of the technique, a kit could be en

of the technique, a kit could be envisaged with the cells being
provided lyophilized together with an appropriate aqueous med-
ium to revive the cells, so that the operator can use this kit in a
similar way as in dye penetrant.
4. Materials and methods
To validate the new NDT technique, experiments were per-
formed in the conditions detailed thereafter to confirm the
assumptions previously described.
4.1. Bacterial cells
The bacterial cells used were R. erythropolis DCL14 strain and
the interesting properties for this study are summarized in Table 1.
The bacterium was first isolated by the Division of Industrial
Microbiology of the Wageningen University, The Netherlands,
from a sample collected on a ditch in Reeuwijk [16]. It is deposited
and maintained at the Institute for Biotechnology and Bioengi-
neering, Instituto Superior Técnico, Lisbon, Portugal.
Cells were grown in 100 mL Erlenmeyer flasks containing
20 mL of mineral medium supplemented with 0.25% (v/v) absolute
ethanol (99.9%, Panreac) or 0.25% (v/v) n-hexadecane (99.9%
Sigma-Aldrich) as carbon source. The cells were grown in orbital
shakers (Aralab Lda) at 28 1C and 200 rpm and collected at the end
of the exponential growth phase. After centrifugation, the cells
were washed and ressuspended in phosphate buffer (pH7, 50 mM)
to an optical density (measured at 600 nm) of 1 to standardise the
initial concentration of cells in the assays. To the cell suspension,
a Live/Deads BacLightTM bacterial viability kit from Molecular
Probes (Invitrogen Co.) was added (0.5 μL per 500 μL of cell
suspension). The kit contains a mixture of SYTOs9 green fluor-
escent nucleic acid stain (which stains all bacteria green) and
propidium iodide (which stains only bacteria with damaged
membranes; since it reduces the SYTOs9 fluorescence when they
are both present, non-viable cells are stained red).

4.2. Samples characterization
Three materials were selected and these were: stainless steel
AISI 304L, aluminium alloy AA1100 and electrolytic copper. These
are commonly used materials in engineering, including in micro-
fabrication. It was intended to produce small size defects of well-
known morphology, with the same shape, a part of a scale factor
concerning the dimensions, good reproducibility, and easy to
measure. Therefore, defects were artificially produced using a
micro hardness indenter Mitutoyo HM-112 with different loads

