In total, there were three different experimental setups of sample
preparation. For the first setup, mashed carrots were prepared using a
juice maker (Gastroback GmbH, Hollenstedt, Germany). The collected
juice and carrot pulp were mixed in a glass beaker and cooled in
an ice-water bath (4 ± 2 °C) for less than 1 h until PEF treatment.
The conductivity of carrot mash and phosphate buffer was monitored
using a conductivity meter (CyberScan CON 11, Eutech Instruments,
Singapore). Approximately 90 g of mashed carrots (conductivity
of 7.80 ± 0.24 mS/cm) were mixed with 250 g of phosphate buffer
(0.1 M NaH2PO4, pH 6.0 containing 0.5 mM EDTA, conductivity of
7.41 ± 0.19 mS/cm) inside the PEF treatment chamber. For the second
setup, the 80 mm long carrot piece was positioned vertically between
the two parallel stainless steel electrodes of the PEF chamber
(Fig. 1a) so that the carrot fibre direction was perpendicular to the
electrodes. The parallel positioning of the carrot piece was conducted
in the third setup (Fig. 1b) in order for the carrot fibre to be positioned
in parallel to the electrodes. Samples of the second and third setup composed
of 250 g phosphate buffer and one 80 mm long carrot piece (the
weight ranging between 70 and 100 g, depending on the roots diameter)
(Fig. 1) to then proceed with PEF treatment. The optimum pH of
AAO activity in carrots have been found to be at pH 6.0 (Leong & Oey,
2012), therefore carrot samples (mash and solid piece) were suspended
in phosphate buffer (0.1 M NaH2PO4, pH 6.0 containing 0.5 mM EDTA)
during PEF treatment to achieve maximum AAO activity. Meanwhile,
phosphate buffer acts as a buffering medium to help regulate catalytic
activity of enzymes (Good et al., 1966; Kuntz & Kauzmann, 1974). The
added phosphate buffer was then further used immediately as the extraction
buffer (refer Section 2.4) to extract enzymes from the carrot
mash or piece and to recuperate the endogenous enzymes being
released to the buffer during PEF processing. The weight of both carrots
(mash or piece) and phosphate buffer was recorded; with overall total
weight averaged between 320 to 350 g added for each PEF treatment
condition. The resulting total weight (not more than 350 g) filled up
the entire PEF chamber to allow uniform delivery of electric field
strength across two electrodes while avoiding the presence of air
space during PEF treatment. The effectiveness of PEF for enzyme inactivation
between carrot mash and carrot piece was compared through
standardising the ratio of carrot and phosphate buffer (with ratio of
1:2.5) added to the PEF chamber. Each PEF treatment condition was
independently conducted in triplicate.
In total, there were three different experimental setups of samplepreparation. For the first setup, mashed carrots were prepared using ajuice maker (Gastroback GmbH, Hollenstedt, Germany). The collectedjuice and carrot pulp were mixed in a glass beaker and cooled inan ice-water bath (4 ± 2 °C) for less than 1 h until PEF treatment.The conductivity of carrot mash and phosphate buffer was monitoredusing a conductivity meter (CyberScan CON 11, Eutech Instruments,Singapore). Approximately 90 g of mashed carrots (conductivityof 7.80 ± 0.24 mS/cm) were mixed with 250 g of phosphate buffer(0.1 M NaH2PO4, pH 6.0 containing 0.5 mM EDTA, conductivity of7.41 ± 0.19 mS/cm) inside the PEF treatment chamber. For the secondsetup, the 80 mm long carrot piece was positioned vertically betweenthe two parallel stainless steel electrodes of the PEF chamber(Fig. 1a) so that the carrot fibre direction was perpendicular to theelectrodes. The parallel positioning of the carrot piece was conductedin the third setup (Fig. 1b) in order for the carrot fibre to be positionedin parallel to the electrodes. Samples of the second and third setup composedof 250 g phosphate buffer and one 80 mm long carrot piece (theweight ranging between 70 and 100 g, depending on the roots diameter)(Fig. 1) to then proceed with PEF treatment. The optimum pH ofAAO activity in carrots have been found to be at pH 6.0 (Leong & Oey,2012), therefore carrot samples (mash and solid piece) were suspendedin phosphate buffer (0.1 M NaH2PO4, pH 6.0 containing 0.5 mM EDTA)during PEF treatment to achieve maximum AAO activity. Meanwhile,phosphate buffer acts as a buffering medium to help regulate catalyticactivity of enzymes (Good et al., 1966; Kuntz & Kauzmann, 1974). Theadded phosphate buffer was then further used immediately as the extractionbuffer (refer Section 2.4) to extract enzymes from the carrotmash or piece and to recuperate the endogenous enzymes beingreleased to the buffer during PEF processing. The weight of both carrots(mash or piece) and phosphate buffer was recorded; with overall totalweight averaged between 320 to 350 g added for each PEF treatmentcondition. The resulting total weight (not more than 350 g) filled upthe entire PEF chamber to allow uniform delivery of electric fieldstrength across two electrodes while avoiding the presence of airspace during PEF treatment. The effectiveness of PEF for enzyme inactivationbetween carrot mash and carrot piece was compared throughstandardising the ratio of carrot and phosphate buffer (with ratio of1:2.5) added to the PEF chamber. Each PEF treatment condition wasindependently conducted in triplicate.
