Biofilm susceptibility assayTwo sel

Biofilm susceptibility assay
Two selected isolates were grown in the Calgary Biofilm Device
(commercially available as the MBEC AssayTM for Physiology &
Genetics (P & G), Innovotech Inc., Edmonton, Alberta, Canada).
Table 2. MIC and MBC values (mM) of [Cnmim]Cl against
The biofilm assay was conducted according to the MBECTM assay
protocol supplied by the manufacturer [54], with slight modifications.
Inocula of each organism were prepared in LB broth as
described above and adjusted to a final density of 16107 CFU/ml,
as verified by total viable count. 150 mL of each inoculum were
transferred to each well of the 96-well microtitre plate packaged
with the MBEC assay. The plate lid containing 96 pegs was placed
into the microtitre plate and all plates were incubated in a
gyrorotary incubator at 28uC and 100 rpm for 24 h. Positive and
negative controls were included in each plate (6 replicates). After
24 h, biofilm counts (expressed as CFU/peg) were obtained
according to the manufacturer’s instructions. The peg lid of each
MBEC plate was rinsed three times a 96-well plate containing
0.9% saline and transferred to a ‘challenge’ plate, each well of
which contained 200 mL of LB broth containing the ionic liquids
to be tested, prepared by serial doubling dilutions as described
above. Positive and negative controls were included in each plate.
After 24 hours’ exposure to the challenge plate, the peg lid was
removed, rinsed three times in 0.9% saline and transferred into a
‘recovery’ plate with each well containing 200 mL LBB. All plates
were sonicated for 15 minutes to dislodge the biofilms into the
recovery media and the peg lid was discarded. Recovery plates
were incubated for 48 h and visually checked for turbidity, and an
MBEC value was assigned as the lowest IL concentration at which
no growth was observed after 48 h incubation, which was
confirmed by recording optical density measurements at 550 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Biofilm ภูมิไวรับวิเคราะห์
สองแยกเลือกถูกปลูกในคัลการี Biofilm อุปกรณ์
(ใช้ได้ในเชิงพาณิชย์เป็น AssayTM MBEC สำหรับสรีรวิทยา&
พันธุศาสตร์ (P & G), Innovotech Inc. เอ็ดมันตัน อัลเบอร์ตา แคนาดา) .
2 ตาราง ไมค์และช่อง MBC ค่า (mM) [Cnmim] Cl กับ
วิเคราะห์ biofilm ได้ดำเนินการตามวิเคราะห์ MBECTM
โพรโทคอลโดยผู้ผลิต [54], มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย.
Inocula ของแต่ละสิ่งมีชีวิตถูกเตรียมในซุปปอนด์เป็น
ข้าง และปรับความหนาแน่นที่สุดท้ายของ 16107 CFU/ml,
ตรวจสอบ โดยรวมนับได้ 150 mL ของ inoculum ละถูก
โอนไปด้วยแต่ละจานดี 96 microtitre บรรจุ
กับทดสอบ MBEC ฝาจานประกอบด้วยตอก 96 ถูกวาง
เข้า microtitre แผ่นและแผ่นทั้งหมดถูก incubated ในการ
gyrorotary บ่มเพาะวิสาหกิจ ที่ 28uC และ 100 รอบต่อนาทีสำหรับ 24 h. บวก และ
ลบควบคุมรวมอยู่ในแต่ละแผ่น (เหมือนกับ 6) หลังจาก
24 h นับ biofilm (แสดงเป็น CFU/ตรึง) ได้รับ
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ตรึงฝาแต่ละ
MBEC จานถูก rinsed สามครั้งเป็นจานดี 96 ประกอบด้วย
09% saline และโอนย้าย 'ความท้าทาย' แผ่น แต่ละดีของ
ซึ่งมีอยู่ 200 mL ของซุปปอนด์ที่ประกอบด้วยของเหลว ionic
การทดสอบ จัดทำ โดย dilutions จะประจำตาม
ข้างบน ควบคุมบวก และลบรวมอยู่ในแต่ละจาน
หลังจาก 24 ชั่วโมงสัมผัสกับแผ่นความท้าทาย ตรึงฝาถูก
เอา rinsed สามครั้งในน้ำเกลือ 0.9% และโอนย้ายไปยังการ
จาน 'กู้คืน' มีดีมี 200 mL LBB ทุกแผ่น
ถูก sonicated 15 นาทีเพื่อไล่ออก biofilms เป็น
สื่อการกู้คืนและตรึงฝาถูกละทิ้ง กู้คืนแผ่น
incubated สำหรับ 48 h และเห็นการตรวจสอบความขุ่นของน้ำ และ
