3. Results and discussion3.1. Optim

3. Results and discussion
3.1. Optimization of callus induction medium
Vigorous callus growth was observed throughout the entire culture
period. Embryogenic calli quickly developed in all eight induction
media within the first week of incubation. Callus induction rate was
the highest on medium M11AP (84.0%) followed by M11APC1
(78.7%). However, callus fresh weight was significantly lower on
M11AP than on M11APC1 (Table 2). Overall, M11APC1 was found to
be the most efficient callus induction medium for SA281 among the
eight media tested. Similar experiments were preformed to optimize
callus induction media for Tx430 (Fig. 1c) and 91419R (data not
shown). Results indicated that M11APC1 was the optimal medium for
those two lines as well.
The callus fresh weight was significantly higher onM11AP (0.058 g/IE)
than onM11 (0.030 g/IE) (Table 2), indicating the beneficial effects
of L-asparagine and L-proline on callus growth which is in agreement
with a previous report (Elkonin et al., 1995). We further observed that
callus fresh weight was significantly higher on M11APC1 (0.068 g/IE)
than on M11AP (0.058 g/IE), suggesting that CuSO4•5H2O at 1.0 μM
has a positive effect on callus proliferation. These results highlighted
the importance of an appropriate concentration of additional ingredient
for optimizing callus induction medium in sorghum.
3.2. Optimization of callus regeneration medium
When IE-derived calli were subcultured on regeneration medium,
they turned into green tissue within one week (Fig. 1d). Notably,
calli on regeneration medium with plant growth regulators developed
more effectively than on media without growth regulators. For example,
SA281 calli on B1I1C1 produced maximum number of shoots
(72.6 per IE) (Fig. 1e and f). In contrast, calli on MSC1 produced the
least number of shoots (20.9 per IE) (Table 3). Moreover, BA and IAA
together were better than BA alone for callus regenerability when the
medium B1I1C1 (72.6 per IE) was compared with B2C1 (56.3 per IE).
Additional ingredients in regeneration medium have a significant
impact on regenerability. L-Asparagine and L-proline fostered significant
improvement in the number of shoots on B2C1AP (66.4 per IE) as compared
to that on B2C1 (56.3 per IE). PVP at 1 g/Lwhen supplemented in
B2C1P markedly increased shoot production (65.3 per IE) as compared
to B2C1 without PVP (56.3 per IE). These results are in agreement with
earlier reports (Elkonin et al., 1995; Hagio, 2002). A higher concentration
of CuSO4•5H2Oat1μM(ten-fold higher than that in MS) drastically
enhanced shoot production on B2C1 (56.3 per IE) as compared to that
on B2 (40.6 per IE), confirming the beneficial effect of high Cu level on
sorghum tissue culture (Nirwan and Kothari, 2003). Overall, B1I1C1
was the best regeneration medium for SA281 (Table 3).
In the present system, regeneration rates up to 100% have been
routinely obtained from three tested lines, much higher than 20–50%
recorded earlier for cv. X4004 (Gamborg et al., 1977). Recently, callus
regenerability was improved to 22.8 shoots per IE from sorghum line
IS 3566 (Pola et al., 2008). By comparison, the regenerability was
improved markedly in our experiments; over 60 regenerants were
produced from a single IE of SA281 within eight weeks' incubation
(Fig. 1e, f, g and h).
3.3. Effects of callus age
Callus rapidly grew across the three tested lineswithin twoweeks of
incubation (Fig. 1b and c), with a significant increase in callus fresh
weight (Table 4). However, variation in callus growth was observed
among the tested lines; SA281 callus grew faster than the other two.
The most rapid callus growth occurred between one and two weeks
as demonstrated by weekly callus growth ratio (the fresh weight of
current week divided by the fresh weight of previous week). Both
regeneration rate and regenerability (shoots per IE) peaked at two
weeks across these three lines (Table 4).
Unlike rice embryogenic callus which can maintain regenerability
over 40 weeks (Nabors et al., 1983), sorghum embryogenic callus does
not maintain a useful level of regenerability over fourweeks. The reason
for this phenomenon is, as yet, unknown. Our data from three tested
lines unequivocally demonstrated that the optimal callus age was
two-weeks old. When callus was four-weeks old, the regeneration
rate and regenerability dropped markedly. For instance, SA281 could
produce 59 shoots per IE when callus was two-weeks old; however, it
only generated 3 shoots per IE when callus was four-weeks old
(Table 4). Therefore, callus age plays a critical role on regenerability,

