Thanatin(S) is an analog of thanati

Thanatin(S) is an analog of thanatin, an insect antimicrobial peptide possessing strong and broad spectrum of antimicrobial
activity. In order to investigate if the thanatin could be used in engineering transgenic plants for increased
resistance against phytopathogens, the synthetic thanatin(S) was introduced into Arabidopsis thaliana
plants. To increase the expression level of thanatin(S) in plants, the coding sequence was optimized by
plant-preference codon. To avoid cellular protease degradation, signal peptide of rice Cht1 was fused to N terminal
of thanatin(S) for secreting the expressed thanatin(S) into intercellular spaces. To evaluate the application value of
thanatin(S) in plant disease control, the synthesized coding sequence of Cht1 signal peptide (Cht1SP)-thanatin(S)
was ligated to plant gateway destination binary vectors pGWB11 (with FLAG tag). Meanwhile, in order to observe
the subcellular localization of Cht1SP-thanatin(S)-GFP and thanatin(S)-GFP, the sequences of Cht1SP-thanatin(S)
and thanatin(S) were respectively linked to pGWB5 (with GFP tag). The constructs were transformed into
Arabidopsis ecotype Col-0 and mutant pad4-1 via Agrobacterium-mediated transformation. The transformants
with Cht1SP-thanatin(S)-FLAG fusion gene were analyzed by genomic PCR, real-time PCR, and western blots and
the transgenic Arabidopsis plants introduced respectively Cht1SP-thanatin(S)-GFP and thanatin(S)-GFP were observed
by confocal microscopy. Transgenic plants expressing Cht1SP-thanatin(S)-FLAG fusion protein showed antifungal
activity against Botrytis cinerea and powdery mildew, as well as antibacterial activity against Pseudomonas
syringae pv. tomato. And the results from confocal observation showed that the GFP signal from Cht1SPthanatin(
S)-GFP transgenic Arabidopsis plants occurred mainly in intercellular space, while that from
thanatin(S)-GFP transgenic plants was mainly detected in the cytoplasm and that from empty vector transgenic
plants was distributed uniformly throughout the cell, demonstrating that Cht1 signal peptide functioned. In addition,
thanatin(S) and thanatin(S)-FLAG chemically synthesized have both in vitro antimicrobial activities against
P. syringae pv. tomato and B. cinerea. So, thanatin(S) is an ideal candidate AMPs for the construction of transgenic
crops endowed with a broad-spectrum resistance to phytopathogens and the strategy is feasible to link a signal peptide
to the target gene.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Thanatin (S) คือ เป็นอะนาล็อกของ thanatin เปปจุลินทรีย์แมลงมีสเปกตรัมกว้าง และแข็งแรงของจุลินทรีย์กิจกรรมการ เพื่อตรวจสอบถ้าสามารถใช้การ thanatin ในพืชถั่วเหลืองวิศวกรรมเพิ่มขึ้นต้านทานต่อ phytopathogens, thanatin สังเคราะห์ (S) ถูกนำเข้าสู่ Arabidopsis thalianaรดน้ำต้นไม้ เมื่อต้องการเพิ่มนิพจน์ระดับ thanatin (S) ในพืช ลำดับรหัสถูกปรับโดยรหัสพันธุกรรมของพืชชอบ เพื่อหลีกเลี่ยงการสลายตัวรติเอสโทรศัพท์มือถือ สัญญาณเพปไทด์ข้าว Cht1 ถูก fused ให้เทอร์มินัล