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เทคนิค ชุดที่สามารถเป็น envisaged ที่เซลล์ถูกให้ lyophilized พร้อมที่เหมาะสมอควีเม็ด-ium ฟื้นเซลล์ เพื่อให้พนักงานสามารถใช้ชุดนี้ในการฉันใน penetrant ย้อม4. วัสดุและวิธีการการตรวจสอบเทคนิคผู้ใหม่ ทดลองได้ต่อ-เงื่อนไขรายละเอียดหลังการ confirm ที่เกิดขึ้นสมมติฐานที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้4.1. แบคทีเรียเซลล์เซลล์แบคทีเรียที่ใช้ได้ต้องใช้ R. erythropolis DCL14 และคุณสมบัติน่าสนใจสำหรับการศึกษานี้สามารถสรุปได้ในตารางที่ 1แบคทีเรียถูก first แยกต่างหาก โดยในส่วนของอุตสาหกรรมจุลชีววิทยาของมหาวิทยาลัยอย่างไร Wageningen ประเทศเนเธอร์แลนด์จากตัวอย่างที่เก็บรวบรวมในคูใน Reeuwijk [16] มีการฝากเงินและยังคงอยู่ที่สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพและ Bioengi-neering, Instituto ห้อง Técnico ลิสบอน โปรตุเกส เซลล์ที่โตใน flasks Erlenmeyer 100 มลประกอบด้วยปริมาณ 20 mL ของแร่กลางเสริม ด้วย 0.25% (v/v) แน่นอนเอทานอล (99.9%, Panreac) หรือ 0.25% (v/v) n-hexadecane (99.9%Sigma-Aldrich) เป็นแหล่งคาร์บอน เซลล์เติบโตขึ้นในออร์บิทัลยางมะตอย (Aralab Lda) ที่ 28 1C และ 200 รอบต่อนาที และเก็บรวบรวมในตอนท้ายของเฟสเรขา หลังจาก centrifugation เซลล์ถูกล้าง และ ressuspended ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH7, 50 มม.)จะมีความหนาแน่นออปติคอล (วัดที่ 600 nm) 1 standardise การความเข้มข้นเริ่มต้นของเซลล์ในการ assays เพื่อระงับเซลล์ชุดชีวิตแบคทีเรีย สด/Deads BacLightTM จากโมเลกุลคลิปปากตะเข้ (บริษัท Invitrogen) ถูกเพิ่ม (μL 0.5 ต่อ μL 500 ของเซลล์ระงับ) ชุดประกอบด้วยส่วนผสมของ SYTOs9 สีเขียว fluor-คราบเอ็น escent (ซึ่งคราบสกปรกแบคทีเรียทั้งหมดสีเขียว) และไอโอไดด์ propidium (คราบที่เฉพาะแบคทีเรียกับความเสียหายสาร เนื่องจากมันช่วยลด SYTOs9 fluorescence เมื่อพวกเขามีอยู่ ไม่ได้เซลล์สีแดง)4.2 การจำแนกตัวอย่างเลือกวัสดุที่สาม และมี: เหล็กกล้าไร้สนิมAISI 304L, AA1100 อะลูมิเนียมและทองแดง electrolytic เหล่านี้มีใช้โดยทั่วไปวัสดุวิศวกรรม รวมถึงไมโคร -ประดิษฐ์ สร้างขึ้นเพื่อผลิตขนาดเล็กข้อบกพร่องดี-สัณฐานวิทยาชื่อดัง รูปทรงเดียวกัน เป็นส่วนหนึ่งของตัวคูณสเกลเกี่ยวข้องกับมิติ reproducibility ดี และง่ายต่อการวัด ดังนั้น ข้อบกพร่องถูก artificially ที่ผลิตโดยใช้การอาศัยความแข็งไมโคร Mitutoyo HM-112 กับโหลดแตกต่างกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ของเทคนิค, ชุดอาจจะมีการวาดภาพกับเซลล์ที่มีการ
ให้แห้งพร้อมกับความเหมาะสม med- น้ำ
ium ที่จะฟื้นฟูเซลล์เพื่อให้ผู้ประกอบการสามารถใช้ชุดนี้ใน
ลักษณะที่คล้ายกันในขณะที่สีย้อมแทรกซึม.
4 วัสดุและวิธีการ
ในการตรวจสอบเทคนิค NDT ใหม่ทดลองที่แน่นอน
ที่เกิดขึ้นในเงื่อนไขรายละเอียดหลังจากนั้น con Fi RM
สมมติฐานที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้.
4.1 เซลล์แบคทีเรีย
เซลล์แบคทีเรียสายพันธุ์ที่ได้รับใช้อาร์ erythropolis DCL14 และ
คุณสมบัติที่น่าสนใจสำหรับการศึกษานี้ได้สรุปไว้ในตารางที่ 1.
แบคทีเรียถูกไฟแยกแรกโดยกองอุตสาหกรรม
จุลชีววิทยาของ Wageningen University, เนเธอร์แลนด์,
จากตัวอย่างที่เก็บจาก คลองใน Reeuwijk [16] มันเป็นเงินฝาก
และการบำรุงรักษาที่สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพและ Bioengi-
Neering, Instituto Superior Técnico, ลิสบอน, โปรตุเกส.
เซลล์ที่ถูกปลูกใน 100 มลรูปกรวยชั้นถามที่มี
ปริมาณ 20 มลของกลางแร่เสริมด้วย 0.25% (v / v) แน่นอน
เอทานอล (99.9 % Panreac) หรือ 0.25% (v / v) n-hexadecane (99.9%
Sigma-Aldrich) เป็นแหล่งคาร์บอน เซลล์ที่ถูกปลูกในวงโคจร
อิทธิพล (Aralab Lda) วันที่ 28 1C และ 200 รอบต่อนาทีและเก็บในตอนท้าย
ของระยะการเจริญเติบโต หลังจากการปั่นแยกเซลล์
ถูกล้างและ ressuspended ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH7, 50 มิลลิเมตร)
เพื่อความหนาแน่นของออปติคอล (วัดที่ 600 นาโนเมตร) 1 ที่จะสร้างมาตรฐาน
ความเข้มข้นเริ่มต้นของเซลล์ในการตรวจ การระงับเซลล์
สด / ตายชุดที่มีศักยภาพ BacLightTM แบคทีเรียจากโมเลกุล
Probes (Invitrogen จำกัด ) เพิ่ม (0.5 ไมโครลิตรต่อ 500 ไมโครลิตรของเซลล์
Suspension) ชุดที่มีส่วนผสมของ SYTOs9 สีเขียวชั้น uor-
escent คราบกรดนิวคลีอิก (ซึ่งคราบแบคทีเรียสีเขียว) และ
ไอโอไดด์ propidium (ซึ่งคราบแบคทีเรียเท่านั้นที่มีความเสียหาย
เยื่อเนื่องจากมันช่วยลด SYTOs9 ชั้น uorescence เมื่อพวกเขา
มีทั้งปัจจุบันเซลล์ที่ไม่ทำงานได้เป็น สีแดงสี). 4.2 ตัวอย่างตัวละครสามวัสดุที่ได้รับการคัดเลือกและเหล่านี้คือ: สแตนเลสAISI 304L, AA1100 อลูมิเนียมและทองแดงด้วยไฟฟ้า เหล่านี้เป็นวัสดุที่นิยมใช้ในงานวิศวกรรมรวมทั้งในระดับจุลภาคผลิต มันตั้งใจที่จะผลิตข้อบกพร่องขนาดเล็ก ๆ ของดีที่รู้จักกันในลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่มีรูปร่างเหมือนกันเป็นส่วนหนึ่งของปัจจัยระดับที่เกี่ยวข้องกับมิติ, การทำสำเนาที่ดีและง่ายต่อการวัด ดังนั้นข้อบกพร่องอยู่ถึงแม้ว่าสายศิลปะการผลิตโดยใช้ความแข็งไมโครหัวกด Mitutoyo HM-112 กับโหลดที่แตกต่างกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

