห็นความสัมพันธ์ที่เฉพาะเจาะจงของ TEP1 ผิวของ hyphae และความต้องการของทั้งสอง TEP1 และ CLIPA8 สำหรับการสรรหา phenoloxidase กับพื้นผิวเหล่านี้ ในที่สุดการแพร่กระจายของเชื้อราเป็นอย่างรวดเร็วมากขึ้นใน TEP1 และ CLIPA8 น๊อยุงซึ่งแสดงความไวต่อการติดเชื้อที่เพิ่มขึ้น bassiana บีธรรมชาติกว่าการควบคุม ในผลรวมการตอบสนองยุง melanization retards การเจริญเติบโตอย่างมีนัยสำคัญ bassiana บีและเผยแพร่ผลการวิจัยที่อาจจะใช้ประโยชน์ในการออกแบบจำลองพันธุ์เชื้อรากับกิจกรรมทางชีวภาพการควบคุมที่มีศักยภาพมากขึ้นกับยุง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ยุงภูมิคุ้มกัน การศึกษามุ่งเน้นเรื่องการพัฒนากลไกภูมิคุ้มกัน ( ได้มาจากปรสิต แบคทีเรีย และเมื่อเร็วๆ นี้ ไวรัส อย่างไรก็ตาม ผู้ที่ได้มากับแมลงที่ตายเชื้อรายังคงไม่ค่อยเข้าใจ แม้ธรรมชาติที่แพร่หลายของจุลินทรีย์เหล่านี้ และเอกลักษณ์การบุกรุกเส้นทางที่ข้ามประสิทธิภาพและเหมาะสมบุผิวเนื้อเยื่อของระบบภูมิคุ้มกันที่สำคัญและอุปสรรคทางกายภาพ ที่นี่เราใช้มาลาเรียเวกเตอร์นอฟีเล็ส แกมบิเเป็นแบบจำลองเพื่อศึกษาบทบาทของ melanization , ระบบภูมิคุ้มกัน ( ที่มีศักยภาพของแมลง ในการป้องกันยุงกับแมลงที่ตายเชื้อราบิวเวอเรียบาเซียน่า การใช้ฤทธิ์ในการทำงานทางพันธุกรรมและการวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ .การติดตามเวลาของการเจริญเติบโตในยุงฉีด บี bassiana สร้างเมลานินในที่สุดพบว่าเกิดขึ้นในขั้นตอนทั้งหมด รวมทั้งสร้างท่อเชื้อโรค ) ยกเว้นเซลล์เดียวลดลงอีกด้วย อย่างไรก็ตาม การเติบโตของเมลานินไม่ค่อยใด ๆของขั้นตอนเหล่านี้และเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่อง แม้จะถูก melanized . และสามารถ clipa8 tep1 ,คีย์บวกควบคุมการ melanization . gambiae แบคทีเรีย , การยกเลิกอย่างสมบูรณ์เมลานินบนเส้นใยแต่ไม่งอก conidia หรือชนิดหลอดการตรวจหาชั้นของเม็ดเลือดโดยรอบแต่ไม่งอก conidia ) พบว่าเชื้อรา melanization ก่อนขั้นตอนคือการตรึงเซลล์ในขณะที่ขั้นตอนช้าเป็น humoral ตอบสนองขึ้นอยู่กับ tep1 และ clipa8 . การวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์พบสมาคม tep1 กับพื้นผิวของเส้นใยและความต้องการของทั้งสองโดยเฉพาะ tep1 clipa8 , และ ,สำหรับการสรรหาของฟีนอลออกซิเดสพื้นผิวเหล่านี้ ในที่สุด การเป็นเชื้อรามากขึ้นอย่างรวดเร็วและใน tep1 clipa8 น็อคยุงซึ่งมีความไวเพิ่มขึ้น B ธรรมชาติ bassiana เชื้อมากกว่าการควบคุม ในผลรวมยุง melanization ตอบสนองทาง พ. bassiana retards การเจริญเติบโตและเผยแพร่การค้นหาที่อาจใช้ประโยชน์ในการออกแบบอุตสาหกรรมที่มีศักยภาพมากขึ้นในการควบคุมเชื้อราชีวภาพ กิจกรรมกับยุง