This work reports the composition and succession of tetracycline- and erythromycin-resistant bacterial communities in a model cheese, monitored by polymerase chain reaction denaturing gradient gel electrophoresis (PCR-DGGE). Bacterial 16S rRNA genes were examined using this technique to detect structural changes in the cheese microbiota over manufacturing and ripening. Total bacterial genomic DNA, used as a template, was extracted from cultivable bacteria grown without and with tetracycline or erythromycin (both at 25 μg ml− 1) on a non-selective medium used for enumeration of total and viable cells (Plate Count agar with Milk; PCA-M), and from those grown on selective and/or differential agar media used for counting various bacterial groups; i.e., lactic acid bacteria (de Man, Rogosa and Sharpe agar; MRSA), micrococci and staphylococci (Baird–Parker agar; BPA), and enterobacteria (Violet Red Bile Glucose agar; VRBGA). Large numbers of tetracycline- and erythromycin-resistant bacteria were detected in cheese samples at all stages of ripening. Counts of antibiotic-resistant bacteria varied widely depending on the microbial group and the point of sampling. In general, resistant bacteria were 0.5–1.0 Log10 units fewer in number than the corresponding susceptible bacteria. The PCR-DGGE profiles obtained with DNA isolated from the plates for total bacteria and the different bacterial groups suggested Escherichia coli, Lactococcus lactis, Enterococcus faecalis and Staphylococcus sps the microbial types resistant to both antibiotics tested. This study shows the suitability of the PCR-DGGE technique for rapidly identifying and tracking antibiotic resistant populations in cheese and, by extension, in other foods.
งานนี้รายงานองค์ประกอบและสืบทอดของชุมชนแบคทีเรียเตตราไซคลีน และร่างทนชีรุ่น ตรวจสอบ โดยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส denaturing อิเจไล่ระดับสี (PCR-DGGE) แบคทีเรีย 16S rRNA ยีนถูกตรวจสอบโดยใช้เทคนิคนี้เพื่อตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างใน microbiota ชีผ่านการผลิต และสุก รวมแบคทีเรียออกดีเอ็นเอ ใช้เป็นแม่แบบ ถูกแยกจาก cultivable แบคทีเรียเติบโต และไม่ มีเตตราไซคลีนหรือร่าง (ทั้งที่ 25 μ ml− 1) บนสื่อเลือกใช้สำหรับการแจงนับของเซลล์ทั้งหมด และทำงานได้ (จำนวนแผ่นวุ้นนม PCA-M), และ จากที่ปลูกในวุ้นแตกต่าง หรือเลือกสื่อที่ใช้สำหรับการนับกลุ่มแบคทีเรียต่าง ๆ เช่น แบคทีเรียกรดแลคติ (de Man, Rogosa และ Sharpe วุ้น MRSA), micrococci และสแตฟฟิล (วุ้นจัดอันดับ – ปาร์คเกอร์ BPA), และ enterobacteria (วุ้นสีม่วงแดงน้ำดีกลูโคส VRBGA) เตตราไซคลีน และร่างทนแบคทีเรียจำนวนมากถูกตรวจพบในตัวอย่างชีขั้นสุก นับจำนวนของเชื้อแบคทีเรียดื้อหลากหลายขึ้นอยู่กับกลุ่มจุลินทรีย์และจุดของการสุ่มตัวอย่าง ทั่วไป แบคทีเรียทนได้ 0.5 – 1.0 หน่วย Log10 น้อยจำนวนกว่าแบคทีเรียไวต่อที่สอดคล้องกัน โปรไฟล์ PCR DGGE ได้รับดีเอ็นเอแยกจากแผ่นสำหรับแบคทีเรียทั้งหมด และแบคทีเรียกลุ่มต่าง ๆ แนะนำ Escherichia coli, Lactococcus lactis, Enterococcus faecalis และทดสอบชนิดจุลินทรีย์ที่ทนทานต่อยาปฏิชีวนะทั้ง sps Staphylococcus การศึกษานี้แสดงความเหมาะสมของเทคนิค PCR DGGE สำหรับอย่างรวดเร็วระบุ และติดตามประชากรดื้อ ในชีส และ นามสกุล ในอาหารอื่น ๆ
การแปล กรุณารอสักครู่..