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลการอภิปรายและ
3.1 การเพิ่มประสิทธิภาพของการเหนี่ยวนำแคลลัสขนาดกลาง
พลังการเจริญเติบโตของแคลลัสเป็นที่สังเกตตลอดทั้งวัฒนธรรม
ระยะเวลา เพาะแคลลัสได้รับการพัฒนาอย่างรวดเร็วในทุกแปดเหนี่ยวนำ
สื่อภายในสัปดาห์แรกของการบ่ม แคลลัสอัตราการเหนี่ยวนำเป็น
ที่สูงที่สุดใน M11AP กลาง (84.0%) ตามมาด้วย M11APC1
(78.7%) แต่แคลลัสน้ำหนักสดอย่างมีนัยสำคัญที่ลดลงใน
M11AP กว่า M11APC1 (ตารางที่ 2) โดยรวม, M11APC1 ถูกพบว่า
เป็นสื่อเหนี่ยวนำแคลลัสที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับ SA281 หมู่
แปดสื่อการทดสอบ การทดลองที่คล้ายกัน preformed เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพ
สื่อเหนี่ยวนำแคลลัสสำหรับ Tx430 (รูป. 1c) และ 91419R (ข้อมูลไม่
แสดง) ผลการศึกษาพบว่า M11APC1 เป็นสื่อที่เหมาะสมสำหรับ
ทั้งสองสายเป็นอย่างดี.
แคลลัสน้ำหนักสดสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ onM11AP (0.058 กรัม / IE)
กว่า onM11 (0.030 กรัม / IE) (ตารางที่ 2) แสดงให้เห็นผลประโยชน์
ของ L-asparagine และ L-Proline ต่อการเจริญเติบโตแคลลัสซึ่งอยู่ในข้อตกลง
ที่มีรายงานก่อนหน้านี้ (Elkonin et al., 1995) เรายังตั้งข้อสังเกตว่า
แคลลัสน้ำหนักสดอย่างมีนัยสำคัญที่สูงขึ้นใน M11APC1 (0.068 กรัม / IE)
กว่า M11AP (0.058 กรัม / IE) บอกว่า CuSO4 • 5H2O ที่ 1.0 ไมครอน
มีผลในเชิงบวกต่อการขยายแคลลัส ผลการศึกษานี้เน้น
ความสำคัญของความเข้มข้นที่เหมาะสมของส่วนผสมเพิ่มเติม
เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพสื่อเหนี่ยวนำแคลลัสในข้าวฟ่าง.
3.2 การเพิ่มประสิทธิภาพของสื่อการฟื้นฟูแคลลัส
เมื่อแคลลัส IE มาถูกเชื้อในสื่อฟื้นฟู
พวกเขากลายเป็นเนื้อเยื่อสีเขียวภายในหนึ่งสัปดาห์ (รูป. 1D) ยวด
แคลลัสในสื่อการฟื้นฟูด้วยการควบคุมการเจริญเติบโตการพัฒนา
อย่างมีประสิทธิภาพมากกว่าในสื่อโดยไม่ต้องควบคุมการเจริญเติบโต ตัวอย่างเช่น
SA281 แคลลัสใน B1I1C1 ผลิตเป็นจำนวนสูงสุดของหน่อ
(72.6 ต่อ IE) (รูป. 1e และฉ) ในทางตรงกันข้ามแคลลัสใน MSC1 ผลิต
จำนวนน้อยของหน่อ (20.9 ต่อ IE) (ตารางที่ 3) นอกจากนี้ปริญญาตรีและ IAA
ร่วมกันได้ดีกว่า BA เพียงอย่างเดียวสำหรับ regenerability แคลลัสเมื่อ
B1I1C1 กลาง (72.6 ต่อ IE) เมื่อเทียบกับ B2C1 (56.3 ต่อ IE).
ส่วนผสมเพิ่มเติมในกลางมีการฟื้นฟูอย่างมีนัยสำคัญ
ส่งผลกระทบต่อ regenerability L-Asparagine และ L-Proline ส่งเสริมอย่างมีนัยสำคัญ
ในการปรับปรุงในจำนวนของการถ่ายภาพใน B2C1AP (66.4 ต่อ IE) เมื่อเทียบ
กับที่ใน B2C1 (56.3 ต่อ IE) PVP ที่ 1 กรัม / Lwhen เสริมใน