of the technique, a kit could be envisaged with the cells being
provided lyophilized together with an appropriate aqueous med-
ium to revive the cells, so that the operator can use this kit in a
similar way as in dye penetrant.
4. Materials and methods
To validate the new NDT technique, experiments were per-
formed in the conditions detailed thereafter to confirm the
assumptions previously described.
4.1. Bacterial cells
The bacterial cells used were R. erythropolis DCL14 strain and
the interesting properties for this study are summarized in Table 1.
The bacterium was first isolated by the Division of Industrial
Microbiology of the Wageningen University, The Netherlands,
from a sample collected on a ditch in Reeuwijk [16]. It is deposited
และเก็บรักษาไว้ที่สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพและ bioengi --
t é cnico neering Instituto superior , ลิสบอน , โปรตุเกส .
เซลล์เติบโตใน 100 ml เออร์เลนเมเยอร์flถามที่มี
20 ml น้ำแร่เติม 0.25 % ( v / v ) แน่นอน
เอทานอล ( 99.9% panreac ) หรือ 0.25 เปอร์เซ็นต์ ( ปริมาตร / 5 ) n-hexadecane ( 99.9%
ซิกม่า Aldrich ) เป็นแหล่งคาร์บอน เซลล์ที่โตในเบ้าตา
shakers (Aralab Lda) at 28 1C and 200 rpm and collected at the end
of the exponential growth phase. After centrifugation, the cells
were washed and ressuspended in phosphate buffer (pH7, 50 mM)
to an optical density (measured at 600 nm) of 1 to standardise the
initial concentration of cells in the assays. To the cell suspension,
a Live/Deads BacLightTM bacterial viability kit from Molecular
Probes (Invitrogen Co.) was added (0.5 μL per 500 μL of cell
suspension). The kit contains a mixture of SYTOs9 green fluor-
escent nucleic acid stain (which stains all bacteria green) and
propidium iodide (which stains only bacteria with damaged
membranes; since it reduces the SYTOs9 fluorescence when they
are both present, non-viable cells are stained red).

4.2. Samples characterization
Three materials were selected and these were: stainless steel
AISI 304L, aluminium alloy AA1100 and electrolytic copper. These
are commonly used materials in engineering, including in micro-
fabrication. It was intended to produce small size defects of well-
known morphology, with the same shape, a part of a scale factor
concerning the dimensions, good reproducibility, and easy to
measure.ดังนั้น จึงจำเป็นต้อง cially ข้อบกพร่องถูกผลิตโดยใช้หัวกด มิตูโตโย hm-112
ไมโครความแข็งแตกต่างกันโหลด