In Vitro Fertilization and Embryo C

In Vitro Fertilization and Embryo Culture
Frozen capacitated semen pooled from 4 Hampshire
rams was thawed, and viable sperm were separated
using the swim-up technique (Grazul-Bilska et al.,
2005). The sperm (0.5 to 1.0 × 106 sperm/mL) were
added to the IVF medium containing the oocytes and
incubated for 18 h at 39°C, 5% O2, 5% CO2, and 90%
N2. The presumptive zygotes were then washed 3 times
with culture medium without glucose [synthetic oviductal
fluid supplemented with BSA, glutamine, MEM
nonessential amino acids, BME amino acids (Sigma),
and penicillin/streptomycin] and cultured in the same
medium for 24 h at 39°C, 5% O2, 5% CO2, and 90%
N2 (Grazul-Bilska et al., 2003, 2005). After the 24-h
incubation, dishes were evaluated to determine the
number of cleaved oocytes. Embryos were then transferred
to culture medium containing glucose (1.5 mM).
After an additional 48-h incubation, the developmental
stage was evaluated and embryos were transferred to
fresh culture medium with glucose. Rate of cleavage
(number of cleaved vs. noncleaved oocytes), and rate
of early embryonic development (time and percentage
reaching morula or blastocyst stages) were evaluated
every second day during 8-d culture.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลอดในปัจจุบันและวัฒนธรรมอ่อนน้ำเชื้อแช่แข็งที่ทางถูกพูจากแฮมเชียร์ 4 capacitatedเป็น thawed rams และสเปิร์มได้ถูกแยกออกจากกันการใช้เทคนิคสระว่ายน้ำ (Grazul-Bilska et al.,2005) การอสุจิ (สเปิร์ม 0.5 1.0 × 106 mL)เพิ่มสื่อ IVF ประกอบด้วยการแช่สารละลาย และincubated สำหรับ h 18 ที่ 39° C, 5% O2, 5% CO2 และ 90%N2 Presumptive zygotes ถูกล้าง 3 ครั้งแล้วมีสื่อวัฒนธรรมโดยกลูโคส [หนังสังเคราะห์ oviductalน้ำมันเสริมกับบีเอสเอ glutamine หน่วยความจำกรดอะมิโนไม่จำเป็น กรดอะมิโน BME (ซิกมา),และยา เพนนิซิลลิน/streptomycin] และอ่างเดียวปานกลางใน 24 ชมที่ 39° C, 5% O2, 5% CO2 และ 90%N2 (Grazul Bilska et al., 2003, 2005) หลังจาก 24-hคณะทันตแพทยศาสตร์ อาหารถูกประเมินเพื่อตรวจสอบการจำนวนแหวกแช่สารละลาย โคลนถูกโอนย้ายแล้วการสื่อวัฒนธรรมที่ประกอบด้วยกลูโคส (1.5 mM)หลังจากการเติม 48 h คณะทันตแพทยศาสตร์ การพัฒนามีประเมินระยะ และโคลนถูกโอนย้ายไปสื่อวัฒนธรรมสดกับน้ำตาลกลูโคส อัตราของปริ(จำนวนแหวกเทียบกับแช่สารละลาย noncleaved), และอัตราของการเจริญ (เวลาและเปอร์เซ็นต์เข้าใกล้ morula หรืออดีตขั้น) ได้ประเมินทุกวันที่สองระหว่างวัฒนธรรม 8 d