MBEC ค่าถูกกำหนดเป็นความเข้มข้น IL ต่ำที่
เจริญเติบโตไม่ได้สังเกตหลังจากฟักตัว 48 h ซึ่ง
ยืนยัน โดยการบันทึกการประเมินความหนาแน่นออปติคัลที่ 550 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไบโอฟิล์มอ่อนแอทดสอบ
สายพันธุ์ที่เลือกทั้งสองถูกปลูกในอุปกรณ์คัลฟิล์มชีว
(ในเชิงพาณิชย์เป็น MBEC AssayTM สรีรวิทยาและ
พันธุศาสตร์ (P & G) INNOVOTECH อิงค์เอดมันตัน, แคนาดา)
ตารางที่ 2. MIC และ MBC ค่า (มิลลิ ) ของ [Cnmim] Cl กับ
ทดสอบไบโอฟิล์มได้รับการดำเนินการตามการวิเคราะห์ MBECTM
โปรโตคอลจัดทำโดยผู้ผลิต [54] ด้วยการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
ส่วนปริมาณของแต่ละสิ่งมีชีวิตที่ถูกจัดทำขึ้น LB น้ำซุปที่
อธิบายไว้ข้างต้นและปรับความหนาแน่นสุดท้ายของ 16107 CFU / ml
เป็นตรวจสอบโดยนับรวมการทำงานได้ 150 มล. ของแต่ละเชื้อถูก
ย้ายไปอยู่ที่ดีของแผ่น microtitre 96 หลุมบรรจุแต่ละ
ที่มีการทดสอบ MBEC ฝาจานที่มี 96 เข็มถูกนำมาวาง
ลงในจาน microtitre และแผ่นทั้งหมดถูกบ่มใน
ตู้ gyrorotary ที่ 28uC และ 100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เชิงบวกและ
เชิงลบควบคุมถูกรวมอยู่ในแต่ละแผ่น (6 ซ้ำ) หลังจาก
24 ชั่วโมงนับไบโอฟิล์ม (แสดงเป็นโคโลนี / ตรึง) ที่ได้รับ
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ฝาตรึงของแต่ละ
แผ่น MBEC ถูกล้างสามครั้งแผ่น 96 หลุมที่มี
0.9% น้ำเกลือและย้ายไป 'ท้าทาย' จานดีของแต่ละ
ที่มี 200 มิลลิลิตรของน้ำซุป LB ที่มีของเหลวไอออนิ
จะได้รับการทดสอบจัดทำขึ้นโดยต่อเนื่อง สองเท่าเจือจางตามที่อธิบายไว้
ข้างต้น ควบคุมบวกและลบถูกรวมอยู่ในแต่ละแผ่น
หลังจาก 24 ชั่วโมงสัมผัสกับแผ่นความท้าทายฝาตรึงถูก
ลบออกล้างสามครั้งใน 0.9% น้ำเกลือและย้ายไป
'กู้' แผ่นกันดีที่มี 200 มิลลิลิตร LBB แผ่นทั้งหมด
ถูก sonicated เวลา 15 นาทีในการขับไล่แผ่นชีวะเป็น
สื่อการกู้คืนและตรึงฝาทิ้ง แผ่นกู้คืน
บ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและตรวจสอบสายตาขุ่นและ
ค่า MBEC รับมอบหมายให้เป็นความเข้มข้นอิลลินอยส์ต่ำสุดที่
ไม่มีการเจริญเติบโตเป็นที่สังเกตหลังจากการบ่ม 48 ชั่วโมงซึ่งได้รับการ
ยืนยันโดยการบันทึกการตรวจวัดความหนาแน่นของแสงที่ 550 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ฟิล์มความไว (
2 เลือกสายพันธุ์ปลูกในคาลการีฟิล์มอุปกรณ์
( อาดเป็น assaytm mbec สำหรับ&พันธุศาสตร์สรีรวิทยา
( P & G ) innovotech อิงค์ , Edmonton , Alberta , Canada )
2 โต๊ะ . ไมค์และ MBC ค่า ( มม. ) [ cnmim ] CL กับ
ฟิล์ม ) ดำเนินการตาม mbectm assay
โปรโตคอลจัดโดยผู้ผลิต [ 54 ]กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย .
inocula ของแต่ละสิ่งมีชีวิตเตรียมน้ำปอนด์เป็น
อธิบายไว้ข้างต้นและปรับความหนาแน่นสุดท้ายของ 16107 CFU / ml พบ
โดยรวมได้นับ 150 มิลลิลิตรของแต่ละเชื้อถูก
โอนกันของ 96 ดี microtitre จานแพคเกจ
กับ mbec ตามลำดับ แผ่นฝาปิดที่มี 96 ตอกอยู่
ใน microtitre จานและจานถูกบ่มในตู้อบที่ 28uc
gyrorotary 100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมง บวก และ ลบ
การควบคุมรวมอยู่ในแต่ละจาน ( 6 นาที ) หลังจาก
24 H , ฟิล์มนับ ( แสดงเป็น cfu / ตรึง ) ได้
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต หมุดฝาของแต่ละคน
mbec จานถูกล้าง 3 ครั้ง 96 ดีจานที่มี
09 % เกลือและโอนไปยัง ' ท้าทาย ' จาน แต่ละอย่างดี
ซึ่งบรรจุ 200 มิลลิลิตรปอนด์อาหารที่มีของเหลวไอออน
จะทดสอบที่เตรียมไว้ โดยเพิ่มอนุกรมวิธีการตามที่อธิบาย
ข้างบน ควบคุมบวกและลบอยู่ในแต่ละจาน
หลังจาก 24 ชั่วโมงแสงความท้าทายจานหมุดฝาปิด
ลบล้างสามครั้งใน 0.9% น้ำเกลือและโอนเข้า
' กู้คืน ' จาน ด้วยกันประกอบด้วย lbb 200 ml . ทั้งหมดเป็นแผ่น
sonicated 15 นาทีเพื่อขับไล่ biofilms ใน
การกู้คืนสื่อและหมุดฝาถูกละทิ้ง การกู้คืนแผ่น
ถูกบ่ม 48 ชั่วโมงและสายตาการตรวจสอบความขุ่น และค่า
mbec ได้รับมอบหมายเป็นค่าความเข้มข้นที่อิล
ไม่เจริญเติบโตพบหลังจากบ่ม 48 ชั่วโมง ซึ่ง
ยืนยันโดยการบันทึกการวัดความหนาแน่นของแสงที่ 550 นาโนเมตร