การแปล กรุณารอสักครู่..

โดยรวมแล้วมีอยู่สามการตั้งค่าการทดลองที่แตกต่างกันของกลุ่มตัวอย่างการเตรียมความพร้อม
สำหรับการติดตั้งครั้งแรก,
แครอทบดได้จัดทำขึ้นโดยใช้เครื่องทำน้ำผลไม้(Gastroback GmbH, Hollenstedt, เยอรมนี) ที่เก็บรวบรวมน้ำผลไม้และเยื่อกระดาษแครอทผสมในบีกเกอร์แก้วและระบายความร้อนในห้องอาบน้ำน้ำแข็งน้ำ(4 ± 2 ° C) น้อยกว่า 1 ชั่วโมงจนการรักษา PEF. การนำของบดแครอทและฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ได้รับการตรวจสอบโดยใช้เครื่องวัดค่าการนำไฟฟ้าที่(CyberScan CON 11 Eutech เครื่องมือ, สิงคโปร์) ประมาณ 90 กรัมแครอทบด (การนำของ7.80 ± 0.24 mS / cm) ได้รับการผสมกับ 250 กรัมฟอสเฟตบัฟเฟอร์(0.1 M NaH2PO4 ค่า pH 6.0 ที่มี 0.5 มิลลิ EDTA การนำของ7.41 ± 0.19 mS / cm) ภายในห้องรักษา PEF . เป็นครั้งที่สองติดตั้ง 80 มมชิ้นแครอทยาวอยู่ในตำแหน่งแนวตั้งระหว่างสองขั้วไฟฟ้าสแตนเลสแบบขนานของห้องPEF (รูป. 1a) เพื่อให้ทิศทางเส้นใยแครอทเป็นแนวตั้งฉากกับขั้วไฟฟ้า ตำแหน่งคู่ขนานของชิ้นแครอทได้ดำเนินการในการตั้งค่าที่สาม (รูป. 1 ข) เพื่อให้เส้นใยแครอทจะวางในแนวขนานกับขั้วไฟฟ้า ตัวอย่างของการตั้งค่าที่สองและสามประกอบด้วย250 กรัมฟอสเฟตบัฟเฟอร์และเป็นหนึ่งใน 80 มมชิ้นแครอทยาว (คนน้ำหนักระหว่าง70 และ 100 กรัมขึ้นอยู่กับขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางราก) (รูปที่. 1) แล้วดำเนินการต่อกับการรักษา PEF ค่า pH ที่เหมาะสมของกิจกรรมAAO ในแครอทได้รับพบว่ามีที่ 6.0 ค่า pH (ลีอองและ Oey, 2012) ดังนั้นตัวอย่างแครอท (บดและชิ้นส่วนที่เป็นของแข็ง) ถูกระงับในฟอสเฟตบัฟเฟอร์(0.1 M NaH2PO4 ค่า pH 6.0 ที่มี 0.5 มิลลิ EDTA) ในระหว่างการรักษา PEF เพื่อให้บรรลุสูงสุดกิจกรรม AAO ในขณะเดียวกันฟอสเฟตบัฟเฟอร์ทำหน้าที่เป็นสื่อกลางในการกำหนดบัฟเฟอร์ที่จะช่วยควบคุมการเร่งปฏิกิริยากิจกรรมของเอนไซม์(Good et al, 1966;. คูนตซ์และ Kauzmann, 1974) ฟอสเฟตบัฟเฟอร์เพิ่มจากนั้นก็ใช้ต่อไปทันทีที่สกัดบัฟเฟอร์ (โปรดดูมาตรา 2.4) การสกัดเอนไซม์จากแครอทบดหรือชิ้นส่วนและจะฟื้นเอนไซม์ภายนอกถูกปล่อยให้บัฟเฟอร์ระหว่างการประมวลผลPEF น้ำหนักของแครอททั้งสอง(บดหรือชิ้นส่วน) และฟอสเฟตบัฟเฟอร์จะถูกบันทึก; มีจำนวนรวมน้ำหนักเฉลี่ยระหว่าง 320-350 กรัมเพิ่มสำหรับแต่ละ PEF รักษาสภาพ น้ำหนักรวมผล (ไม่เกิน 350 กรัม) เติมเต็มห้องทั้งPEF เพื่อให้การส่งมอบเครื่องแบบสนามไฟฟ้าที่มีความแข็งแรงในสองขั้วไฟฟ้าขณะที่หลีกเลี่ยงการปรากฏตัวของอากาศพื้นที่ในระหว่างการรักษาPEF ประสิทธิภาพของการใช้งานสำหรับ PEF เอนไซม์ระหว่างบดแครอทแครอทและชิ้นเมื่อเทียบผ่านมาตรฐานสัดส่วนระหว่างแครอทและฟอสเฟตบัฟเฟอร์(อัตราส่วน1: 2.5) เพิ่มเข้ามาในห้อง PEF แต่ละสภาพ PEF การรักษาได้รับการดำเนินการอย่างเป็นอิสระในการเพิ่มขึ้นสามเท่า
การแปล กรุณารอสักครู่..