B2C1P เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดการผลิตการถ่ายทำ (65.3 ต่อ IE) เมื่อเทียบ
เพื่อ B2C1 โดยไม่ต้อง PVP (56.3 ต่อ IE) ผลลัพธ์เหล่านี้อยู่ในข้อตกลงที่มี
รายงานก่อนหน้านี้ (Elkonin, et al, 1995;. โต้ Hagio, 2002) ความเข้มข้นที่สูงขึ้น
ของ CuSO4 •5H2Oat1μM (สิบเท่าสูงกว่าใน MS) อย่างรุนแรง
ที่เพิ่มขึ้นในการผลิตการถ่าย B2C1 (56.3 ต่อ IE) เมื่อเปรียบเทียบกับ
ใน B2 (40.6 ต่อ IE) ยืนยันผลประโยชน์ในระดับสูงใน Cu
ข้าวฟ่าง การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (Nirwan และ Kothari 2003) โดยรวม, B1I1C1
เป็นสื่อกลางในการฟื้นฟูที่ดีที่สุดสำหรับ SA281 (ตารางที่ 3).
ในระบบปัจจุบันอัตราการฟื้นฟูถึง 100% ได้รับการ
ได้รับเป็นประจำจากสามบรรทัดการทดสอบสูงกว่า 20-50%
ที่บันทึกไว้ก่อนหน้านี้สำหรับพันธุ์ X4004 (Gamborg et al., 1977) เมื่อเร็ว ๆ นี้แคลลัส
regenerability ได้รับการปรับปรุงเพื่อ 22.8 ยอดต่อ IE จากบรรทัดข้าวฟ่าง
IS 3566 (Pola et al., 2008) โดยเปรียบเทียบ regenerability ได้รับการ
ปรับปรุงให้ดีขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในการทดลองของเรา; กว่า 60 เพาะถูก
ผลิตจาก IE เดียวของ SA281 ภายในบ่มแปดสัปดาห์ '
(รูป. 1E, F, G และเอช).
3.3 ผลของอายุแคลลัส
แคลลัสเติบโตอย่างรวดเร็วทั่วทั้งสามการทดสอบ lineswithin twoweeks ของ
บ่ม (รูปที่ 1b. และค) มีการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในแคลลัสสด
น้ำหนัก (ตารางที่ 4) อย่างไรก็ตามการเปลี่ยนแปลงในการเจริญเติบโตของแคลลัสได้รับการตั้งข้อสังเกต
ในหมู่สายการทดสอบ; แคลลัส SA281 เติบโตเร็วกว่าอีกสอง.
การเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วที่สุดแคลลัสที่เกิดขึ้นระหว่างหนึ่งและสองสัปดาห์ที่ผ่านมา
แสดงให้เห็นว่าอัตราการเจริญเติบโตโดยแคลลัสรายสัปดาห์ (น้ำหนักสดของ
สัปดาห์ปัจจุบันหารด้วยน้ำหนักสดของสัปดาห์ก่อนหน้า) ทั้ง
อัตราการฟื้นฟูและ regenerability (ยอดต่อ IE) แหลมที่สอง
สัปดาห์ที่ผ่านมาทั่วทั้งสามสาย (ตารางที่ 4).
ซึ่งแตกต่างจากข้าวเพาะแคลลัสซึ่งสามารถรักษา regenerability
มากกว่า 40 สัปดาห์ (Nabors et al., 1983), ข้าวฟ่างแคลลัสเพาะไม่
ได้ดูแล ระดับการใช้งานของ regenerability กว่า fourweeks เหตุผล
สำหรับปรากฏการณ์นี้เป็นยังไม่รู้จัก ข้อมูลของเราจากสามการทดสอบ
แสดงให้เห็นถึงเส้นอย่างแจ่มแจ้งว่าอายุแคลลัสที่ดีที่สุดคือ
สองสัปดาห์ เมื่อแคลลัสเป็นสี่สัปดาห์ฟื้นฟู
และอัตราการลดลงอย่างเห็นได้ชัด regenerability ยกตัวอย่างเช่น SA281 สามารถ
ผลิต 59 ยอดต่อ IE เมื่อแคลลัสเป็นสองสัปดาห์; แต่ก็
เพียงสร้าง 3 ยอดต่อ IE เมื่อแคลลัสเป็นสี่สัปดาห์
(ตารางที่ 4) ดังนั้นอายุแคลลัสมีบทบาทสำคัญใน regenerability,