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปฏิสนธิในหลอดทดลองและวัฒนธรรมตัวอ่อนแช่แข็งน้ำเชื้อ capacitated รวบรวมจาก 4 นิวแฮมป์เชียร์แกะถูกละลายและสเปิร์มที่ทำงานได้ถูกแยกออกโดยใช้เทคนิคว่ายน้ำ(Grazul-Bilska et al., 2005) สเปิร์ม (0.5-1.0 × 106 สเปิร์ม / มิลลิลิตร) ถูกเพิ่มเข้าไปในกลางผสมเทียมที่มีไข่และบ่มเป็นเวลา18 ชั่วโมงที่ 39 ° C, 5% O2, CO2 5% และ 90% N2 zygotes สันนิษฐานถูกล้างแล้ว 3 ครั้งกับสื่อวัฒนธรรมโดยไม่ต้องกลูโคส[สังเคราะห์ท่อนำไข่ของเหลวเสริมด้วยบีเอสเอ, glutamine, MEM กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น, BME กรดอะมิโน (ซิกม่า) และยาปฏิชีวนะ / streptomycin] และเพาะเลี้ยงในเดียวกันสื่อกลางใน24 ชั่วโมงที่ 39 ° C, 5% O2, CO2 5% และ 90% N2 (Grazul-Bilska et al., 2003, 2005) หลังจากที่ตลอด 24 ชั่วโมงบ่มอาหารได้รับการประเมินเพื่อตรวจสอบจำนวนไข่cleaved ตัวอ่อนที่ได้รับจากนั้นก็ย้ายไปยังสื่อวัฒนธรรมที่มีน้ำตาลกลูโคส (1.5 มม.) หลังจากที่เพิ่มบ่ม 48 ชั่วโมงที่พัฒนาขั้นตอนการประเมินและตัวอ่อนที่ถูกย้ายไปเลี้ยงสดกับน้ำตาลกลูโคส อัตราการแตกแยก(จำนวน cleaved กับเซลล์ไข่ noncleaved) และอัตราของการพัฒนาของตัวอ่อนในช่วงต้น(เวลาและร้อยละถึงขั้นตอนมอรูล่าหรือตัวอ่อน) ได้รับการประเมินทุกวันที่สองระหว่างวัฒนธรรม8 d

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การปฏิสนธิในหลอดแก้ว และการเพาะเลี้ยงคัพภะ
capacitated น้ำเชื้อแช่แข็งรวมจาก 4 ทวีป
แกะถูกละลายและได้สเปิร์มจากกัน
ใช้ว่ายน้ำขึ้นเทคนิค ( grazul
bilska et al . , 2005 ) อสุจิ ( 0.5 ถึง 1.0 × 106 อสุจิ / มิลลิลิตร
เพิ่มการ IVF ขนาดกลางที่มีไข่และ
บ่ม 18 H 39 ° C 5 % O2 CO2 5 % และ 90 %
2 . การ zygotes ให้ผลแล้วล้าง 3 ครั้ง
ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อสังเคราะห์ไม่มีกลูโคส [ oviductal
ของเหลวเสริม BSA , กลูตามีน , เมม
กรดอะมิโน bme , กรดอะมิโน ( Sigma ) และสเตร็ปโตมัยซิน
เพนนิซิลลิน / ] และเพาะเลี้ยงในตัวกลางเดียวกัน
24 H 39 ° C 5 % O2 CO2 5 % และ 90 %
2 ( grazul bilska et al . , 2003 , 2005 ) หลังจาก 24-h
บ่มเพาะ อาหาร ได้แก่ การตรวจสอบ
จำนวนของไข่ .เมื่อถูกโอน
วัฒนธรรมอาหารที่มีกลูโคส ( 1.5 มม. ) .
หลังจากบ่ม 30 เพิ่มเติม ขั้นตอนการพัฒนา
ถูกประเมินและตัวอ่อนที่ถูกโอนไปยัง
อาหารเลี้ยงเชื้อบริสุทธิ์กับกลูโคส คะแนนของความแตกแยก
( จำนวนของไข่กับ noncleaved ) และอัตราของการพัฒนาตัวอ่อนในช่วงต้น (

ถึงเวลาและค่าระยะบลาสโตซิส ( PCR หรือประเมิน
)ทุก 2 วัน ระหว่างวัฒนธรรม 8-d .