Antibody labelling. The optimal c

Antibody labelling.
The optimal concentration of antibody for conjugation with colloidal gold was determined by titrating aliquots of diluted IgG with colloidal gold.
The purified IgG was diluted to a concentration of 0.1 mg/ml in sodium phosphate buffer (1 mM, pH 7.0).
Ten aliquots of variable concentrations (0.01-0.1 mg/ml) of the diluted IgG were prepared in 0.2 ml sodium phosphate buffer.
After incubating the mixture for 10 min, 0.1 ml of 10% NaCl was added to the tubes and the absorbance was measured at 520 nm.
The least amount of protein required to stabilize the colloidal gold was identified from the abscissa in the curve drawn from the concentration and the absorbance.
Aliquot (approximately 10 ml) of purified IgG (0.1 mg/ml) was added drop-wise to l00 ml of colloidal-gold solution (pH 8.0) followed by the addition of 10 ml of filtered 10% bovine serum albumin (BSA), pH 8.0 with gentle stirring for 20-25 min.The solution was incubated for 10 min at 25°C and centrifuged at 15,000 g for 30 min at 4°C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การติดฉลากแอนติบอดี.
ความเข้มข้นที่เหมาะสมของแอนติบอดีสำหรับการเชื่อมต่อกันด้วยทองคำคอลลอยด์ถูกกำหนดโดยวิเคราะห์การ aliquots ของ IgG เจือจางด้วยทองคอลลอยด์.
IgG บริสุทธิ์ถูกเจือจางความเข้มข้น 0.1 mg / ml ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซเดียม (1 มิลลิค่า pH 7.0)
สิบ aliquots ความเข้มข้นของตัวแปร (0.01-0.1 mg / ml) ของ IgG ปรับลดได้จัดทำขึ้น 0.2 มล. โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์.
หลังจากฟักผสมเป็นเวลา 10 นาที, 0.1 มล. 10% โซเดียมคลอไรด์ถูกบันทึกอยู่ในท่อและการดูดกลืนแสงที่ถูกวัด ที่ 520 นาโนเมตร.
จำนวนเงินที่น้อยที่สุดของโปรตีนที่จำเป็นในการรักษาเสถียรภาพของทองคอลลอยด์ถูกระบุจากพิกัดในโค้งมาจากความเข้มข้นและการดูดกลืนแสงที่.
aliquot (ประมาณ 10 มล.) ของ IgG บริสุทธิ์ (0.1 mg / ml) ถูกบันทึกแบบดึง ฉลาดที่จะ l00 มล. ของการแก้ปัญหาคอลลอยด์ทอง (pH 8.0) ตามด้วยนอกเหนือจาก 10 มิลลิลิตรกรอง 10% ซีรั่มอัลบูมิวัว (BSA) ที่พีเอช 8.0 กับกวนอ่อนโยน 20-25 แก้ปัญหา min.The ถูกบ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่ 25 องศาเซลเซียสและหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ฉลากแอนติบอดี
เหมาะสมปริมาณแอนติบอดี ) ที่มี Colloidal Gold ถูกกำหนดโดย titrating เฉยๆเมื่อ IgG กับคอลลอยด์ทอง
IgG บริสุทธิ์เจือจางในความเข้มข้น 0.1 มก. / มล. ( 1 มิลลิเมตรในฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 7.0 ) .
10 เฉยๆแปรความเข้มข้น ( 0.01-0.1 mg / ml ) ของค่า IgG ถูกเตรียมใน 02 กรัม โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์
หลังจากไข่ผสมเป็นเวลา 10 นาที 10 % NaCl 0.1 มิลลิลิตรเติมท่อและค่าวัดที่ 520 nm .
จำนวนน้อยที่สุดของโปรตีนต้องทรงตัวทองคอลลอยด์ถูกระบุจาก อักษรในโค้งที่วาดจากความเข้มข้นและค่า .
ส่วนลงตัว ( ประมาณ 10 มล. ) ของ IgG บริสุทธิ์ ( 01 มก. / มล. ) เพิ่ม 100 มิลลิลิตรของสารละลายลดลง ปัญญาทองคอลลอยด์ ( pH 8.0 ) ตามด้วยนอกเหนือจาก 10 มิลลิลิตร กรอง 10% เซรั่มอัลบูมิวัว ( BSA ) pH 8.0 กับอ่อนโยนกวน 20-25 นาที สารละลายที่บ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่ 25 ° C และระดับที่ 15 , 000 กรัม 30 นาทีที่ 4 ° C .