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 ผลและการอภิปราย
3.1 . การเพิ่มประสิทธิภาพของ callus induction medium
แข็งแรงการเจริญเติบโต ของแคลลัสพบตลอดระยะเวลาการเลี้ยง
ทั้งหมด เลี้ยงแคลลัสที่พัฒนาอย่างรวดเร็วในสื่อแปดเหนี่ยว
ทั้งหมดภายในสัปดาห์แรกของการบ่ม อัตราสูงสุดที่ชักนำได้
m11ap ขนาดกลาง ( 84.0 % ) รองลงมา คือ m11apc1
( 78.7 เปอร์เซ็นต์ ) อย่างไรก็ตาม น้ำหนักสดแคลลัสลดลงบน
m11ap กว่า m11apc1 ( ตารางที่ 2 ) รวม m11apc1 พบ

จะมีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับ sa281 callus induction medium ในหมู่
8 สื่อทดสอบ การทดลองที่คล้ายกันถูก preformed เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการ tx430
ลัสสื่อ ( ภาพที่ 1c ) และ 91419r ( ข้อมูลไม่
แสดง ) ผลการศึกษาพบว่า m11apc1 เป็นอาหารที่เหมาะสมสำหรับ

ทั้งสองเส้นได้เป็นอย่างดีอาหารน้ำหนักสดสูงกว่า onm11ap ( 0.056 กรัม / IE )
กว่า onm11 ( 0.030 กรัม / IE ) ( ตารางที่ 2 ) แสดงผลและประโยชน์ของโพร
Name ในการเจริญเติบโต ของแคลลัสซึ่งอยู่ในข้อตกลง
กับรายงานก่อนหน้า ( elkonin et al . , 1995 ) เราสังเกตต่อไปว่า น้ำหนักสด
ลัสสูงกว่าใน m11apc1 ( 0.068 กรัม / IE )
กว่า m11ap ( 0.056 กรัม / IE )แนะนำว่า CuSO4 - อิเล็กที่ 1.0 μ M
มีผลบวกต่อแคลลัสของการแพร่เชื้อ ผลลัพธ์เหล่านี้เน้นความสำคัญของเหมาะสม

ส่วนประกอบเพิ่มเติมสำหรับการเพิ่มความเข้มข้นของชักนำขนาดกลาง ในข้าวฟ่าง
3.2 . การเพิ่มประสิทธิภาพของแคลลัสขนาดกลาง
เมื่อ IE ได้แคลลัสบน regeneration medium
subcultured , พวกเขากลายเป็นเนื้อเยื่อสีเขียวภายในหนึ่งสัปดาห์ ( ฟิค1D ) บริษัทแคลลัสบน regeneration medium

ด้วยสารควบคุมการเจริญเติบโตพัฒนาได้อย่างมีประสิทธิภาพมากกว่าในสื่อโดยไม่ต้องสารควบคุมการเจริญเติบโต ตัวอย่างเช่น
sa281 แคลลัสบน b1i1c1 ผลิตจำนวนสูงสุดของยอด
( ดอกเบี้ยต่อ IE ) ( ภาพที่ 1e และ F ) ในทางตรงกันข้าม , แคลลัสบน msc1 ผลิต
อย่างน้อยจำนวนหน่อ ( 20.9 ต่อ IE ) ( ตารางที่ 3 ) นอกจากนี้ บา และ IAA
ด้วยกันดีกว่า BA คนเดียวส่วน regenerability เมื่อ
กลาง b1i1c1 ( ดอกเบี้ยต่อ IE ) เมื่อเทียบกับ b2c1 ( 56.3 ต่อ IE )
เพิ่มเติมส่วนผสมในการปฏิรูปสื่อมีผลกระทบต่อ regenerability
. และการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญ
โพร Name ( ในจํานวนยอด b2c1ap ( 66.4 ต่อ IE ) โดยเมื่อ
นั้น b2c1 ( 56.3 ต่อ IE )PVP ที่ 1 g / lwhen เสริมในการผลิตเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัด
b2c1p ยิง ( การดำเนินงานต่อ IE ) เมื่อเทียบกับ b2c1
โดยไม่ PVP ( 56.3 ต่อ IE ) ผลลัพธ์เหล่านี้อยู่ในข้อตกลงกับ
รายงานก่อนหน้า ( elkonin et al . , 1995 ; hagio , 2002 ) มีความเข้มข้นสูงของ CuSO4 5h2oat1 μ
- M ( สิบเท่าสูงกว่าใน MS ) อย่างมาก
ปรับปรุงการผลิตยิง b2c1 ( 56.3 ต่อ IE ) เมื่อเทียบกับที่
ใน B2 ( 406 ต่อ IE ) , ยืนยันผลประโยชน์ของระดับทองแดงสูง
ข้าวฟ่างเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ( nirwan และ kothari , 2003 ) รวม b1i1c1
สุดยอดการฟื้นฟู ขนาดกลาง sa281 ( ตารางที่ 3 ) .
ในระบบปัจจุบันที่งอกเพิ่มขึ้นถึง 100% ได้
ตรวจได้จากสามทดสอบเส้นที่สูงกว่า 20 – 50%
บันทึกก่อนหน้านี้สำหรับพันธุ์ x4004 ( Gamborg et al . , 1977 ) แคลลัส
เมื่อเร็วๆ นี้