Nของ thanatin (S) สำหรับ secreting thanatin แสดง (S) ลงในช่องว่างที่ intercellular การประเมินค่าของแอพลิเคชันthanatin (S) ในโรคพืชควบคุม ลำดับรหัสสังเคราะห์ของเพปไทด์สัญญาณ Cht1 (Cht1SP) -thanatin (S)ถูกควบปลูกเกตเวย์ปลายทางเวกเตอร์ฐาน pGWB11 (มีป้ายธง) ในขณะเดียวกัน การสังเกตแปล subcellular ของ Cht1SP-thanatin (S) - GFP และ thanatin (S) - GFP ลำดับของ Cht1SP-thanatin (S)และการเชื่อมโยง thanatin (S) กับ pGWB5 (ด้วยแท็ก GFP) ตามลำดับ โครงสร้างถูกเปลี่ยนเป็นArabidopsis คอลัมน์-0 และกลายพันธุ์ pad4-1 ecotype ผ่านแปลง mediated อโกรแบคทีเรียม Transformantsกับ Cht1SP-thanatin (S) -ธงฟิวชั่นยีนถูกวิเคราะห์ โดย genomic PCR, PCR แบบเรียลไทม์ และกันบล็อทตะวันตก และนำพืช Arabidopsis ถั่วเหลืองตามลำดับ (S) - GFP และ thanatin (S) - Cht1SP-thanatin สุภัค GFPโดย confocal microscopy การ ถั่วเหลืองพืชแสดง Cht1SP-thanatin (S) -ธงฟิวชั่นโปรตีนพบว่าต้านเชื้อรากิจกรรมจาก Botrytis cinerea และลักษณะ ตลอดจนกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรียจาก Pseudomonassyringae pv มะเขือเทศ และผลจากการสังเกต confocal พบว่าสัญญาณจาก Cht1SPthanatin (GFPS) -Arabidopsis GFP ถั่วเหลืองพืชเกิดขึ้นส่วนใหญ่ในพื้นที่ intercellular ในขณะที่จากthanatin (S) -GFP พืชถั่วเหลืองส่วนใหญ่พบในไซโทพลาซึมและจากเวกเตอร์ว่างถั่วเหลืองพืชมีการกระจายสม่ำเสมอเมื่อเทียบเคียงทั่วเซลล์ เห็นเพปไทด์สัญญาณ Cht1 แยก นอกจากนี้thanatin (S) และ thanatin (S) -สถานะสารเคมีสังเคราะห์มีทั้งกิจกรรมจุลินทรีย์การเพาะเลี้ยงต่อP. syringae pv มะเขือเทศและ cinerea เกิด ดังนั้น thanatin (S) เป็นผู้สมัครสำรองห้องพักแอมป์สำหรับการก่อสร้างของถั่วเหลืองพืชกับต้าน broad-spectrum phytopathogens และกลยุทธ์จะสามารถเชื่อมโยงเพปไทด์ส่งสัญญาณการยีนเป้าหมาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Thanatin (S) เป็นอะนาล็อกของ thanatin, เปปไทด์ต้านจุลชีพแมลงที่มีคลื่นความถี่ที่แข็งแกร่งและกว้างของยาต้านจุลชีพ
กิจกรรม เพื่อที่จะตรวจสอบถ้า thanatin สามารถนำมาใช้ในงานวิศวกรรมพืชดัดแปรพันธุกรรมที่เพิ่มขึ้นสำหรับ
ความต้านทานต่อ phytopathogens, thanatin สังเคราะห์ (S) ถูกนำเข้าสู่ Arabidopsis thaliana
พืช เพื่อเพิ่มระดับการแสดงออกของ thanatin (S) ในพืชลำดับการเข้ารหัสถูกปรับให้เหมาะสมโดย
codon พืชการตั้งค่า เพื่อหลีกเลี่ยงการย่อยสลายโปรติเอสมือถือ, เปปไทด์สัญญาณข้าว Cht1 ถูกหลอมละลายไปยังสถานีเอ็น
ของ thanatin (S) สำหรับหลั่งแสดง thanatin (S) เป็นช่องว่างระหว่างเซลล์ การประเมินมูลค่าการประยุกต์ใช้
thanatin (S) ในการควบคุมโรคพืชลำดับการเข้ารหัสสังเคราะห์เปปไทด์ของสัญญาณ Cht1 (Cht1SP) -thanatin (S)
ถูก ligated ไปยังประตูโรงงานปลายทางเวกเตอร์ไบนารี pGWB11 (ธงที่มีแท็ก) ในขณะเดียวกันเพื่อที่จะสังเกต
การแปล subcellular ของ Cht1SP-thanatin (S) และ -GFP thanatin (S) -GFP ลำดับของ Cht1SP-thanatin (S)
และ thanatin (S) มีการเชื่อมโยงตามลำดับ pGWB5 (ที่มีแท็ก GFP) . โครงสร้างถูกเปลี่ยนเป็น
Arabidopsis พันธุ์ Col-0 และ pad4-1 กลายพันธุ์ผ่านเชื้อ Agrobacterium transformants
กับ Cht1SP-thanatin (S) ยีน -FLAG ฟิวชั่นได้รับการวิเคราะห์โดยวิธี PCR จีโนม PCR เรียลไทม์และ blots ตะวันตกและ
พืช Arabidopsis จำลองพันธุ์แนะนำตามลำดับ Cht1SP-thanatin (S) และ -GFP thanatin (S) -GFP อยู่ สังเกต
โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ confocal พืชดัดแปรพันธุกรรมแสดง Cht1SP-thanatin (S) โปรตีนฟิวชั่น -FLAG แสดงให้เห็นว่าเชื้อรา
กิจกรรมกับซีเนเรีย Botrytis และโรคราแป้งเช่นเดียวกับฤทธิ์ต้านแบคทีเรียกับ Pseudomonas
syringae pv มะเขือเทศ และผลที่ได้จากการสังเกตพบว่า confocal สัญญาณ GFP จาก Cht1SPthanatin (
S) -GFP พืช Arabidopsis จำลองพันธุ์ที่เกิดขึ้นส่วนใหญ่อยู่ในพื้นที่ระหว่างเซลล์ในขณะที่จาก
thanatin (S) -GFP พืชดัดแปรพันธุกรรมที่ตรวจพบส่วนใหญ่อยู่ในพลาสซึมและจากการดัดแปรพันธุกรรมเวกเตอร์ที่ว่างเปล่า
พืชที่ได้รับการกระจายอย่างสม่ำเสมอตลอดทั้งมือถือแสดงให้เห็นว่าสัญญาณเปปไทด์ Cht1 หน้าที่ นอกจากนี้
thanatin (S) และ thanatin (S) -FLAG สังเคราะห์ทางเคมีมีทั้งในหลอดทดลองยาต้านจุลชีพกิจกรรมกับ
พี syringae pv มะเขือเทศและบีซีเนเรีย ดังนั้น thanatin (S) เป็นแอมป์สมัครที่เหมาะสำหรับการก่อสร้างของพันธุ์
พืชที่กอปรด้วยความต้านทานในวงกว้างสเปกตรัมเพื่อ phytopathogens และกลยุทธ์ที่จะเป็นไปได้ที่จะเชื่อมโยงสัญญาณเปปไทด์
ของยีนเป้าหมายที่จะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

thanatin ( s ) เป็นอะนาล็อกของ thanatin แมลงจุลชีพเปปไทด์ที่มีฤทธิ์ต้านจุลชีพที่แข็งแกร่งและสเปกตรัมกว้างของ

เพื่อตรวจสอบ ถ้า thanatin สามารถใช้ในวิศวกรรมพันธุกรรมพืชเพื่อเพิ่มความต้านทานต่อ phytopathogens
, thanatin สังเคราะห์ ( s ) ที่ใช้เป็นพืช Arabidopsis thaliana
.เพื่อเพิ่มระดับของการแสดงออก thanatin ( s ) ในพืช รหัสลำดับมันเหมาะโดย
codon ตั้งค่าโรงงาน เพื่อหลีกเลี่ยงการเสื่อมสภาพของเซลล์โปรสัญญาณเปปไทด์ของข้าว cht1 ถูกหลอมรวมกับขั้วของ thanatin
( s ) หลั่งแสดง thanatin intercellular ( s ) ในช่องว่าง เพื่อประเมินการใช้ค่า
thanatin ( s ) ในการควบคุมโรคพืชการสังเคราะห์ลำดับเปปไทด์สัญญาณ cht1 นะครับ ( cht1sp ) - thanatin ( s )
ถูกผูกโรงงานเกตเวย์ปลายทางไบนารีเวกเตอร์ pgwb11 ( ที่มีแท็กธง ) ในขณะเดียวกัน เพื่อสังเกต
จำกัดตําแหน่งภายในเซลล์ของ cht1sp thanatin ( s ) และ thanatin GFP ( s ) - GFP ลำดับที่ของ cht1sp thanatin ( s )
( s ) ตามลำดับ และ thanatin เชื่อมโยงกับ pgwb5 ( GFP แท็ก )การสร้างถูกเปลี่ยนเป็น
col-0 พันธุ์ Arabidopsis กลายพันธุ์ pad4-1 Agrobacterium ) และผ่านการเปลี่ยนแปลง พลาสมิด
กับ cht1sp thanatin ( s ) ยีนฟิวชั่นธงได้มาจากจีโนมของ PCR แบบเรียลไทม์พีซีอาร์และ blots ตะวันตกและต้นพืช Arabidopsis
แนะนำตามลำดับ cht1sp thanatin ( s ) และ thanatin GFP ( s ) - พบ
โดย GFP ด้วยกล้องจุลทรรศน์ .พืชข้ามพันธุ์แสดง cht1sp thanatin ( s ) - โปรตีนธงแสดงฤทธิ์ต้านรา
ต่อสู้ Botrytis cinerea และ powdery mildew ตลอดจนกิจกรรมต่อต้านแบคทีเรีย Pseudomonas
syringae PV . มะเขือเทศ และผลจากการสังเกต พบว่า GFP ด้วยสัญญาณจาก cht1spthanatin (
) - ยีน GFP Arabidopsis พืชเกิดขึ้นส่วนใหญ่ใน intercellular พื้นที่ในขณะที่จาก
thanatin ( s ) - ยีน GFP พืชส่วนใหญ่ที่ตรวจพบใน cytoplasm และยีนจากพืชเวกเตอร์ที่ว่างเปล่า
กระจายอย่างสม่ำเสมอตลอดเซลล์ , แสดงให้เห็นว่าเปปไทด์สัญญาณ cht1 functioned นอกจากนี้ thanatin
( s ) และ thanatin ( s ) - ธงเคมีสังเคราะห์ได้ทั้งในหลอดทดลองฤทธิ์ต้านจุลินทรีย์ต่อ
P syringae PV . มะเขือเทศและ ขาว . ดังนั้นthanatin ( s ) เป็นผู้สมัครเหมาะสำหรับการก่อสร้างของแอมป์ต้น
พืชเหล่านี้ endowed กับความต้านทาน phytopathogens และกลยุทธ์มีความเป็นไปได้ที่จะเชื่อมโยงสัญญาณเปปไทด์
กับยีนเป้าหมาย