Total RNA was extracted from myceli

Total RNA was extracted from mycelia and leaf tissues using the CTAB method (Ghosh et al., 2012) and a QIAGEN RNeasy Plant mini Kit (Valencia, CA, USA), respectively. One microgram of RNA was then used for cDNA synthesis using the GoScript Reverse Transcription System (Promega, Madison, WI, USA). qPCR was performed as previously described (Bae et al., 2008) using the Mx3000P qPCR System (Agilent, Santa Clara, CA, USA) with SYBR Green qPCR Master Mix (LPS solution, Daejeon, Korea). Primers
were designed using the Primer 3 software from Biology Workbench (http://workbench.sdsc.edu/), with the Arabidopsis and pathogen ACTIN genes used as expression references. Three independent biological replicates were used for all experiments

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากเส้นใยและเนื้อเยื่อใบโดยใช้วิธี CTAB (กอช et al., 2012) และชุด QIAGEN RNeasy โรงงานมินิ (วาเลนเซีย, CA, USA) ตามลำดับ หนึ่งไมโครกรัม RNA จากนั้นก็ใช้สำหรับการสังเคราะห์ cDNA โดยใช้ระบบ GoScript ย้อนกลับถอดความ (Promega, Madison, WI, USA) qPCR ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (แบ้ et al., 2008) โดยใช้ระบบ Mx3000P qPCR (Agilent, ซานตาคลารา, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) กับสีเขียว SYBR qPCR โท Mix (สารละลายซีรี่ส์ Daejeon เกาหลี) ไพรเมอร์
ได้รับการออกแบบโดยใช้ซอฟแวร์ไพรเมอร์ 3 จากชีววิทยา Workbench (http://workbench.sdsc.edu/) กับ Arabidopsis และเชื้อโรคโปรตีนยีนใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงการแสดงออก สามซ้ำชีวภาพอิสระถูกนำมาใช้สำหรับการทดลองทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากใบและเนื้อเยื่อเส้นใยโดยใช้วิธีการ ctab ( ghosh et al . , 2012 ) และเพิ่มพืช rneasy Mini Kit ( บาเลนเซีย , CA , USA ) , ตามลำดับ 1 ไมโครกรัมของ RNA ก็ใช้สำหรับการสังเคราะห์ cDNA ที่ใช้ goscript ถอดความย้อนกลับระบบ ( promega เมดิสัน , WI , USA ) qpcr ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( แบ et al . , 2008 ) การใช้ระบบ qpcr mx3000p ( Agilent , ซานตาคลารา , CA , USA ) สีเขียว SYBR qpcr Master Mix ( สเปรย์หล่อลื่นโซลูชั่น , Daejeon , เกาหลีใต้ ) ไพรเมอร์ถูกออกแบบมาโดยใช้ไพรเมอร์ 3 ซอฟต์แวร์จากโต๊ะชีววิทยา ( http : / / โต๊ะทำงาน sdsc . edu / ) โดย Arabidopsis เชื้อโรคแหล่งอ้างอิงที่ใช้ actin ยีนและการแสดงออก 3 ซ้ำการทดลองทางชีวภาพที่ใช้เป็นอิสระ